脫氧雪腐鐮刀菌烯醇膠體金檢測(cè)試紙條的研制.pdf

1、脫氧雪腐鐮刀菌烯醇（DON）是一種常見(jiàn)的霉菌毒素，世界各國(guó)普遍存在污染，在我國(guó)糧食谷物中其含量超標(biāo)情況嚴(yán)重?，F(xiàn)階段DON的檢測(cè)技術(shù)中TLC、ELISA、HPLC等方法雖然能定量分析，但其操作繁瑣、不能實(shí)現(xiàn)現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)，而實(shí)驗(yàn)研制的膠體金免疫試紙條使用更為方便，適合大批樣品的快速檢測(cè)。
　　本論文對(duì)比了抗壞血酸和檸檬酸三鈉兩種方法制備的膠體金溶液，因抗壞血酸法制備的金顆粒不易保存、穩(wěn)定性差，最終選用2 mL濃度為1％的檸檬酸三鈉來(lái)還

2、原0.01%氯金酸，制備的金顆粒粒徑約為17 nm左右。通過(guò)不斷優(yōu)化，實(shí)驗(yàn)確定1 mL膠體金溶液中添加0.1 mol/L K2CO3溶液17μL，DON抗體5μg，穩(wěn)定劑選擇先加100μL1%PEG，再加入10%BSA100μL，離心純化完后底部沉淀用PBS重懸，金標(biāo)抗體用復(fù)溶液稀釋5倍，檢測(cè)線和質(zhì)控線上分別包被0.4 mg/mL的DON-BSA和0.6 mg/mL的羊抗鼠IgG，NC膜型號(hào)為CN140，在37℃條件下干燥4小時(shí)，包被液

3、0.01 mol/L pH7.4 PBS（5%蔗糖，5%甲醇）中加入0.085μL/μL的10%NaCl來(lái)增強(qiáng)顯色效果。樣品墊型號(hào)為GL-b03，金標(biāo)墊型號(hào)為GL0194。樣品墊處理液為0.01 mol/L pH7.4 PBS（5%蔗糖，1%BSA，0.1%吐溫-20），金標(biāo)墊處理液和金標(biāo)復(fù)溶液均為0.01 mol/L pH7.4 PBS（7%蔗糖，1%BSA，0.4%PVP，1%海藻糖）。
　　LS/T6113-2015中規(guī)定糧