SIRT1激動劑SRT1720對THP-1細胞增殖、凋亡及細胞周期的影響.pdf

1、目的:通過研究沉默信息調節(jié)因子2-相關酶類-1(SIRT1)的激動劑SRT1720在體外對THP-1細胞（急性單核細胞白血病細胞株）增殖、凋亡及細胞周期的影響，探討SIRT1在急性單核細胞白血病的作用及可能的分子機制，從而為闡明SIRT1在急性單核細胞白血病的診斷、治療中的潛在價值提供理論依據(jù)。
　　方法:
　　1、SIRT1激動劑SRT1720刺激THP-1細胞。取對數(shù)生長期急性單核細胞白血病THP-1細胞，于實驗第1天分

2、別加入SRT1720使終濃度分別為1μM、2μM、3μM、4μM、5μM、6μM，陰性對照組加等體積的二甲基亞砜(DMSO)，未用藥物處理的細胞為空白對照組，摸索SRT1720的有效作用濃度。
　　2、細胞形態(tài)學觀察及生長曲線繪制。每隔24 h在倒置光學顯微鏡下觀察各實驗組THP-1細胞的形態(tài)及生長狀態(tài)，行細胞計數(shù)，記錄并繪制細胞生長曲線。
　　3、細胞增殖檢測。加入SRT1720前先用10μM CSFE標記THP-1細胞，

3、SRT1720作用4天后用流式細胞儀檢測CSFE熒光。
　　4、細胞凋亡檢測。SRT1720作用THP-1細胞48 h后收集細胞，加入凋亡檢測試劑膜聯(lián)蛋白V-異硫氰酸熒光素（FITC）及碘化丙啶(PI)避光孵育后用流式細胞儀檢測。
　　5、細胞周期檢測。SRT1720作用THP-1細胞48 h后收集細胞，并制備單細胞懸液，用70％冰乙醇固定，加核糖核酸酶A(RNase A)水浴后再加細胞周期檢測試劑PI，避光孵育后用流式細胞

4、儀檢測。
　　6、統(tǒng)計學分析。實驗數(shù)據(jù)采用SPSS21.0軟件進行統(tǒng)計學分析，p＜0.05有統(tǒng)計學意義，計量資料采用均數(shù)±標準差（X±S）表示，組間差異采用Student t檢驗或者單因素方差分析(One-Way ANOVA)。
　　結果：
　　1、2～6μM SRT1720組THP-1細胞皺縮、變形，大小不均，細胞核皺縮，有顆粒狀物質及空泡，細胞數(shù)減少，碎片增多，SRT1720濃度越高，時間越長，THP-1細胞形態(tài)改

5、變越明顯。
　　2、2～6μM SRT1720組THP-1細胞第4天增殖指數(shù)明顯下降，SRT1720濃度越高，增殖指數(shù)下降越明顯。
　　3、2～6μM SRT1720組THP-1細胞48 h的凋亡率明顯升高，SRT1720濃度越高，凋亡率升高越明顯。
　　4、3～6μM SRT1720組S期及G2/M期的THP-1細胞48 h百分比明顯增加，SRT1720濃度越高，S期及G2/M期細胞百分比增加越明顯。
　　結論