頭花蓼對(duì)h.pylori相關(guān)性胃炎細(xì)胞增殖、凋亡的影響及其機(jī)制的探討

1、貴陽醫(yī)學(xué)院 2014 屆碩士研究生論文 《中國圖書資料分類法》分類號(hào)：R378 單位代碼：10660 學(xué) 號(hào)：S110138 貴陽醫(yī)學(xué)院 貴陽醫(yī)學(xué)院 2014 2014 屆碩士學(xué)位論文 屆碩士學(xué)位論文 頭花蓼對(duì) 頭花蓼對(duì) H.pylori H.pylori 相關(guān)性胃炎細(xì)胞增殖、 相關(guān)性胃炎細(xì)胞增殖、凋亡的影響及其機(jī)制的探討 凋亡的影響及其機(jī)制的探討 研 究 生： 謝小琴 導(dǎo) 師： 羅昭遜

2、 副教授 年 級(jí)： 2011 級(jí) 專 業(yè)： 臨床檢驗(yàn)診斷學(xué) 2014 年 1 月 15 日貴陽醫(yī)學(xué)院 2014 屆碩士研究生論文 1 頭花蓼對(duì) 頭花蓼對(duì) H.pylori 相關(guān)性胃炎細(xì)胞 相關(guān)性胃炎細(xì)胞增殖、凋亡的影響極其機(jī)制的探討 增殖、凋亡的影響極其機(jī)制的探討 專業(yè)名稱：臨床檢驗(yàn)診斷學(xué) 研 究 生：謝小琴 導(dǎo) 師：羅昭遜 副教授 摘 要 目的： 目的：復(fù)制幽門螺旋桿菌(Helicobact

3、er pylori，H. pylori)感染胃粘膜上皮細(xì)胞（Human gastric epithelial cells，GES-1）細(xì)胞模型，觀察頭花蓼對(duì)其周期、凋亡的影響，為頭花蓼進(jìn)一步開發(fā)利用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法： 方法：培養(yǎng)人胃粘膜上皮細(xì)胞（GES-1） ，采用 MTT 法觀察細(xì)胞的增殖情況并繪制生長曲線。 取對(duì)數(shù)期細(xì)胞與不同濃度頭花蓼 （8 μg/mL、 16 μg/mL、 32 μg/mL、64 μg/mL、128

4、 μg/mL、256 μg/mL、512μg/mL、1024μg/mL）共同培養(yǎng) 48h，計(jì)算細(xì)胞生長抑制率。將細(xì)胞細(xì)菌不同比例（1：20；1:50；1:100；1:200）共培養(yǎng)數(shù)小時(shí)， 以確定構(gòu)建 H.pylori 相關(guān)性胃炎細(xì)胞(Helicobacter pylori-associated gastritis cell,HAG)模型的合適比例及時(shí)間。對(duì)上清液進(jìn)行 H.pylori 快速尿素酶、微需氧培養(yǎng)及 IL-8 的檢測，鑒定

5、感染細(xì)胞模型是否構(gòu)建成功。模型構(gòu)建成功后， 將實(shí)驗(yàn)分為 3 組： 空白對(duì)照組： 不加 H.pylori 不加頭花蓼的 GES-1 細(xì)胞組；模型對(duì)照組： 加 H.pylori 的 GES-1 細(xì)胞組； 藥物組： 加 H.pylori 加頭花蓼的 GES-1細(xì)胞組，分別于加藥后 24h、48h、72h 收集各組細(xì)胞制成細(xì)胞懸液。采用流式細(xì)胞儀觀察細(xì)胞周期分布、 凋亡情況； 采用 RT-PCR 法檢測 p38MAPK、 JAK2、 STAT3

6、、NF-κBp65、Bax、Bcl-2 表達(dá)水平，以觀察頭花蓼對(duì)人胃粘膜上皮細(xì)胞凋亡相關(guān)基因表達(dá)的影響。 結(jié)果： 結(jié)果： 1.GES-1 細(xì)胞生長曲線顯示： 細(xì)胞于培養(yǎng)的 48h 進(jìn)入對(duì)數(shù)生長期， 120h進(jìn)入平臺(tái)期。2.頭花蓼濃度高于 64µ g/mL 時(shí)，細(xì)胞數(shù)量明顯減少，細(xì)胞增殖受到抑制； 低于 64µ g/mL 時(shí)， 細(xì)胞數(shù)量沒有明顯變化， 細(xì)胞增殖無影響。 3. H.pylori SS2000 與 GES-