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文檔簡介
1、受體蛋白激酶(ReceptorProteinKinaseRPK)是動物細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)中重要的信號介導(dǎo)因子。隨著擬南芥基因組測序計(jì)劃完成,發(fā)現(xiàn)在植物中存在大量與動物中受體蛋白激酶結(jié)構(gòu)相似的蛋白,但多數(shù)受體功能尚不確定,故稱之為類受體蛋白激酶(receptor-likekinaseRLK)。富含亮氨酸重復(fù)的亞家族(leucine-richrepeatsRLK,LRR-RLK)是植物類受體蛋白激酶家族(RLK)中最大的亞家族。已有研究表明該亞家
2、族基因在調(diào)控植物體生長發(fā)育和抗逆性方面發(fā)揮重要作用。擬南芥中At1g09970編碼一個含976aa的蛋白質(zhì),蛋白預(yù)測分析顯示該蛋白胞外區(qū)含有12個LRR結(jié)構(gòu)單元,是LRR-RLK亞家族成員。本研究克隆該基因、分析突變體及過表達(dá)植物表型、描述此基因的表達(dá)模式及亞細(xì)胞定位,取得了以下結(jié)果: 1.通過RT-PCR方法獲得At1g099710的cDNA克隆。測序后,構(gòu)建至表達(dá)載體pBI121上,借助農(nóng)桿菌侵染得到其過表達(dá)轉(zhuǎn)基因植物,觀察
3、可知,在平板培養(yǎng)過程中,過表達(dá)植物在根伸長方面有明顯優(yōu)勢。 2.通過半定量RT-PCR的方法研究該基因的表達(dá)模式,表明該基因的表達(dá)貫穿于植物生長發(fā)育全過程,且受不同外界條件的影響。 3.通過PCR和RT-PCR在DNA和RNA水平上篩選鑒定At1g09970對應(yīng)的T-DNA插入失活的突變體。對萌發(fā)和萌發(fā)后階段進(jìn)行突變體的表型分析結(jié)果表明,At1g09970突變體在萌發(fā)后對NaCl敏感,暗示該基因與植物的抗鹽脅迫有關(guān)。
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