2-氨基-1,3-丙二醇類(lèi)基因載體的合成與性能研究及阿比特龍衍生物的合成.pdf

1、本論文工作主要包括兩個(gè)部分:
　　1.2-氨基-1，3-丙二醇類(lèi)基因載體的合成與性能研究
　　基因治療作為一種有效治療遺傳疾病的方法引起廣大研究者的興趣，基因治療的最大障礙就是尋找一種安全高效的載體將外源基因送到靶細(xì)胞，其中陽(yáng)離子脂質(zhì)體作為當(dāng)前最有效的非病毒基因載體備受關(guān)注。
　　本論文以2-氨基-1，3-丙二醇為原料，通過(guò)威廉姆遜醚化、氯乙?；图句@鹽化反應(yīng)，合成了一系列不同長(zhǎng)度烷烴鏈的2-氨基-1，3-丙二醇類(lèi)陽(yáng)離

2、子脂質(zhì):di-C8-Ser-TMA、di-C10-Ser-TMA、di-C12-Ser-TMA、di-C14-Ser-TMA和di-C16-Ser-TMA。
　　采用凝膠阻滯實(shí)驗(yàn)測(cè)定了不同N/P比脂質(zhì)體與DNA的結(jié)合能力，結(jié)果表明，隨著N/P比的增加，脂質(zhì)體與DNA逐漸結(jié)合完全，當(dāng)N/P比為2時(shí)，所有脂質(zhì)體與DNA已完全結(jié)合。利用動(dòng)態(tài)光散射粒度儀測(cè)定陽(yáng)離子脂質(zhì)體以及脂質(zhì)體/DNA復(fù)合物的平均粒徑、Zeta電位和粒徑分散性系數(shù)PDI

3、值。結(jié)果表明各脂質(zhì)體的平均粒徑在80-120 nm之間，Zeta電位為60 mV左右，脂質(zhì)體/DNA復(fù)合物的平均粒徑在150-360 nm之間，Zeta電位為20-50 mV之間，所有體系的PDI值均小于0.4。所有物理參數(shù)表明自制的陽(yáng)離子脂質(zhì)體適于細(xì)胞轉(zhuǎn)染。
　　以商用脂質(zhì)體Lipo2000作陽(yáng)性對(duì)照，在HEK293、Mat和PC-3細(xì)胞中進(jìn)行體外轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)和攝取實(shí)驗(yàn)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)脂質(zhì)體di-C12-Ser-TMA在三種細(xì)胞中都有很高

4、的轉(zhuǎn)染效率和細(xì)胞攝取率，尤其在PC-3細(xì)胞中，轉(zhuǎn)染效率比Lipo2000更優(yōu)。用MTT法檢測(cè)各脂質(zhì)體/DNA復(fù)合物的細(xì)胞毒性，結(jié)果顯示自制的脂質(zhì)體的細(xì)胞存活率均大于70％。因此，脂質(zhì)體di-C12-Ser-TMA有希望發(fā)展為一種有用的基因載體。
　　2.阿比特龍衍生物的合成
　　前列腺癌是全球老年男性中最常見(jiàn)的腫瘤疾病。阿比特龍作為一種有效的CYP17酶抑制劑，廣泛用于治療前列腺癌，但由于其水溶性極差，導(dǎo)致用藥成本極高，毒副