PylBCD和LR蛋白的初步晶體學研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、吡咯賴氨酸是自然界中編碼的第22個氨基酸。在一種被稱為甲烷八疊球菌的古細菌中，它通過琥珀密碼子UAG被合成進參與甲胺代謝途徑的三個蛋白。UAG編碼吡咯賴氨酸的過程需要pylT基因（產(chǎn)生tRNAPyl）和pylS基因（編碼吡咯賴氨酰-tRNA合成酶）。pylB、pylC和pylD基因是吡咯賴氨酸合成所必須的，該過程是非tRNA依賴的。S-腺苷-L-甲硫氨酸(SAM)蛋白PylB介導了賴氨酸變位酶反應，使L-賴氨酸經(jīng)催化產(chǎn)生了3-甲基鳥氨酸

2、，之后3-甲基鳥氨酸與另一分子的L-賴氨酸在PylC的作用下連接在一起，隨后被PylD氧化，產(chǎn)物脫水成環(huán)最終形成L-吡咯賴氨酸。我們在大腸桿菌中克隆并表達了Methanosarcinamazei中的pylB、pylC和pylD基因。通過使用若干種載體，表達純化了帶有不同tag的這三個蛋白。為了得到狀態(tài)均一的蛋白樣品，我們還嘗試了不同方法。
　　 Leptosphaeriarhodopsin是一個微生物視紫質(zhì)家族成員，該家族是一類

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