菲并咪唑衍生物、釕(Ⅱ)配合物的抗腫瘤作用機制.pdf

1、原發(fā)性肝癌（簡稱“肝癌”）是最常見的惡性腫瘤之一，有著極高的致死率，是威脅人類健康最主要的疾病之一?；熓前┌Y治療的重要手段，然而肝癌對化療藥物的敏感性低，毒副作用大，易產(chǎn)生耐藥性等問題，導致肝癌化療的發(fā)展裹足難行。因此，研發(fā)出新的高效、低毒抗肝癌化療藥物仍是研究者們奮斗的目標。本論文應用微波輔助合成技術(shù)，設(shè)計合成了6種新型的菲并咪唑衍生物，并在此基礎(chǔ)上以菲并咪唑衍生物為配體，設(shè)計合成兩種釕（Ⅱ）配合物，對其抗腫瘤活性進行了初步篩查，并

2、進一步研究其抗腫瘤作用機制，具體工作如下：
　　（1）以1,10-鄰菲咯啉為原材料，微波輔助技術(shù)合成了6個菲并咪唑衍生物，并通過電噴霧質(zhì)譜ESI-MS，核磁共振氫譜1H NMR和核磁共振碳譜13C NMR技術(shù)對其進行了結(jié)構(gòu)表征。
　?。?）首先用MTT法評價已合成的一系列菲并咪唑衍生物對不同腫瘤細胞株的抗腫瘤活性，并從中篩選出活性最高的化合物6。通過流式細胞術(shù)檢測到化合物6可誘導腫瘤細胞調(diào)亡。進一步在倒置相差顯微鏡的高倍鏡下

3、觀察到化合物6干預后HepG2細胞內(nèi)出現(xiàn)大量大小不一的空泡樣改變。透射電鏡進一步證實了空泡樣物質(zhì)即為細胞自噬樣改變。并通過Western Blot技術(shù)在分子水平上檢測到自噬標志性蛋白LC3-II和Beclin1表達量的上調(diào)。
　?。?）化合物6的抗腫瘤作用機制的進一步研究。DNA ladder實驗驗證了DNA損傷，流式細胞術(shù)顯示DNA損傷后的細胞周期阻滯在G2/M期，Western Blot檢驗DNA損傷標志性蛋白γ-H2AX表達