茶葉硒蛋白的分離純化、結構、有機硒形態(tài)及其抗氧化活性研究.pdf

1、硒蛋白不僅是有機硒的主要存在形態(tài)，也是微量元素硒的主要功能形態(tài)，具有抗氧化、抗腫瘤、提高機體免疫等多種生物活性。茶葉硒蛋白（TSPs）是從富硒茶中提取的硒蛋白，目前國內外尚無對茶葉硒蛋白硒形態(tài)及抗氧化活性研究的報道。本論文對茶葉硒蛋白分離純化工藝、結構、有機硒形態(tài)和抗氧化活性進行了研究，得到如下結果：
　?。?）茶葉硒蛋白的分離純化：①評價不同提取溶劑（水、乙醇、鹽溶液和堿液）對茶葉硒蛋白蛋白提取率和品質的影響，超聲輔助法鹽提茶葉

2、硒蛋白的蛋白提取率為44.67％，稍低于超聲輔助法堿提和醇提茶葉硒蛋白的蛋白提取率，但超聲輔助法鹽提的茶葉硒蛋白具有較佳的品質和較高的抗氧化活性；②采用單因素和響應面實驗優(yōu)化超聲輔助法鹽提茶葉硒蛋白的提取工藝，得到最佳工藝：NaCl濃度0.75 mol/L、液固比40 mL/g、超聲時間120 min、提取溫度50℃。此條件下，蛋白實際提取率為63.68%。
　　（2）茶葉硒蛋白結構分析：采用紫外、紅外和圓二色譜等技術分析 DEA

3、E Sepharose FF純化的茶葉硒蛋白（TSPs1、TSPs2和TSPs3）發(fā)現：①茶葉硒蛋白紫外吸收特征峰，在211 nm處有很強的單峰和在280 nm處有弱的肩峰；②圓二色譜技術分析茶葉硒蛋白二級結構發(fā)現，TSPs1主要為無規(guī)卷曲結構（69.8%）；TSPs2主要為α-螺旋結構（64.9%）；TSPs3以α-螺旋（33%）和β-折疊（45.4%）結構為主。
　?。?）茶葉硒蛋白有機硒形態(tài)分析：采用 HPLC-ICP-MS

4、聯用技術研究茶葉硒蛋白有機硒形態(tài)，茶葉硒蛋白粗品和純品中均含硒代半胱氨酸和硒代甲硫氨酸，且硒代半胱氨酸是茶葉硒蛋白有機硒的主要形態(tài)；作為有機硒的補充劑，茶葉硒蛋白粗品優(yōu)于純品。
　?。?）茶葉硒蛋白抗氧化活性研究：i不同溶劑提取的茶葉硒蛋白均具有較強的抗氧化活性，且其抗氧化活性：鹽提的TSPs>水提的TSPs>醇提的TSPs>堿提TSPs；ii茶葉硒蛋白具有較強的抗氧化活性，其抗氧化活性強于不富硒的普通茶葉蛋白，且其抗氧化活性與其