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文檔簡介
1、為了構(gòu)建檢測非氧化還原活性生物分子的傳感器,本課題引入了電活性標(biāo)記物并結(jié)合電化學(xué)檢測手段,制備了高靈敏度、具有選擇性的電化學(xué)生物傳感器并檢測了非氧化還原活性的多肽、蛋白質(zhì)以及DNA。具體的研究工作包括以下兩方面: 一、檢測含有巰基的非氧化還原活性的多肽及DNA。以多肽以及DNA雜交為模型,采用巰基特異性試劑馬來酰亞胺-二茂鐵(Fc-Mi)標(biāo)記并檢測含巰基的多肽以及3’端修飾巰基的寡核苷酸(ODN)。檢測了含有一個半胱氨酸殘基的谷
2、胱甘肽以及含三個半胱氨酸殘基的六肽。通過對吸附在電極表面電活性的Fc-Mi進(jìn)行檢測從而對多肽定量。上述方法可擴(kuò)展到研究ODN的雜交反應(yīng)。通過對完全匹配以及不同數(shù)量堿基錯配的靶點(diǎn)ODN檢測來證實(shí)該方法用于ODN序列特異性分析的可行性。ODN的檢測濃度低達(dá)10 fmol·L-1。 二、檢測非氧化還原活性的蛋白質(zhì)。采用雙功能交聯(lián)試劑4-馬來酰亞胺丁酸N-羥基琥珀酰亞胺酯(GMBS)和電活性標(biāo)記物巰基二茂鐵(Fc-SH)檢測表面固定的蛋
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