紫甘薯花色苷和咖啡酰類活性物質(zhì)的分離、純化與特性.pdf

1、本論文以日本紫甘薯“菱紫”(Ayamurasaki)的塊根為試驗材料，采用微波烘烤-酸性電解水聯(lián)合萃取的方法獲得精提物，經(jīng)AB-8大孔樹脂吸附、醇水溶液洗脫后得到紫甘薯精提物。模型小鼠體內(nèi)活性試驗結(jié)果表明，紫甘薯精提物對小鼠S180肉瘤的生長具有顯著的抑制作用，最高抑制率可接近80％;這種精提物對模型小鼠急性乙醇性肝損傷也有一定的預(yù)防保護(hù)作用，紫甘薯精提物治療組能夠有效地抑制模型小鼠體內(nèi)血清ALT、AST水平的升高，同時明顯促進(jìn)肝臟組織

2、GSH、GST、SOD、CAT水平升高，最高可達(dá)到甚至超過陽性對照水飛薊賓處理組的水平，這說明紫甘薯精提物可能是通過提高小鼠的抗氧化能力而保護(hù)肝臟組織免受乙醇損傷的。
　　 本實驗進(jìn)一步采用半制備型高效液相色譜法對上述紫甘薯精提物中的主要活性成分進(jìn)行了分離、純化和制備，獲得了十種單體組分，其中有五種組分水溶液呈紅色，在可見光譜530nm處有強吸收。根據(jù)質(zhì)譜分析獲得的分子離子、分子碎片的波譜數(shù)據(jù)和有關(guān)報道的結(jié)果分析表明，這五種活性

3、組分都是矢車菊素或芍藥素酰化的葡萄糖苷類化合物，具體為3-O-{6-O-(E)-咖啡酰-2-O-[6-O-(E)-咖啡酰-β-D-吡喃葡萄糖基]-β-D-吡喃葡糖基｝-[5-O-（β-D-吡喃葡萄糖苷）]矢車菊素;3-O-{6-O-(E)-咖啡酰-2-O-[6-O-(E)-阿魏酰-β-D-吡喃葡萄糖基]-β-D-吡喃葡糖基}-[5-O-（β-D-吡喃葡萄糖苷）]矢車菊素;3-O-{6-O-(E)-咖啡酰-2-O-[6-O-(E)-咖啡酰

4、-β-D-吡喃葡萄糖基]-β-D-吡喃葡糖基｝-[5-O-（β-D-吡喃葡萄糖苷）]芍藥素;3-O-{6-O-(E)-咖啡酰-2-O-[6-O-(E)-對羥基苯甲酰-β-D-吡喃葡萄糖基]-β-D-吡喃葡糖苷}-[5-O-（β-D-吡喃葡萄糖苷）]芍藥素;3-O-{6-O-(E)-咖啡酰-2-O-[6-O-(E)-阿魏酰-β-D-吡喃葡糖基]-β-D-吡喃葡糖苷｝-[5-O-（β-D-吡喃葡糖苷）]芍藥素。
　　 這五種紫甘薯花

5、色苷組分色價各異，其中3-O-{6-O-(E)-咖啡酰-2-O-[6-O-(E)-阿魏酰-β-D-吡喃葡糖基]-β-D-吡喃葡糖基}-[5-O-（β-D-吡喃葡糖苷）]芍藥素的色價最高，530nm處的色價值高達(dá)147，即該組分是紫甘薯花色苷中顏色最艷紅的成分，這一結(jié)果對于今后作為綠色健康食品著色劑的紫甘薯新品種的培育有重要的參考價值。
　　 另五種非紅色的成分經(jīng)LC-MS、1H-NMR和13C-NMR波譜分析，鑒定為咖啡酰類物質(zhì)

6、，包括咖啡?；鼘幩岷涂Х弱；擒斩?。在以往的報道中，5-咖啡?；鼘幩帷?，5-二咖啡酰基奎寧酸和4，5-二咖啡?；鼘幩嵋曰ㄉ战Y(jié)合的方式存在于紫甘薯中，沒有在紫甘薯中分離到單體的報道;而咖啡酰基-β-D-呋喃果糖基-α-D-吡喃葡萄苷和反式4，5-二咖啡?；鼘幩嵩谧细适怼傲庾稀钡膲K根中還是首次發(fā)現(xiàn)。
　　 體外抗氧化作用實驗表明，這五種咖啡酰類物質(zhì)的活性最高，其次為前五種花色苷類物質(zhì)，而紫甘薯精提物最低。二苯代苦味酰

7、肼(DPPH)自由基清除能力的活性試驗表明，這些樣品清除DPPH自由基能力較強，其IC50值在7.6～12.4μg/ml范圍內(nèi)。
　　 綜上所述，紫甘薯精提物具有很強的抗腫瘤和保肝護(hù)肝作用。經(jīng)過進(jìn)一步純化獲得了五種呈紅色的花色苷類化合物和五種非紅色的咖啡酰類化合物，其中咖啡酰類組分具有更強的抗氧化活性和清除DPPH自由基的能力。本文的研究結(jié)果為紫甘薯或紫甘薯提取物作為健康食品或綠色食品著色劑的開發(fā)奠定了堅實的基礎(chǔ)，為功能性紫甘薯