嘔吐毒素與反油酸對(duì)人體HepG2細(xì)胞代謝組的影響.pdf

1、隨著生活水平的提高，食品安全問(wèn)題已經(jīng)成為人們關(guān)注的焦點(diǎn)。在我國(guó)，食品中的嘔吐毒素污染事件的報(bào)道越來(lái)越多，同時(shí)反式脂肪酸廣泛存在于人們的日常膳食。為了協(xié)助相關(guān)部門(mén)制定相關(guān)安全評(píng)價(jià)體系以及提高人們對(duì)食品危害物的認(rèn)知，本文開(kāi)展了嘔吐毒素與反油酸對(duì)人體細(xì)胞代謝組影響的相關(guān)研究：
　　1.嘔吐毒素處理對(duì)人體HepG2細(xì)胞代謝組的影響：近十年來(lái)，嘔吐毒素污染事件的報(bào)道越來(lái)越多。該項(xiàng)研究主要采用基于超高效液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用（UPLC-MS/MS）

2、和氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用（GC-MS）的非靶向代謝組學(xué)技術(shù)，研究確定嘔吐毒素對(duì)人體HepG2細(xì)胞代謝組的影響，加深我們對(duì)嘔吐毒素毒性效應(yīng)分子機(jī)制的了解。根據(jù)初步試驗(yàn)的結(jié)果，嘔吐毒素的處理濃度為10μM，處理時(shí)間分為4小時(shí)（短期處理）和12小時(shí)（長(zhǎng)期處理）。研究結(jié)果表明無(wú)論是短期還是長(zhǎng)期處理，嘔吐毒素顯著影響了HepG2細(xì)胞的代謝變化。嘔吐毒素短期處理主要影響了核苷酸、輔酶和維生素的代謝，而長(zhǎng)期處理顯著影響脂類(lèi)的代謝。代謝組學(xué)的數(shù)據(jù)驗(yàn)證了嘔吐毒

3、素引起氧化壓力而產(chǎn)生毒害的機(jī)制。此外，通過(guò)結(jié)合途徑分析和功能分析，著重分析了嘔吐毒素對(duì)細(xì)胞中氧化還原穩(wěn)態(tài)、能量平衡、脂類(lèi)代謝的影響以及潛在的毒理學(xué)機(jī)制。本研究為進(jìn)一步評(píng)估食品中嘔吐毒素污染的風(fēng)險(xiǎn)提供了理論依據(jù)。
　　2.反油酸處理對(duì)人體HepG2細(xì)胞代謝組的影響：反式脂肪酸廣泛存在于人們的日常膳食。越來(lái)越多的毒理學(xué)和暴露評(píng)估的研究結(jié)果表明反式脂肪酸對(duì)人體健康存在諸多不良影響，因此，反式脂肪酸的攝入已經(jīng)成為一個(gè)食品安全問(wèn)題。本研究以

4、人體細(xì)胞HepG2為模型，首先通過(guò)細(xì)胞毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)研究反油酸對(duì)HepG2細(xì)胞存活率的影響，在此基礎(chǔ)上選擇1.2 mM和1.5 mM的反式油酸處理HepG2細(xì)胞6小時(shí)和12小時(shí)，同時(shí)利用UPLC-MS/MS和GC-MS對(duì)HepG2細(xì)胞的代謝組進(jìn)行檢測(cè)，以了解人體細(xì)胞對(duì)反式油酸的代謝反應(yīng)，明確反式脂肪酸對(duì)人體健康不良影響的分子機(jī)制。結(jié)果表明，反油酸處理引起了HepG2細(xì)胞代謝水平的廣泛變化，特別是脂類(lèi)代謝、膽固醇代謝和碳氮代謝，這種變化因處理