普通小麥triticumaestivuml.抗白粉病相關(guān)基因的克隆與分析

1、河北農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文普通小麥（Triticum aestivum L.）抗白粉病相關(guān)基因的克隆與分析姓名：孟成生申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：作物遺傳育種指導(dǎo)教師：馬峙英;賈繼增20050616C l o n i n g a n d A n a l y z i n g t h e D i s e a s eR e s i s t a n c e G e n e o f P o w d e r y M i l d e w i nW h e

2、a t( T r i t i c u m a e s t i v u m L ．、A u t h o r ： M e n g C h e n g - s h e n gM a j o r ： C r o p G e n e t i c s a n dB r e e d i n gs u p e r v i s o r ：P r o f e s s o r M a Z h i —y i n gP r o f e s s o r J i a

3、 J i —z e n gP r o f e s s o r L iA j —l iA b s t r a c tP o w d e r ym i l d e wc a u s e db yB l u m e r i ag r a m i n i sf ．s p ．t r i t i c i i S o n eo ft h em o s ts e r i o u s d i s e a s e s t h e w h e a t p r

4、 o d u c t i o n a l l o v e r t h e w o r l d ．B r e e d i n g r e s i s t a n tc u l t i v a r s h a s b e e np r o v e dt h e m o s te f f e c t i v ew a yt O c o n t r o l t h i s d i s e a s e ．N e a ri o s o g e n

5、i c l i n e f N I L ) M a r d l a r ／7 x B a i n o n 9 3 2 17 ( P m 2 ) w a sd e v e l o p e d b y K e yL a b o r a t o r y o f C r o p G e r m p l a s m a n d B i o t e c h n o l o g y ，M i n i s t r y o f A g r i c u l

6、 t u r e ，I n s t i t u t e o f C r o pG e r m p l a s mR e s o u r c e s ．P m 2 i s e f f e c t i v ea g a i n s t l5 b i o t y p eo fB l u m e r i ag r a m i n i s i n C h i n a ．C l o n i n g o fP m 2g e n e a n d t h

7、 er e l a t e d g e n e s f o rP o w d e r y m i l d e w r e s i s t a n c e i S s i g n i f i c a n c e f o r u n d e r s t a n d i n g d i s e a s e —r e s i s t a n c em e c h a n i s ma n dd i s e a s er e s i s t a

8、n c eb r e e d i n g ．I nt h i ss t u d y ’G e n ee x p r e s s i o na n a l y s i sb v c D N A ．A F L P i nw h e a t a f t e rp o w d e r y m i l d e w i n o c u l a t i o nr e v e a l e dt h er e s i s t a n c er e l a

9、 t e d g e n e ．T h ef o i l - l e n g t h c D N As e q u e n c eo fw h e a tw a so b t a i n e dv i a s i l i c o nc l o n i n g a n d R T - P C R t e c h n i q u e a n a l y s i s w h e t h e r r e s i s t a n c e d i

10、s e a s e ，a n d g e tr e s i s t a n c e r e l a t e dg e n e ．2 8 3T D F s w e r eo b t a i n e dw i t hc D N A ．A F L P t e c h n i q u ei nN e a ri o s o g e n i cl i n em I L ) M a r d l a r ／7 x B a i n o n 9 3 2 1

11、 7 ．T h e m a t e f i a l o f t h i s e x p r i m e n t s e l e c t N I Lr e s i s t a n c eM a r d l e r ／7 xB a i n o n g 3 2 1 7 ( P r 0 2 ) a n d B a i n o n g 3 2 1 7 ，a n d t h e n d e s i g n e d t h et r e a t m

12、e n t s ：M a r d l e r ／x 7 B a i n o n 9 3 2 l7 i n o c u l a t i o n ．M a r d l e r ／7 x B a i n o n g3 2 17 w a t e rt r e a t ( C K ) ，B a i n o n g 3 2 1 7 D C I N A t r e a t e d ，B a i n o n g3 2 1 7i n o c u l a

13、t i o n a n dB a i n o n g3 2 1 7 w a t e rt r e a t ( C K ) ，c D N A ，A F L Pd i f f e r e n t i a l d i s p l a y t h e c o l l e c t l e a v e sr e s p e c t i v e l ya f t e r 0 、1 、3 、6 、1 2 、2 4 h o u r s i n o c u

14、 l a t i o n ，U s i n g5 5 3p r i m e r c o m b i n a t i o n ss e l e c t4 6 p r i m e r a n d t h e ns e l e c to u t2 8 3 d i f f e r e n t i a ld i s p l a yf r a g m e n t s ．D e t e c t i o n t h er e s i s t a n c

15、 eo f t h e s i sw h e a t sw i t ht h el e f t l e a v e s ．T h er e s u l t o fr e s i s t a n c ed e t e c t i o ni n d i c a t et h a tM a r d l e r ／7 ×B a i n o n 9 3 2 1 7 i si m m u n i t y ．B a i n o n g 3

16、2 1 7 t r e a t e db y D C T N Ai sp a r t i a l yr e s i s t a n c e ，B a i n o n g3 2 1 7i ss u s p e c t i v e ．A g e n e w i t hO R F w a s g o t v i as i l i c o nc l o n i n ga n d R T - P C R t e c h n i q u e ．T

17、h e r e a r e8 0a m p l i f i e df r a g m e n t sb yS e c o n dP C R ，s e l e c t5 4a m p l i f i e df r a g m e n t ss e q u e n c e d ，t h e r e a r e 4 f r a g m e n t s r e l a t e d t o r e s i s t a n c e t h r o