能量來源對(duì)胎兒宮內(nèi)發(fā)育及胎盤igf2和h19表達(dá)的影響

1、1能量來源對(duì)胎兒宮內(nèi)發(fā)育及胎盤 Igf2 和 H19 表達(dá)的影響生命科學(xué)與理學(xué)院 生物科學(xué)專業(yè) 韓興發(fā)（指導(dǎo)教師：林燕 職稱：講師）摘要：目的：基于成年疾病的發(fā)生與早期胎兒宮內(nèi)營(yíng)養(yǎng)密切相關(guān)，本試驗(yàn)以目前人類膳食中的主要日糧成分：脂肪、淀粉、纖維作為研究的日糧，探討不同能量來源對(duì)胎盤Igf2、H19基因的表達(dá)及胎兒宮內(nèi)生長(zhǎng)的影響。方法：選80只SD母鼠分配到如下四個(gè)處理組：高脂肪組、低脂肪組、高脂肪+纖維組、低脂肪+纖維組。在妊娠1

2、7.5天屠宰母鼠并稱取胎盤和胚胎的重量，采用熒光實(shí)時(shí)定量PCR技術(shù)分析胎盤中印記基因H19和Igf2 mRNA表達(dá)水平的差異。結(jié)果:低脂+纖維組和高脂+纖維組的Igf2 mRNA 的表達(dá)量顯著高于高脂和低脂組（P<0.05）;高脂+纖維組和低脂組的H19 mRNA表達(dá)量顯著高于其他兩組（P<0.05）；高脂肪+纖維組和低脂肪+纖維組的胎兒重量高于高脂肪組和低脂肪組（P<0.05）。低脂+纖維組胎盤重量顯著高于低脂肪組（

3、P<0.05）。結(jié)論：在淀粉和脂肪組日糧中添加膳食纖維可調(diào)控響胎盤印跡基因Igf2和H19的表達(dá)，促進(jìn)胎盤發(fā)育和改善胎盤功能，從而促進(jìn)胎兒的宮內(nèi)生長(zhǎng)發(fā)育。關(guān)鍵詞： H19；Igf2；胎盤；胚胎Effects of dietary energy sources on the fetal growth in uterine and the expression of placenta imprinted gene Igf2 and H

4、19 HAN Xingfa Biological Science ,Grade 2006Directed by Lin yan (lecturer)Abstract：The incidence of the adult disease is closely associated with the nutritional environment provided for the early embryo

5、nic/fetal development, therefore, the objective of the present study is to examine different dietary energy source on the mRNA expression of the imprinted gene Igf2 and H19 and the fetal growth in uterine. 80 SD femal ra

6、t were allocated into four dietary treatment, high fat (HF), low fat (LF), high fat 31 材料與方法1.1 試驗(yàn)動(dòng)物及采樣實(shí)驗(yàn)選取 80 只 28 日齡的 SD 大鼠，按照 2×2 因子實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)（試驗(yàn)的差異來自兩個(gè)方面，高脂肪（25%）和低脂肪（5%） ，高纖維（51%）和低纖維（0%） ） ，將大鼠分配到 4 個(gè)處理組，每個(gè)處理 20 只。各

7、處理組不同日糧來源供給能量形式不同，淀粉、脂肪、纖維供給能量的比例也不相同。高脂肪組主要由玉米淀粉和高脂肪功能，高淀粉組主要由淀粉和蔗糖功能，形成了四個(gè)人和家畜動(dòng)物等較常見的日糧供給形式。單籠飼養(yǎng)，自由飲水。日糧配制按照 AIN-93 孕鼠營(yíng)養(yǎng)需要進(jìn)行，由于印跡基因的甲基化在生殖細(xì)胞發(fā)生階段就開始，因此本實(shí)驗(yàn)于配種前 4 周飼喂試驗(yàn)日糧（表 1） 。由于各組能量濃度不一致，通過調(diào)整采食量以及其他各養(yǎng)分與能量的比值一致，使各處理大鼠能量

8、、蛋白、礦物質(zhì)、維生素?cái)z入量一致。當(dāng)雌鼠達(dá)到預(yù)期的配種年齡和體重時(shí)，將雄鼠和雌鼠于當(dāng)天下午 5 點(diǎn)，按照 1:2 的比例合攏交配，第二天早上 8 點(diǎn)和下午 8 點(diǎn)檢查陰道栓（vaginal plug），當(dāng)陰道栓出現(xiàn)的當(dāng)天即記為妊娠 0.5 天。于妊娠 17.5 天屠宰取樣。頸部脫臼處死母鼠，用滅菌的解剖剪沿腹部中線剪開，取出子宮-胎盤-胎兒復(fù)合物，用濾紙吸取多余的血跡后分別稱取胎盤、胎兒的重量。然后將胚胎和胎盤在液氮中速凍后帶回實(shí)驗(yàn)室放

9、置于-80℃保存待測(cè)。表 1 日糧配方（ 日糧配方（g/kg）Tabel 1 Ration Formulation名稱（%） 高脂肪 高脂肪+纖維組 高淀粉 高淀粉+纖維組玉米淀粉 40.20 0.15 57.74 15.80膳食纖維包 0 51 0 51蔗糖 2.00 0 10.00 10.00 菜籽油 10.00 10.00 0 0豬油 10.00 10.00 0 0大豆油 5.00 5.00 5.00 5.00

10、酪蛋白 26.70 18.00 22.20 13.50維生素復(fù)合物 1.33 1.25 1.10 0.10 氯化膽堿 0.13 0.12 0.11 0.11礦物元素復(fù)合物 4.66 4.38 3.85 3.50T 0.00014 0.00014 0.00014 0.00014合計(jì) 100.00 100.00 100.00 100.00能量（DE MK/KG） 4.93 4.53 4.04 3.62蛋白質(zhì)水平(%) 22.