鱈魚皮膠原蛋白的制備技術(shù)研究.pdf

1、本試驗以鱈魚皮為原料，對膠原蛋白提取的預(yù)處理方法、制備方法及其鑒定分析進(jìn)行了研究，找出了膠原蛋白提取率較高的工藝流程，得到純度較高的Ⅰ型膠原蛋白，為開發(fā)新型功能食品及對低值水產(chǎn)品加工廢棄物—鱈魚皮高值化提供了理論依據(jù)。
　　 1鱈魚皮的預(yù)處理工藝條件研究
　　 對原料鱈魚皮進(jìn)行脫雜蛋白和脫脂處理，以雜蛋白去除率及膠原蛋白損失率為考察指標(biāo)，結(jié)果表明處理后去除雜蛋白率最高同時膠原蛋白損失率最低的處理工藝條件為:在12℃下，用

2、含7.5％氯化鈉的0.02mol/L氫氧化鈉溶液浸泡鱈魚皮，用磁力攪拌器攪拌處理18h，測定雜蛋白去除率為88.94％，膠原蛋白損失率為3.82％。脫雜蛋白后的鱈魚皮再加入10％正丁醇溶液用磁力攪拌器攪拌漂洗5次，每次1h，脫脂率為88.36％，此工藝條件能起到良好的脫雜蛋白、脫脂作用。
　　 2鱈魚皮膠原蛋白的提取工藝條件研究
　　 (1)以鱈魚皮為原料，以膠原蛋白提取率為考察指標(biāo)，分別采用酸提法和酶提法進(jìn)行提取。酸提

3、試驗采用乙酸、乳酸及檸檬酸，從中選出最適宜的提取酸，進(jìn)行具體的酸提取工藝研究。結(jié)果表明，酸提法的適宜提取條件為:醋酸為最適宜的提取酸，醋酸濃度為0.47mol/L、料液比為1∶33、提取時間為90.2h，所測得的酸溶性膠原蛋白(ASC)提取率的平均值為37.36％。酶提試驗采用胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、復(fù)合蛋白酶及堿性蛋白酶，從中選出最適宜的提取酶，進(jìn)行具體的酶提取工藝研究。酶提法的適宜提取條件為:胃蛋白酶為最適宜的提取酶，加酶量為850u

4、/g、料液比為1∶31、提取時間為17.6h，所測得的酶溶性膠原蛋白(PSC)提取率的平均值為55.96％。
　　 (2)將酸解和酶解提取液用2次分級鹽析法及透析法進(jìn)行純化。純化后的樣品與Ⅰ型膠原蛋白標(biāo)準(zhǔn)品用高效液相色譜法進(jìn)行對照分析，檢驗樣品純度。鱈魚皮ASC、PSC與Ⅰ型膠原蛋白標(biāo)準(zhǔn)品的液相色譜圖譜表現(xiàn)一致，說明所提取ASC及PSC均為Ⅰ型膠原蛋白。通過與Ⅰ型膠原蛋白標(biāo)準(zhǔn)品出峰面積的對比得出ASC及PSC的純度，兩者純度都較

5、高分別達(dá)到97.81％和94.64％。
　　 3鱈魚皮膠原蛋白的鑒定分析
　　 對所提取的膠原蛋白進(jìn)行檢測鑒定，并與Ⅰ型膠原蛋白標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行了比較分析。氨基酸分析說明，提取的鱈魚皮ASC和PSC的氨基酸分布符合Ⅰ型膠原蛋白特征分布。SDS-PAGE電泳測定鱈魚皮ASC和PSC均有5條帶，分別為γ、β1、β2、α1、α2亞基（可能含有α3亞基），膠原蛋白分子量約為220KDa，與Ⅰ型膠原蛋白標(biāo)準(zhǔn)品電泳條帶比較，不含雜帶，證明