禾谷鐮刀菌小RNA通路相關基因的功能研究.pdf

1、小麥赤霉病是世界范圍內的一種真菌性病害，禾谷鐮刀菌是我國麥類赤霉病的主要致病種。小麥赤霉病的發(fā)生，不僅嚴重影響了小麥的產(chǎn)量和質量，同時侵染的病粒會產(chǎn)生毒素對人畜健康造成巨大威脅。目前小RNA被證實在多種生物學過程中起到調控作用，其中多個關鍵基因在小RNA的加工和行使功能中發(fā)揮重要作用。如Dicer切割dsRNA或者莖環(huán)結構的RNA前體成為小RNAs分子，Argonaute蛋白是RNA誘導的沉默復合體（RISC）的核心元件。目前有關這些基

2、因在動植物以及部分真菌中的功能研究也有報道，但在禾谷鐮刀菌中這些基因的功能均不明確。RT-PCR結果表明禾谷鐮刀菌PH-1在產(chǎn)孢前后FGDCL2和FGAGL2兩個基因都有表達，我們構建了FGDCL2和FGAGL2的同源重組敲除載體，通過分割標記法用PEG介導的原生質體轉化禾谷鐮刀菌，經(jīng)PCR驗證分別得到了2個DCL2基因敲除轉化子和2個AGO2基因的敲除轉化子。
　　 本文對FGDCL2和FGAGL2的敲除轉化子KOD21和KO

3、A21進行了一系列生物學形狀的研究，發(fā)現(xiàn)敲除轉化子的菌落形態(tài)、菌絲形態(tài)、生長速度、分生孢子產(chǎn)量和形態(tài)，產(chǎn)子囊殼的能力、子囊孢子的形態(tài)及在小麥胚芽鞘上的致病能力與原始菌株PH-1相比均沒有顯著差異。但KOD21在孢子萌發(fā)率、萌發(fā)后芽管的長度及毒素相關基因的表達量與原始菌株差異顯著，KOA21在孢子萌發(fā)過程中菌絲的延長與原始菌株均有顯著性差異。上述研究結果初步表明FGDCL2和FGAGL2基因對禾谷鐮刀菌的孢子萌發(fā)和產(chǎn)毒素方面有一定的影響。