斑馬魚胚胎發(fā)育過程中cyclin C基因母型和合子型表達(dá)的初步研究.pdf

1、斑馬魚胚胎發(fā)育過程中cyclinC基因母型和合子型表達(dá)的初步研究目的：通過研究cyclinC基因在母型和合子型的表達(dá)研究，闡釋其在中囊胚過渡時期的可能作用。方法：(1)通過體外受精的方式，獲取數(shù)量較多的斑馬魚胚胎；(2)使用TRIzolReagent抽提胚胎的總RNA；(3)通過RT-PCR、5’/3’-RACE等方法，在斑馬魚中克隆出全長cyclinC基因，提交GeneBank，并分析基因序列，對不同物種的Cyclin C的基因同源性

2、進(jìn)行分析；(4)通過做Northern blot實(shí)驗(yàn)，來驗(yàn)證該基因的存在以及它的大小；(5)利用地高辛(DIG)標(biāo)記的探針，做不同發(fā)育階段斑馬魚胚胎的整體原位雜交實(shí)驗(yàn)，闡釋cyclinC在時空層面的表達(dá)情況；(6)通過Dct基因來建立siRNA技術(shù)平臺，為進(jìn)一步研究cyclinC基因的功能作準(zhǔn)備。結(jié)論：CyclinC基因在進(jìn)化上，具有很高的保守性，是持家基因的一種；而且它既是母型表達(dá)又是合子型表達(dá)，在胚胎發(fā)育當(dāng)中的作用有待進(jìn)一步的研究。