功能化磁性粒子—高效液相色譜分離分析體液中的單胺類神經(jīng)遞質(zhì).pdf

1、單胺類神經(jīng)遞質(zhì)包括兒茶酚胺類的去甲腎上腺素(NE)、腎上腺素(E)和多巴胺(DA)，以及吲哚胺類的5-羥色胺(5-HT)等，這些神經(jīng)遞質(zhì)在生物體內(nèi)起著重要作用，其含量與人體健康密切相關(guān)。由于體液組成復(fù)雜，且單胺類神經(jīng)遞質(zhì)在體液中的含量低，因此，利用前處理過程對(duì)樣品進(jìn)行除雜與富集是非常必要的。與傳統(tǒng)的樣品前處理方法相比，功能化磁性粒子由于具有易于分離、安全無毒等優(yōu)點(diǎn)，在醫(yī)藥、生物、環(huán)保等方面已得到廣泛應(yīng)用，但是將磁性粒子用于體液中單胺類神

2、經(jīng)遞質(zhì)分離分析方面的研究還很少。
　　本文成功地制備了三種不同功能化的磁性粒子，并利用多種手段對(duì)合成的功能化磁性粒子進(jìn)行了表征，分析了它們的性質(zhì)。分別利用這三種功能化磁性粒子對(duì)尿液中單胺類神經(jīng)遞質(zhì)進(jìn)行了分離分析研究，取得了令人滿意的效果。
　　論文主要分為以下四個(gè)部分:
　　1.對(duì)單胺類神經(jīng)遞質(zhì)、單胺類神經(jīng)遞質(zhì)的檢測(cè)方法、單胺類神經(jīng)遞質(zhì)的前處理方法進(jìn)行了綜述，重點(diǎn)介紹了固相萃取在單胺類神經(jīng)遞質(zhì)前處理方面的應(yīng)用及功能化磁

3、性粒子的制備。
　　2.采用多步法制備得到苯硼酸基功能化磁性納米粒子(Fe3O4@APBANPs)，并通過透射電鏡(TEM)、傅里葉紅外光譜儀(FT-IR)、X射線衍射儀(XRD)和振動(dòng)樣品磁強(qiáng)計(jì)(VSM)等不同的表征手段對(duì)合成的Fe3O4@APBANPs粒子進(jìn)行表征。利用Fe3O4@APBANPs對(duì)四種單胺類神經(jīng)遞質(zhì)NE、E、DA及5-HT進(jìn)行分離提取，結(jié)合高效液相色譜-電化學(xué)(HPLC-ECD)分析檢測(cè)。在1mL料液中，確定了

4、單胺類神經(jīng)遞質(zhì)濃度為5μg/mL時(shí)，磁性粒子用量為10mg，萃取時(shí)間為5min，洗脫劑為0.02mol/L鹽酸-甲醇的最佳萃取-洗脫條件。實(shí)驗(yàn)表明，F(xiàn)e3O4@APBANPs磁性粒子對(duì)三種兒茶酚胺類神經(jīng)遞質(zhì)NE、E及DA均展示了較好的提取效果，而對(duì)吲哚胺類神經(jīng)遞質(zhì)5-HT幾乎沒有提取，說明磁性粒子上的硼酸基對(duì)具有鄰位酚羥基結(jié)構(gòu)的化合物具有明顯的選擇性。在優(yōu)化條件下，將該磁性粒子用于分離富集尿樣中的NE、E和DA，結(jié)果顯示，NE、E及DA

5、在0.01～2.0μg/mL濃度范圍內(nèi)色譜峰高與濃度呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系，檢出限分別達(dá)到了7.8ng/mL、2.0ng/mL、7.9ng/mL，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差均小于5.3％。將建立的方法用于人體尿樣中單胺類神經(jīng)遞質(zhì)的測(cè)定，獲得了令人滿意的結(jié)果，說明建立的Fe3O4@APBANPs磁性粒子分離富集-高效液相色譜測(cè)定單胺類神經(jīng)遞質(zhì)的方法是一種簡(jiǎn)單、快速、靈敏的新方法。
　　3.合成了二氧化鈦包裹的介孔功能化磁性納米粒子(Fe3O4@nSi

6、O2@mTiO2NPs)，并利用TEM、FT-IR、XRD、VSM和BET等表征手段對(duì)合成的粒子進(jìn)行了表征分析。利用Fe3O4@nSiO2@mTiO2NPs對(duì)四種單胺類神經(jīng)遞質(zhì)NE、E、DA及5-HT進(jìn)行了分離提取，對(duì)料液相pH、提取時(shí)間、緩沖溶液種類與濃度、磁性粒子用量、洗脫溶劑種類與濃度等條件進(jìn)行了優(yōu)化。結(jié)果表明，合成的磁性粒子具有較高的選擇性，對(duì)NE、E及DA展示了較好的萃取效果，而對(duì)5-HT幾乎沒有萃取。在優(yōu)化條件下，該磁性粒子

7、對(duì)NE、E和DA的富集因子范圍在8-10之間，結(jié)合HPLC-ECD分析檢測(cè)，在0.01-1.5μg/mL濃度范圍內(nèi)，NE、E和DA的峰高與濃度之間呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系，檢出限分別為11.8ng/mL、0.66ng/mL、6.0ng/mL。將建立的方法用于人體尿樣中單胺類神經(jīng)遞質(zhì)的測(cè)定，獲得了令人滿意的結(jié)果，說明建立的Fe3O4@nSiO2@mTiO2NPs磁性粒子分離富集-高效液相色譜測(cè)定單胺類神經(jīng)遞質(zhì)的方法是一種簡(jiǎn)單、快速、靈敏的分析方

8、法。
　　4.采用一步包埋法制備了羧甲基纖維素包裹的功能化磁性納米粒子(Fe3O4@CMCNPs)，并利用TEM、FT-IR、XRD、和VSM等手段對(duì)合成的磁性粒子進(jìn)行了表征。利用Fe3O4@CMCNPs磁性粒子對(duì)四種單胺類神經(jīng)遞質(zhì)NE、E、DA、5-HT進(jìn)行分離提取，對(duì)料液相pH、提取時(shí)間、洗脫溶劑種類與濃度等條件進(jìn)行了優(yōu)化。在優(yōu)化條件下，將該磁性粒子用于分離富集尿樣中的單胺類神經(jīng)遞質(zhì)，結(jié)合高效液相色譜-電化學(xué)方法(HPLC-E