漢族人群冠心病患者CHI3L1、GP6基因多態(tài)性檢測(cè)意義的研究.pdf

1、目的：冠心病是一種常見的致死致殘性心血管疾病，遺傳因素對(duì)冠心病的發(fā)生有重要作用。已有許多研究發(fā)現(xiàn)冠心病易感性與基因多態(tài)性相關(guān)，是由多個(gè)基因共同作用并與環(huán)境因素相互累加而發(fā)病。多個(gè)基因的不同突變導(dǎo)致不同人群具有不同的冠心病易感性，從而臨床表現(xiàn)各異，治療效果不同。本研究通過(guò)PCR技術(shù)及直接測(cè)序法對(duì)河北漢族冠心病人群CHI3L1基因rs4950928位點(diǎn)、GP6基因rs1671153位點(diǎn)、rs1654419位點(diǎn)的分布情況進(jìn)行研究，比較各SNP

2、位點(diǎn)等位基因在冠心病人群及正常對(duì)照人群中的分布頻率，揭示CHI3L1基因、GP6基因的SNP位點(diǎn)突變與冠心病發(fā)病的關(guān)系及臨床意義。
　　方法：本課題選擇2013年1月至2015年12月在河北省滄州市人民醫(yī)院診治的患者,經(jīng)彩色多普勒超聲、冠脈 CT、冠狀動(dòng)脈造影等檢查確診為冠心病患者共1560例，選取性別年齡匹配的同期健康體檢者900例。除外感染、腫瘤、糖尿病、先心病、嚴(yán)重肝腎疾病、自身免疫性疾病、心肌炎、嚴(yán)重創(chuàng)傷等疾病。取5ml枸

3、櫞酸鈉抗凝血，測(cè)定纖維蛋白原及 D二聚體，取5ml促凝血，用于血清指標(biāo)和炎癥因子的測(cè)定。取5ml EDTA-K2抗凝血，提取基因組 DNA,采用生物學(xué)軟件 Primer7.0設(shè)計(jì)引物，并與GenBank進(jìn)行比對(duì)。采用PCR方法擴(kuò)增目的基因片段，直接測(cè)序法進(jìn)行多態(tài)性分析。統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)在SPSS19.0軟件包中完成，各統(tǒng)計(jì)指標(biāo)均以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（mean±SD）表示。用基因計(jì)數(shù)法計(jì)算各等位基因頻率和基因型頻率；冠心病組與對(duì)照組間等位基因頻率和基因

4、型頻率的差異用X2檢驗(yàn)；并通過(guò)逐步Logistic回歸分析CHI3L1基因、GP6基因的SNP位點(diǎn)多態(tài)性與冠心病的關(guān)系。P<0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)果：
　　1冠心病組和對(duì)照組相比較，性別、年齡、飲酒史均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05），而冠心病組的吸煙率和家族史明顯高于正常對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。
　　2冠心病組血清中TG、LDL、Glu、Fbg、D-D、HCY、HsCRP、CHI3L1、TNF

5、-α、IL-1、GP6、VCAM的濃度均明顯高于對(duì)照組。差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），HDL的水平明顯低于正常對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。
　　3 CHI3L1基因rs4950928位點(diǎn)CC、CT、TT三種不同的基因型，在冠心病組中的頻率分別為0.7808、0.1558、0.0634，CT+TT的頻率為0.2192， T等位基因的頻率是0.1413，而這三種基因型在對(duì)照組中的頻率分別為0.9078、0.0756

6、、0.0166，CT+TT的頻率為0.0922，T等位基因的頻率是0.0544。冠心病組中TT、CT基因型、CT+TT基因型和T等位基因的頻率明顯高于正常對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（X2＝38.38,33.14,64.42，88.37， P<0.05）。
　　4 GP6基因rs1671153位點(diǎn)CC、CA、AA三種不同的基因型，在冠心病組中的頻率分別為0.9276、0.0500、0.0224，CA+AA的頻率為0.0724， A等位

7、基因的頻率是0.047，而這三種基因型在對(duì)照組中的頻率分別為0.9466、0.0467、0.0067，CA+AA的頻率為0.0533，A等位基因的頻率是0.0306。冠心病組中AA基因型和A等位基因的頻率明顯高于正常對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（X2＝8.723，8.811， P<0.05）。
　　5 GP6基因rs1654419位點(diǎn)TT、TC、CC三種不同的基因型，在冠心病組中的頻率分別為0.9288、0.0411、0.0301，

8、TC+CC的頻率為0.0712， C等位基因的頻率是0.0506，而這三種基因型在對(duì)照組中的頻率分別為0.9478、0.0378、0.0144，TC+CC的頻率為0.0522，C等位基因的頻率是0.0805。冠心病組中CC基因型、TC+CC基因型和C等位基因的頻率明顯高于正常對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（X2＝5.96，8.05，P<0.05）。
　　6逐步Logistic回歸：
　　(1)以冠心?。ㄓ?1，無(wú)=0）為因變量，以

9、CHI3L1基因rs4950928位點(diǎn)基因型（CC=0,CT=1,TT=2）、TNF-α、IL-1、Hs-CRP、家族史（有=1，無(wú)=0）、WC、BMI、HCY、Fbg、D-Dimer、TC、TG、HDL、LDL為自變量，進(jìn)行逐步Logistic回歸分析，發(fā)現(xiàn)基因型、LDL與冠心病的發(fā)病關(guān)系密切，能顯著增加其風(fēng)險(xiǎn)，是其發(fā)病的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，OR（95％CI）值分別為2.475(1.172-6.521)，1.597（1.12-2.764）(

10、P<0.05)。
　　(2)以冠心?。ㄓ?1，無(wú)=0）為因變量，以GP6基因rs1671153位點(diǎn)基因型（CC=0,CA=1,AA=2）、TNF-α、IL-1、Hs-CRP、家族史（有=1，無(wú)=0）、WC、BMI、HCY、Fbg、D-Dimer、TC、TG、HDL、LDL為自變量，進(jìn)行逐步Logistic回歸分析，發(fā)現(xiàn)基因型、HCY、LDL與與冠心病的發(fā)病關(guān)系密切，能顯著增加其風(fēng)險(xiǎn)，是其發(fā)病的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，OR（95%CI）值分別

11、為9.576(1.753-52.311)，1.728（1.112-4.327），2.237（1.013-7.453）(P<0.05)。
　　(3)以冠心?。ㄓ?1，無(wú)=0）為因變量，以GP6基因rs1654419位點(diǎn)基因型（TT=0,TC=1,CC=2）、TNF-α、IL-1、Hs-CRP、家族史（有=1，無(wú)=0）、WC、BMI、HCY、Fbg、D-Dimer、TC、TG、HDL、LDL為自變量，進(jìn)行逐步Logistic回歸分析，

12、發(fā)現(xiàn)基因型、LDL、D-Dimer與冠心病的發(fā)病關(guān)系密切，能顯著增加其風(fēng)險(xiǎn)，是其發(fā)病的獨(dú)立危險(xiǎn)因素， OR（95%CI）值分別為4.494(1.398-22.292)，2.26（1.314-5.13），2.582（1.545-12.218）(P<0.05)。
　　結(jié)論：
　　1冠心病組血清中TG、LDL、Glu、Fbg、D-D、HCY、HsCRP、CHI3L1、TNF-α、IL-1、GP6、VCAM的濃度升高與冠心病的發(fā)生密

13、切相關(guān)。
　　2 CHI3L1基因rs4950928位點(diǎn)基因多態(tài)性在冠心病組的分布明顯高于正常對(duì)照組，兩組存在顯著性差異，提示該SNP位點(diǎn)基因多態(tài)型與冠心病密切相關(guān)，TT基因型顯著增加了冠心病的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)。
　　3 GP6基因的rs1671153位點(diǎn)基因多態(tài)性在冠心病組的分布明顯高于正常對(duì)照組，兩組存在顯著性差異，提示該SNP位點(diǎn)基因多態(tài)型與冠心病密切相關(guān)，AA基因型顯著增加了冠心病的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)。
　　4 GP6基因的rs