一種新的F-box蛋白影響果蠅的發(fā)育.pdf

1、F-box是一段大約50個(gè)氨基酸的蛋白質(zhì)基序,其功能主要是作為蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)之間相互作用的結(jié)合位點(diǎn)。具有F-box基序的蛋白被統(tǒng)稱為F-box蛋白。F-box蛋白家族最初被定義為SCF泛素化連接酶復(fù)合物(Skpl,Cullin和F-box蛋白)的成分之一,負(fù)責(zé)介導(dǎo)被降解的底物與Skpl之間的連接。F-box蛋白在細(xì)胞周期調(diào)控、轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)、細(xì)胞凋亡、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)等生命活動(dòng)中發(fā)揮著重要的作用。我們實(shí)驗(yàn)室在果蠅體內(nèi)發(fā)現(xiàn)了一種新的F-box蛋白,將之

2、命名為Fblp(F-box likeprotein)。Fblp在果蠅體內(nèi)由CG4221基因編碼,具有F-box基序,其功能尚未被了解。本文利用果蠅作為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型,應(yīng)用分子生物學(xué)和細(xì)胞生物學(xué)及遺傳學(xué)的手段研究Fblp在果蠅發(fā)育和細(xì)胞周期調(diào)控中的作用,并且希望能夠通過分析Fblp與其下游分子之間的互作,闡明Fblp調(diào)控細(xì)胞周期的分子機(jī)制。
　　 首先我們?cè)诠壋岚蛑羞^表達(dá)Fblp,結(jié)果發(fā)現(xiàn)翅膀變小,由此聯(lián)想到它可能與細(xì)胞周期調(diào)控及

3、個(gè)體發(fā)育相關(guān)。隨后利用果蠅中的P-element(P因子)敲除技術(shù)篩選出兩株Fblp的突變體。通過Real-time PCR檢測(cè)證實(shí)了突變體中Fblp表達(dá)水平確實(shí)顯著降低。之后,我們通過生存能力實(shí)驗(yàn)、抗氧化應(yīng)激實(shí)驗(yàn)等展開對(duì)突變體表型的研究,進(jìn)一步確認(rèn)了我們之前對(duì)Fblp生物學(xué)功能的猜想。為了研究Fblp發(fā)揮生理功能的分子機(jī)制,我們推測(cè)與之功能相關(guān)的一種CAK(細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶活化激酶)類似蛋白CG6800可能是其下游底物。通過構(gòu)建