運(yùn)動過程中的羰基應(yīng)激.pdf

1、隨著現(xiàn)在競技運(yùn)動水平的提高和競技比賽的節(jié)奏加快，高水平運(yùn)動隊(duì)(員)之間的較量越來越受到疲勞和傷病的影響，運(yùn)動性疲勞的積累往往是造成傷病的主要原因之一。闡明運(yùn)動性疲勞發(fā)生發(fā)展的機(jī)制對如何采取有效的各種手段消除運(yùn)動性疲勞有著重要的指導(dǎo)意義。
　　 MDA及相關(guān)毒性醛酮是機(jī)體運(yùn)動過程中因氧化應(yīng)激而形成的脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物，是運(yùn)動應(yīng)激中重要的指標(biāo)或所謂“運(yùn)動應(yīng)激因子”(Exercisestress factors、ESFs)。也是自由基氧化

2、和非酶糖基化在體內(nèi)能量代謝過程中必然發(fā)生的兩大類生化副反應(yīng)所產(chǎn)生的最具代表性的活性羰基類物質(zhì)之一。MDA作為脂質(zhì)過氧化過程中產(chǎn)生的一種含有兩個(gè)羰基的化合物，時(shí)時(shí)刻刻都伴隨在生命活動的物質(zhì)代謝和能量代謝之中。由于活性羰基能與氨基(巰基更易)發(fā)生共價(jià)交聯(lián)，即羰-氨反應(yīng)，因此，MDA能與蛋白質(zhì)、核酸進(jìn)一步發(fā)生交聯(lián)反應(yīng)，造成機(jī)體內(nèi)蛋白、脂質(zhì)和核酸等生物大分子發(fā)生廣泛而緩慢的不可修復(fù)性損傷。這也是說明羰基對機(jī)體的毒化損傷無時(shí)不在，無處不在。

3、>　　 體內(nèi)對抗氧化應(yīng)激有三道防御系統(tǒng)，其中抗羰基應(yīng)激體系是核心防御體系，其對活性羰基類物質(zhì)的共軛清理和降解是對抗氧應(yīng)激傷害的關(guān)鍵。因此，基于運(yùn)動性疲勞形成的原因和羰基應(yīng)激學(xué)說的核心理論，我們提出“羰基應(yīng)激是運(yùn)動性疲勞形成的關(guān)鍵環(huán)節(jié)”的觀點(diǎn)。本研究主要以羰基應(yīng)激衰老學(xué)說為理論基礎(chǔ)，將活性羰基類物質(zhì)MDA引入研究體系，建立羰基應(yīng)激和去羰基應(yīng)激的運(yùn)動動物實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?，運(yùn)用實(shí)驗(yàn)室成熟的紅細(xì)胞模型，以羰基應(yīng)激為切入點(diǎn)，通過確定羰基應(yīng)激和去羰基應(yīng)激

4、的一系列實(shí)驗(yàn)，以羰氨反應(yīng)為線索，探討運(yùn)動性疲勞形成的機(jī)制和可能存在的途徑。
　　 由于運(yùn)動中MDA大量增加，毒性作用增強(qiáng)，并且基于血液儲存過程中粘度不斷增加，我們對羰基應(yīng)激與血液粘度改變的相關(guān)性做了研究；建立紅細(xì)胞羰基應(yīng)激實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?，采用血液粘度測量、掃描電鏡觀察、熒光偏振度檢測和液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用(LC/MS-ESI)等方法，從紅細(xì)胞的表觀粘度、形態(tài)學(xué)、羰基蛋白含量、膜流動性及產(chǎn)物鑒定等諸多方面，對血漿和紅細(xì)胞兩個(gè)影響血液粘度的重

5、要因素的分別探討；并選用含有氨基和巰基的生物活性小分子(谷胱甘肽、?；撬?、褪黑素和賴氨酸)進(jìn)行抗羰基應(yīng)激防御體系的初探，建立大鼠跑臺力竭運(yùn)動的疲勞模型，研究了?；撬岷唾嚢彼釋DA的捕獲作用；考慮到運(yùn)動性疲勞形成過程中氨基酸代謝引人注目，我們探討了不同濃度的賴氨酸在不同pH值的條件下與MDA反應(yīng)情況，并探討補(bǔ)充賴氨酸對運(yùn)動大鼠抗疲勞的影響。
　　 結(jié)果表明：
　　 ⑴MDA處理組的紅細(xì)胞懸浮液表觀粘度的明顯增高，GSH則

6、可使紅細(xì)胞表觀粘度值下降；10mmol/L MDA處理后造成紅細(xì)胞形態(tài)發(fā)生聚集，GSH能使聚集紅細(xì)胞分散；GSH能顯著性降低紅細(xì)胞膜蛋白羰基含量(P＜0.01)；50 mmol/LMDA可使紅細(xì)胞膜的熒光偏振度和微粘度上升；20、50、100mmol/L的GSH均可降低紅細(xì)胞膜的熒光偏振度和微粘度。除20mmol/L的GSH處理與對照比較未達(dá)到顯著水平(P＞0.05)外，其余各處理與對照比較均達(dá)到極顯著水平(P＜0.01)。MT能與MD

7、A產(chǎn)生一種新產(chǎn)物(在345.0nm處有最大吸光峰)；MT也能抑制MDA引起的血液粘度升高。
　　 ⑵補(bǔ)充?；撬崮苁勾笫罅哌\(yùn)動時(shí)間延長，但對照組與給藥組之間無顯著性差異(p＞0.05)；力竭運(yùn)動后大鼠的MDA含量顯著地升高(p＜0.01)，SOD活性、GSH含量和總Ca2+濃度均顯著地降低(p＜0.01)，補(bǔ)充?；撬崮苁惯@種變化的幅度顯著減小(p＜0.01)說明?；撬峋哂锌刽驶鶓?yīng)激作用且能保護(hù)線粒體機(jī)能。
　　 ⑶在賴氨

8、酸體系中，賴氨酸與MDA的反應(yīng)產(chǎn)物在400nm附近產(chǎn)生了一個(gè)新的紫外吸收峰，且MDA濃度及反應(yīng)時(shí)間與紫外吸收峰值均呈正相關(guān)；隨著時(shí)間延長，在pH7.4的環(huán)境下紫外吸收峰值的升高最快。運(yùn)動能增加大鼠體內(nèi)氨基酸代謝，并使游離賴氨酸和MDA的濃度升高，補(bǔ)充賴氨酸能顯著降低急性力竭運(yùn)動后大鼠MDA的含量。
　　 綜上所述，通過對MDA羰基毒性和去羰基毒性的研究，我們認(rèn)為“運(yùn)動應(yīng)激因子”中羰基類物質(zhì)的羰-氨反應(yīng)是運(yùn)動性疲勞形成的原因之一。