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文檔簡(jiǎn)介
1、本文利用核酸適體和蛋白質(zhì)之間的相互作用,構(gòu)建了用于蛋白質(zhì)檢測(cè)的核酸適體傳感器,建立了蛋白質(zhì)尤其是腫瘤標(biāo)志物的超靈敏檢測(cè)方法。具體研究?jī)?nèi)容如下:
(1)采用水相合成法合成了ZnS、CdTe量子點(diǎn),并對(duì)其進(jìn)行表征和優(yōu)化,最終得到分散性良好、熒光性能優(yōu)異的ZnS、CdTe量子點(diǎn),并用作生物分子檢測(cè)的熒光探針。
(2)將量子點(diǎn)與特異性核酸適體偶合制得納米生物探針,利用核酸適體和氧化石墨烯之間的π-π堆積作用,拉近量子
2、點(diǎn)和氧化石墨烯之間的距離,從而實(shí)現(xiàn)量子點(diǎn)和氧化石墨烯之間的熒光共振能量轉(zhuǎn)移,使得量子點(diǎn)的熒光發(fā)生淬滅。當(dāng)目標(biāo)蛋白質(zhì)存在時(shí),由于核酸適體與目標(biāo)蛋白質(zhì)的特異性相互作用,形成核酸適體-蛋白質(zhì)復(fù)合物,因而降低核酸適體與氧化石墨烯之間的π-π堆積作用以及氫鍵作用,使得氧化石墨烯的熒光淬滅效率的降低。基于氧化石墨烯對(duì)核酸適體-量子點(diǎn)和蛋白-核酸適體-量子點(diǎn)之間淬滅效率的不同,可實(shí)現(xiàn)腫瘤標(biāo)志物MUC-1蛋白和含有MUC-1蛋白的乳腺癌細(xì)胞MCF-7的
3、靈敏檢測(cè)。目標(biāo)蛋白濃度在32.4nM到907.2 nM范圍內(nèi),其對(duì)數(shù)和熒光淬滅效率E(E=1-F/F0)有很好的線性關(guān)系,線性方程為E=1.48526-0.41359*log(C),R2=0.998(C為MUC-1蛋白濃度,單位為nM),檢測(cè)限為16nM(空白4倍標(biāo)準(zhǔn)偏差得到)。在細(xì)胞檢測(cè)中,得到的線性方程為:E=1.59091-0.39226*log(C),R2=0.993(C為MCF-7細(xì)胞濃度,單位為cells mL-1),檢測(cè)限
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