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文檔簡(jiǎn)介
1、乳鐵蛋白(lactoferrin,Lf)是一種天然的功能性蛋白,是人乳中的4種主要蛋白質(zhì)之一。乳鐵蛋白具有抑菌殺菌、調(diào)節(jié)鐵吸收、改善人體腸道菌群、抗氧化、免疫調(diào)節(jié)及抗癌癥作用等。乳鐵蛋白在普通嬰幼兒奶粉中含量很少,但是其對(duì)嬰兒的發(fā)育非常重要,如果在普通嬰幼兒奶粉中添加乳鐵蛋白,使其營(yíng)養(yǎng)成分類似于母乳,將有利于嬰兒的健康,因此在嬰幼兒奶粉中添加乳鐵蛋白是很有意義的。隨著乳鐵蛋白在嬰幼兒奶粉中的廣泛應(yīng)用,為確保對(duì)奶粉的質(zhì)量監(jiān)控,市場(chǎng)亟待建立
2、一種高效的測(cè)定乳制品尤其是嬰幼兒奶粉中乳鐵蛋白的方法。
常用于檢測(cè)乳鐵蛋白的方法都有其相對(duì)應(yīng)的缺點(diǎn),例如分光光度法準(zhǔn)確度不高;酶聯(lián)免疫法(enzymelinked immunosorbent assay,ELISA)由于樣品基質(zhì)效應(yīng)的影響使得相關(guān)研究較少;高效液相色譜法(high-performance liquidchromatography,HPLC)由于分析物與固定相之間較差的相互作用導(dǎo)致分辨率不高,且對(duì)樣品的純度要求高
3、,前處理過(guò)程比較復(fù)雜,過(guò)程中需要大量有機(jī)溶劑;而毛細(xì)管電泳(capillary electrophoresis,CE)以其較快的分離速度、高效的分離效率、所需樣品含量少、簡(jiǎn)單的操作等優(yōu)點(diǎn),在生物、化學(xué)、藥物學(xué)以及食品檢測(cè)等領(lǐng)域顯示出了極大的應(yīng)用前景。本論文采用熱致固化聚(2-甲基-2-噁唑啉)-r-聚甲基丙烯酸縮水甘油酯(PMXAO-r-GMA)涂層毛細(xì)管,利用CE法定量檢測(cè)了嬰幼兒奶粉中的乳鐵蛋白。主要研究?jī)?nèi)容如下:
首先通
4、過(guò)陽(yáng)離子開(kāi)環(huán)聚合得到線形PMOXA,并用甲基丙烯酸(MAA)終止反應(yīng),得到了帶雙鍵的聚(2-甲基-2-噁唑啉)大分子單體(PMOXA-MA)。然后以PMOXA-MA和GMA為單體,采用自由基聚合,合成了一系列不同組成的PMOXA-r-GMA無(wú)規(guī)共聚物。然后通過(guò)一步加熱法將PMOXA-r-GMA涂覆在毛細(xì)管內(nèi)壁,形成共價(jià)鍵涂層??疾炝薖MOXA-r-GMA聚合物的濃度,PMOXA-MA與GMA的比例對(duì)分離四種堿性蛋白(溶菌酶、細(xì)胞色素c、
5、核糖核酸酶A和胰凝乳蛋白酶原)的影響,發(fā)現(xiàn)20 mg/mL的PMOXA-r3/1-GMA做涂層時(shí)對(duì)四種堿性蛋白的分離效果最好,分離效率最高。將PMOXA-r3/1-GMA涂層毛細(xì)管用于嬰幼兒奶粉中乳鐵蛋白的定量檢測(cè),在最佳分離條件下,Lf的峰面積與濃度在10-500μg/mL的濃度范圍內(nèi)呈線性相關(guān),相關(guān)系數(shù)為0.9995。檢測(cè)限和定量限分別為5.0μg/mL和16.7μg/mL。用于檢測(cè)嬰幼兒奶粉中Lf時(shí),回收率為97.1±5.5%-9
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