JNK對TGF-β1誘導(dǎo)的人肺上皮細胞-間質(zhì)細胞轉(zhuǎn)分化的調(diào)控作用.pdf

1、目的：探討c-Jun氨基末端激酶(JNK)在轉(zhuǎn)化生長因子β1（TGF-β1）誘導(dǎo)的人肺上皮細胞A549轉(zhuǎn)分化中的調(diào)控作用。
　　方法：將體外培養(yǎng)的人肺上皮細胞（A549）隨機分成三組：正常對照組、TGF-β1組及抑制劑組，分別加入0，TGF-β1（10ng/ml）, TGF-β1（10ng/ml）和JNK的特異性抑制劑Sp600125（20umol/l），在3％的血清培養(yǎng)基中培養(yǎng)72小時后光鏡下觀察三組細胞形態(tài)的變化，并通過 RT

2、-PCT檢測各組人肺上皮細胞系（A549）上皮標志物E-鈣黏蛋白(E-cadherin,E-cad)及間充質(zhì)標志物膠原纖維Ⅰ(Collagen fibersⅠ，ColⅠ)和α-平滑肌肌動蛋白（α-Smooth Muscle Actin,α-SMA）的表達的變化，western blot檢測JNK磷酸化（p-JNK）水平的變化。所有實驗步驟至少重復(fù)三遍。
　　結(jié)果：正常對照組體外培養(yǎng)的人肺上皮細胞系（A549）光鏡下細胞形態(tài)為鵝卵石

3、樣緊密排列生長，有E-cad表達和極少量的ColⅠ、α-SMA及p-JNK表達；TGF-β1組72小時后細胞基本長成梭形、紡錘形，E-cad表達下調(diào)，α-SMA、ColⅠ及p-JNK表達增加；抑制劑組72小時后A549細胞形態(tài)和TGF-β1組比較細胞長梭形有所逆轉(zhuǎn)，E-cad表達增加，ColⅠ、α-SMA及p-JNK表達明顯抑制，與正常對照組比較，細胞形態(tài)較扁長，α-SMA、ColⅠ及p-JNK表達無統(tǒng)計學(xué)差異。結(jié)論：JNK信號通路參與