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文檔簡介
1、熒光金納米團(tuán)簇(Au NCs)因其亞納米級尺寸表現(xiàn)出獨(dú)特的光電化學(xué)性質(zhì),如光穩(wěn)定性好、雙光子吸收截面積大和良好的生物相容性等優(yōu)點(diǎn),在離子檢測、生物分子檢測、細(xì)胞成像、活體診斷和抗腫瘤方面都有研究報(bào)道,然而Au NCs對病毒的影響鮮有報(bào)道。本論文探究不同修飾劑的Au NCs對豬偽狂犬病毒(PRV)及豬繁殖與呼吸系統(tǒng)綜合征病毒(PRRSV)的影響,并將其進(jìn)行細(xì)胞成像研究。
1.以谷胱甘肽(GSH)為修飾劑合成水溶性的熒光GSH-A
2、u NCs,采用熒光光譜(FL)、紫外光譜(UV)、水合粒徑(DLS)、透射電子顯微鏡(TEM)、傅里葉變換紅外光譜(FT-IR)和X-射線光電子能譜(XPS)對GSH-Au NCs進(jìn)行表征,用MTT法評估了GSH-Au NCs在非洲綠猴腎傳代細(xì)胞(MARC-145)和豬腎傳代細(xì)胞系(PK-15)的細(xì)胞毒性,結(jié)果表明:GSH-Au NCs具有良好的光穩(wěn)定性,當(dāng)其濃度小于450μmol/L時(shí),PK-15和MARC-145細(xì)胞的存活率大于8
3、0%。將GSH-Au NCs應(yīng)用于PRV入侵PK-15細(xì)胞和PRRSV入侵MARC-145細(xì)胞的影響研究,通過空斑試驗(yàn)、間接免疫熒光試驗(yàn)和Weston blot試驗(yàn),結(jié)果表明:GSH-Au NCs具有選擇性抗PRRSV的作用,而對PRV無明顯影響。最后以GSH-Au NCs為熒光探針通過激光共聚焦掃描顯微鏡觀察PRV入侵PK-15細(xì)胞的過程,觀察到PRV侵入PK-15細(xì)胞12h后在細(xì)胞核發(fā)現(xiàn)明顯的綠色熒光,說明PRV在復(fù)制后期會(huì)明顯的破
4、壞PK-15細(xì)胞的細(xì)胞核。這將為Au NCs應(yīng)用于抗病毒領(lǐng)域提供一定的借鑒意義。
2.以牛血清白蛋白(BSA)為修飾劑合成水溶性的熒光BSA-Au NCs和Au-AgNCs,并對合成的Au NCs進(jìn)行FL、UV、DLS和FT-IR的表征,用MTT法評估了BSA-Au NCs和Au-Ag NCs在PK-15細(xì)胞的細(xì)胞毒性,結(jié)果表明:BSA-Au NCs和Au-Ag NCs具有良好的光穩(wěn)定性,當(dāng)兩種Au NCs的濃度小于600μm
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