四種不同來源巨噬細胞在M1和M2狀態(tài)下IL-10的表達研究.pdf

1、背景：炎癥細胞可以分泌TNF-α，IFN-γ等促炎因子，也可以分泌IL-4，IL-10等抗炎因子。IL-10可以抑制促炎性因子表達，抑制抗原提呈，抑制炎癥細胞的激活，黏附等多方面發(fā)揮強大的抗炎作用。隨著研究的深入，發(fā)現(xiàn)多種細胞均能分泌IL-10，其中包括單核細胞，巨噬細胞。巨噬細胞是免疫系統(tǒng)的重要組成部分，可以幫助機體抵御微生物的入侵，清除體內(nèi)的腫瘤細胞以及壞死和凋亡的細胞。目前巨噬細胞分類有多種，而世界上公認的巨噬細胞分型方式主要是：

2、M1型巨噬細胞和M2型巨噬細胞，即：在LPS和IFN-γ作用下的巨噬細胞由靜止狀態(tài)極化為M1型；在IL-4刺激下極化為M2型。迄今尚無M1型和M2型巨噬細胞分型的明確標準和定義，而是跟據(jù)其表達的某些生物學標志物和發(fā)揮某些生物學功能來劃分。TNF-α，IL-6，IL-8等促炎細胞因子是M1型巨噬細胞表達的主要標志物，M1型巨噬細胞發(fā)揮促進炎癥反應(yīng)，清除壞死和凋亡的細胞，吞噬病菌等病原微生物等作用；M2型巨噬細胞主要表達抗炎因子如YM1,A

3、rg1,FIZZ1等標志物，發(fā)揮抑制炎癥過度反應(yīng)，促進傷口愈合，利于組織修復(fù)等作用。大多數(shù)研究巨噬細胞的文獻，主要用的巨噬細胞有腹腔巨噬細胞，骨髓間充質(zhì)干細胞誘導(dǎo)的巨噬細胞和巨噬細胞系，而且根據(jù)文獻報道都說明M2型巨噬細胞能夠高表達IL-10，因而也將IL-10看做是M2型巨噬細胞的標志物之一。
　　目的：探討四種來源巨噬細胞優(yōu)劣，及在M1和M2狀態(tài)IL-10的表達。
　　方法：用LPS100 ng/ml+IFN-γ20 n

4、g/ml和IL-420 ng/ml分別刺激四種巨噬細胞，即：RAW264.7巨噬細胞系、原代腹腔巨噬細胞、巰基乙酸鹽誘導(dǎo)的腹腔原代巨噬細胞、骨髓間充質(zhì)干細胞誘導(dǎo)的巨噬細胞。運用ELISA試劑盒分別檢測0h,2h,4h,8h,16h時，四種類型巨噬細胞IL-10蛋白濃度的變化。運用RT-PCR檢測四種類巨噬細胞IL-10和刺激4h時TNF-α和Arg1的mRNA表達。用流式細胞儀檢測四種類巨噬細胞的細胞純度。
　　結(jié)果：成功復(fù)制和比