木聚糖酶水解殼聚糖的研究.pdf

1、國內(nèi)外許多研究報道表明，已發(fā)現(xiàn)有37 種酶能夠非專一性地水解殼聚糖，其中包括纖維素酶、木瓜蛋白酶、半纖維素酶、脂肪酶、溶菌酶等。木聚糖酶是半纖維素酶的一種，目前其水解殼聚糖的研究報道較少。本論文的研究，對于進(jìn)一步闡明木聚糖酶水解殼聚糖的作用機(jī)理具有重要的學(xué)術(shù)意義，同時對于酶法生產(chǎn)低分子量殼聚糖具有重要的應(yīng)用價值。 本文首先對木聚糖酶及其他四種酶水解殼聚糖的活性進(jìn)行了比較，結(jié)果表明：木聚糖酶對殼聚糖的水解活性最高。該酶水解殼聚糖的

2、最佳條件是：pH4.75、溫度60℃、加酶量15％。在底物的濃度不超過20g/L 時，木聚糖酶對殼聚糖的水解過程是符合Michaelis-Menten 方程的，其中，Vmax=15.3μmol/min·L，Km=3.5g/L。這也說明，在底物濃度足夠低的情況下，木聚糖酶對殼聚糖的水解過程是單底物酶促反應(yīng)，每個酶分子只有一個結(jié)合位點(diǎn)，反應(yīng)中只形成一種絡(luò)合物。 在了解酶解動力學(xué)的基礎(chǔ)上，使用Sepharose CL-6B 凝膠色譜法

3、測定了水解產(chǎn)物的分子量分布，并將其他幾種酶水解殼聚糖的產(chǎn)物分子量分布與它進(jìn)行了比較，結(jié)果表明：經(jīng)過木聚糖酶水解6h 后的殼聚糖的分子量集中在8.6kDa左右；而加入滅活木聚糖酶水解6h 后的殼聚糖分子量集中在18.4kDa；，黑曲霉來源的纖維素酶液水解0.5h 后的殼聚糖分子量為11.9kDa；青霉來源的纖維素酶粉水解0.5h 后的殼聚糖分子量為13.3kDa；黑曲霉來源的纖維素酶粉水解0.5h 后的殼聚糖分子量為12.6kDa。