菲律賓蛤仔蒸煮液多糖的提取、分離及其性質(zhì)的研究.pdf

1、我國是世界貝類養(yǎng)殖、加工、消費(fèi)大國，貝類產(chǎn)量占海水養(yǎng)殖總產(chǎn)量的80％，在加工過程中產(chǎn)生大量的貝類蒸煮液，未經(jīng)處理直接排入海中，造成了資源的極大浪費(fèi)和環(huán)境污染。
　　本文以菲律賓蛤仔蒸煮液為原料，采用高溫加熱和低溫旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)的濃縮方式，采取酸沉和醇沉提取粗多糖的方法，并采用DEAE-Sepharose Fast Flow陰離子交換層析柱對粗多糖進(jìn)行了分離純化，將分離純化得到的組分通過高效液相色譜進(jìn)行了單糖組成分析，研究結(jié)果如下：

2、>　?。?）菲律賓蛤仔蒸煮液可溶性固形物含量為1.6%，主要以蛋白質(zhì)和多糖為主，含量分別為0.57%和0.74%，其中，多糖占可溶性固形物的46.3%。
　?。?）采用木瓜蛋白酶和堿性蛋白酶對蒸煮液進(jìn)行酶解，當(dāng)pH和酶解溫度一定時，隨著酶量（2.5%，5%，10%，20%）增加和酶解時間（1h、2h、4h、6h）延長，測得的多糖含量與原蒸煮液的結(jié)果相近，表明酶解對提高菲律賓蛤仔蒸煮液的多糖含量沒有明顯效果。
　　（3）蒸煮液

3、經(jīng)高溫濃縮與低溫濃縮處理后，采用酸沉后再醇沉的多糖提取方法可以顯著提高粗多糖的提取量，較原蒸煮液提取量分別增加了11.1%和14.1%，采取直接醇沉的多糖提取方法則分別增加了10.2%和5.4%。酸沉后再醇沉這一多糖提取方法可以顯著增加所提取的粗多糖中的多糖含量，從原蒸煮液、高溫濃縮和低溫濃縮蒸煮液提取的粗多糖中多糖含量分別為82.5±0.3%、78.8±1.5%和83.3±1.7%，顯著高于直接醇沉提取方法（63.5±2.2%、68.

4、5±4.6%和64.7±1.3%），且蛋白含量明顯低于直接醇沉提取方法。蒸煮液經(jīng)濃縮處理后，酸沉、酸沉后再醇沉：兩種多糖提取方法的多糖總回收率較原蒸煮液提高了12%；高溫濃縮直接醇沉提取的多糖回收率為72.0%，高于低溫濃縮的多糖回收率（65.1%）。
　?。?）采用DEAE-Sepharose Fast Flow凝膠柱層析均將不同濃縮方式處理的菲律賓蛤仔蒸煮液粗多糖進(jìn)行了分離，得到了兩個峰，分別命名為峰1和峰2。其中，峰2于15

5、30 cm-1附近和1400 cm-1附近存在羧酸基-COOH（C=O非對稱伸縮振動和O-H變角振動）吸收峰，峰1則沒有，表明峰2含有糖醛酸組分。
　?。?）運(yùn)用PMP柱前衍生法對低溫濃縮直接醇沉（XC）、低溫濃縮酸沉后再醇沉（XS）、高溫濃縮酸沉后再醇沉（JS）三種方式的多糖組分進(jìn)行了高效液相色譜分析，結(jié)果表明，三種方式處理得到的峰1主要含葡萄糖（Glc），含量分別為89.72%、90.24%和87.36%；峰2主要為葡萄糖（G

6、lc），含量分別為90.60%、81.57%和61.18%，峰2還含有甘露糖（Man）、D-葡萄糖醛酸（GlcUA）、D-(＋)-氨基半乳糖鹽酸鹽（GalN）、氨基葡萄糖（GlcN）、D-半乳糖（Gal）和L-巖藻糖（Fuc），無 D-(＋)-半乳糖醛酸（GalUA）。每種粗多糖中單糖含量最高的都是 Glc，含量分別為47.78%、48.14%和54.98%，其次依次是 Fuc、GlcN和GlcUA。
　　（6）蒸煮液與每種粗多糖