活性維生素D3對UUO大鼠腎間質(zhì)TGF-β1-Smads信號軸核酸表達的影響.pdf

1、目的：腎小管間質(zhì)纖維化是大多數(shù)腎臟疾病發(fā)展致終末期腎衰的共同病理特征之一。轉(zhuǎn)化生長因子-β1(TGF-β1)作為重要的致纖維化因子，在腎小球疾病和腎小管間質(zhì)病變發(fā)生和發(fā)展過程中發(fā)揮著重要的作用。1,25-(OH)2D3是體內(nèi)維生素D分別經(jīng)過肝、腎羥化作用后的活性形式，除具有經(jīng)典的調(diào)節(jié)鈣磷代謝和骨礦化作用外，其在腎組織中還具有阻止上皮細胞向間質(zhì)轉(zhuǎn)分化、抑制炎癥反應、抑制腎素血管緊張素系統(tǒng)和改善胰島素抵抗等作用。本實驗通過實時熒光定量聚合酶

2、鏈反應(RT-PCR)法，檢測單側(cè)輸尿管結(jié)扎所致的幼年大鼠腎間質(zhì)纖維化（UUO）模型中TGF-β1、Smad3、Smad7的mRNA表達趨勢及所測各指標間的相關(guān)性，以及應用活性維生素D3干預后各指標的變化情況，并評價活性維生素D3對腎間質(zhì)纖維化的保護作用。
　　方法：選取3-4周齡幼年SD雄性大鼠54只，隨機均分為三組，分別為假手術(shù)組、UUO模型組、活性維生素D3干預組，每組各18只，模型組和干預組采用單側(cè)輸尿管結(jié)扎法制備腎間質(zhì)纖

3、維化模型，假手術(shù)組只分離不結(jié)扎輸尿管。術(shù)后第一天起，干預組給予活性維生素D3(0.1ug/kg?d)溶于0.2ml花生油中灌胃，假手術(shù)組和模型組給予等量花生油灌胃，灌胃滿3、7、14天后每組隨機選取6只大鼠處死，留取左腎組織，采用RT-PCR法檢測各組腎組織中TGF-β1、Smad3、Smad7的mRNA表達趨勢，所有實驗數(shù)據(jù)以X±s表示，采用SPSS17.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計學分析。
　　結(jié)果:1.采用單側(cè)輸尿管結(jié)扎術(shù)制備腎間質(zhì)纖

4、維化模型成功，結(jié)扎側(cè)腎臟體積明顯變大，皮質(zhì)變薄。2.采用RT-PCR法檢測各組各時間點腎組織中TGF-β1、Smad3、Smad7的mRNA表達情況：假手術(shù)組：TGF-β1和Smad3mRNA僅有少量基礎(chǔ)表達，Smad7mRNA有豐富的表達，各時間點組內(nèi)比較差異均無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。UUO模型組：隨著梗阻時間的延長，腎組織中TGF-β1和Smad3mRNA表達顯著性增加，Smad7mRNA表達逐漸減少，組內(nèi)各時間點比較差異有顯

5、著性（P<0.01）；與假手術(shù)組相比，腎組織TGF-β1和Smad3mRNA的表達有所增加，Smad7mRNA的表達有所減少，同時間點組間比較差異有顯著性（P<0.01）。活性維生素D3干預組：隨著梗阻時間的延長，TGF-β1mRNA、Smad3mRNA的表達逐漸減少，而Smad7mRNA的表達呈增高趨勢，組內(nèi)各時間點比較差異有顯著性（P<0.01）；TGF-β1mRNA、Smad3mRNA的表達仍高于假手術(shù)組，低于UUO模型組，而Sm

6、ad7mRNA的表達低于假手術(shù)組，高于UUO模型組，組間同時間點相比差異有顯著性(P<0.01)。3.相關(guān)性分析：UUO模型組中Smad3與TGF-β1成正相關(guān)關(guān)系（r=0.927）；Smad7與TGF-β1比成負相關(guān)關(guān)系（r=-0.960）；Smad3與Smad7成負相關(guān)關(guān)系（r=-0.924）。
　　結(jié)論：1.在幼年大鼠腎間質(zhì)損傷過程中，TGF-β1/Smads信號通路可能具有重要調(diào)控作用，其中TGF-β1、Smad3起促進損