農(nóng)藥高分辨質(zhì)譜數(shù)據(jù)庫的建立及應(yīng)用研究.pdf

1、通過對(duì)大量采集數(shù)據(jù)進(jìn)行有效分析，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)有害化學(xué)物質(zhì)的篩查與識(shí)別，一直是食品安全與檢測領(lǐng)域所面臨的挑戰(zhàn)。本論文利用高效液相色譜-高分辨四級(jí)桿飛行時(shí)間質(zhì)譜（HPLC-QTOF-MS）建立了多種農(nóng)藥的精確質(zhì)量數(shù)數(shù)據(jù)庫和全掃描碰撞能量誘導(dǎo)裂解（CID）碎片離子高分辨參考質(zhì)譜圖數(shù)據(jù)庫，并以此為基礎(chǔ)建立了果蔬樣品中農(nóng)藥化合物快速識(shí)別和多信息點(diǎn)予以確證的多殘留快速篩查技術(shù)。
　　通過選用兩種高分辨飛行時(shí)間質(zhì)譜及數(shù)據(jù)庫管理軟件，利用農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品

2、參考物分別建立了包括427種農(nóng)藥化學(xué)品的ESI+模式MS1精確質(zhì)量數(shù)數(shù)據(jù)庫和全掃描CID-MS2碎片離子高分辨譜圖庫，同時(shí)對(duì)影響數(shù)據(jù)庫應(yīng)用的精確質(zhì)量數(shù)準(zhǔn)確度、色譜保留時(shí)間和碰撞能量等因素進(jìn)行了分析，為非靶向農(nóng)藥殘留物篩查奠定了方法基礎(chǔ)，并利用不同質(zhì)譜工作模式，建立了兩種不以農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品為參考，而基于精確質(zhì)量數(shù)數(shù)據(jù)庫和全掃描碎片離子參考譜圖庫的果蔬樣品中多農(nóng)殘快速篩查方法。
　　方法一利用HPLC-QTOF-MS建立了基于MS1識(shí)別和

3、MS2確證相結(jié)合的快速篩查方法。該方法中，每個(gè)樣品需進(jìn)行兩次數(shù)據(jù)采集：首先利用HPLC-QTOF-MS的全質(zhì)量數(shù)掃描模式，對(duì)樣品中可能存在的農(nóng)藥殘留進(jìn)行一級(jí)精確質(zhì)荷比掃描，并將采集數(shù)據(jù)與建立的MS1精確質(zhì)量數(shù)數(shù)據(jù)庫進(jìn)行比較，找出疑似陽性結(jié)果；然后利用HPLC-QTOF-MS的目標(biāo)二級(jí)掃描模式對(duì)疑似陽性結(jié)果進(jìn)行CID碎片離子高分辨質(zhì)譜掃描，與已建立的碎片離子高分辨參考譜圖庫進(jìn)行比對(duì)，實(shí)現(xiàn)對(duì)結(jié)果的準(zhǔn)確確證。本方法結(jié)合傳統(tǒng)的SPE樣品制備技術(shù)

4、，以黃瓜和橙子兩種實(shí)際樣品為代表，通過優(yōu)化檢索參數(shù)，對(duì)其中317種農(nóng)藥進(jìn)行了篩查方法驗(yàn)證，結(jié)果表明，其中266種農(nóng)藥（占83.9％）的篩查限SDLs≤10μg/kg，且在50μg/kg的添加水平下，假陰性率僅為4.7%，同時(shí)各農(nóng)藥的確證識(shí)別限（LOIs）≤10μg/kg的占77.6%，LOI s≤50μg/kg的占83.9%，滿足日常農(nóng)藥殘留檢測的要求。
　　方法二利用 UHPLC-TripleTOFTM-MS基于人工智能碎片離子

5、掃描方式，建立了僅需一次進(jìn)樣即可實(shí)現(xiàn)多種農(nóng)藥殘留化合物的精確質(zhì)荷比識(shí)別和高分辨碎片離子確證的快速篩查方法。方法采用信息關(guān)聯(lián)采集（information dependent acquisition，IDA）模式，通過一次進(jìn)樣分析，實(shí)現(xiàn)全質(zhì)荷比范圍（100-1000）內(nèi)一級(jí)高分辨質(zhì)譜采集和全掃描高分辨碎片離子質(zhì)譜數(shù)據(jù)采集，通過與創(chuàng)建的包括1700多張高分辨CID質(zhì)譜圖的數(shù)據(jù)庫比對(duì)，實(shí)現(xiàn)可不依賴農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品參考物的快速篩查，并探討了全掃描一級(jí)精

6、確質(zhì)荷比數(shù)據(jù)在目標(biāo)化合物定量中的適用性。定性篩查方法驗(yàn)證結(jié)果表明，所有測試樣品，對(duì)于數(shù)據(jù)庫包括的427種農(nóng)藥，有93.2%（97.4%）的農(nóng)藥SDLs≤10μg/kg（50μg/kg），且其中84.8%的碎片離子可以通過與創(chuàng)建的參考譜圖數(shù)據(jù)庫進(jìn)行比對(duì)而得以確證。定量方法驗(yàn)證結(jié)果表明，對(duì)于經(jīng)常檢出的106種農(nóng)藥，大部分農(nóng)藥線性范圍為5-500μg/kg，在蘋果，柑橘，番茄和菠菜四種基質(zhì)中，10和100μg/kg兩種添加水平下，回收率在80

7、%-110%范圍內(nèi)的農(nóng)藥分別占88.7%和86.8%，全部添加樣品回收率的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD，n=12）小于20%的農(nóng)藥分別占94.3%（10μg/kg）和98.1%（100μg/kg），表明定量性能良好。
　　經(jīng)實(shí)際樣品驗(yàn)證后，本論文利用已建立的兩種篩查方法，對(duì)市售2583個(gè)水果蔬菜樣品進(jìn)行了高通量多農(nóng)藥殘留的篩查，在其中1869個(gè)樣品中檢出農(nóng)藥殘留結(jié)果5607個(gè)，并對(duì)篩查結(jié)果進(jìn)行了分析。結(jié)果表明，本論文提出的篩查方法成本低廉