PEI接枝聚甲基丙烯酸甲酯磁性微球的蛋白吸附性能研究.pdf

1、磁性高分子微球具有粒徑小，比表面大，易分離等優(yōu)點(diǎn)，在酶的固定化方面有著重要的理論和實(shí)踐意義。本文制備了聚甲基丙烯酸甲酯磁性微球（PMMA）并在其表面接枝修飾聚乙烯亞胺（PEI），研究了磁性微球的蛋白質(zhì)吸附性能及其作為載體對(duì)脂肪酶的固定化效果。主要內(nèi)容包括以下幾個(gè)部分：
　　第一，以甲基丙烯酸甲酯（MMA）為單體，采用懸浮聚合法制備了PMMA磁性微球，利用掃描電鏡對(duì)其進(jìn)行表征，發(fā)現(xiàn)其具有較好的單分散性和球形度，粒徑分布在10-25μ

2、m之間。進(jìn)而對(duì)微球進(jìn)行酯解，紅外光譜數(shù)據(jù)表明酯解后的微球表面攜帶大量羧基，化學(xué)滴定顯示羧基含量為0.94 mmol/g。
　　第二，利用微球表面的羧基為功能基團(tuán)，將不同分子量的聚乙烯亞胺（PEI600， PEI1800，PEI70000）接枝到微球上，并分別使其作為載體吸附模型蛋白BSA，考察了不同分子量 PEI接枝微球?qū)Φ鞍踪|(zhì)吸附的影響，并與未接枝PEI的微球吸附性能進(jìn)行了比較。結(jié)果顯示，微球在接枝PEI后能夠顯著提高BSA的吸

3、附量，且接枝PEI1800的微球吸附量最高，PMMA酯解、PMMA-PEI600、PMMA-PEI1800、PMMA-PEI70000等四種微球的吸附量分別為44 mg/g、54.1 mg/g、62.1 mg/g、47.4 mg/g。實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步研究了初始BSA濃度、pH值、離子強(qiáng)度、溫度等因素對(duì)BSA吸附的影響。結(jié)果表明，增加離子強(qiáng)度會(huì)引起B(yǎng)SA吸附量下降，在pH=7.0，35℃下，磁性微球PMMA-PEI1800對(duì)BSA吸附量達(dá)到最大

4、67 mg/g。此外，吸附-解吸附實(shí)驗(yàn)表明，PMMA-PEI1800具有良好的重復(fù)使用性。
　　第三，以 PMMA-PEI1800磁性微球?yàn)檩d體固定化脂肪酶 Candida rugosa lipase（CRL），實(shí)驗(yàn)優(yōu)化了固定化酶的條件，考察了固定化脂肪酶的最適溫度、最適PH及其熱穩(wěn)定性和pH穩(wěn)定性。與游離酶相比，固定化酶的最適溫度、熱穩(wěn)定性、pH穩(wěn)定性均得到了提高，且固定化酶的溫度和PH適應(yīng)范圍比游離酶寬。結(jié)果顯示，pH=7，溫