頭花蓼對h.pylori相關性胃炎細胞增殖、凋亡的影響及其機制的探討

1、貴陽醫(yī)學院 2014 屆碩士研究生論文 《中國圖書資料分類法》分類號：R378 單位代碼：10660 學 號：S110138 貴陽醫(yī)學院 貴陽醫(yī)學院 2014 2014 屆碩士學位論文 屆碩士學位論文 頭花蓼對 頭花蓼對 H.pylori H.pylori 相關性胃炎細胞增殖、 相關性胃炎細胞增殖、凋亡的影響及其機制的探討 凋亡的影響及其機制的探討 研 究 生： 謝小琴 導 師： 羅昭遜

2、 副教授 年 級： 2011 級 專 業(yè)： 臨床檢驗診斷學 2014 年 1 月 15 日貴陽醫(yī)學院 2014 屆碩士研究生論文 1 頭花蓼對 頭花蓼對 H.pylori 相關性胃炎細胞 相關性胃炎細胞增殖、凋亡的影響極其機制的探討 增殖、凋亡的影響極其機制的探討 專業(yè)名稱：臨床檢驗診斷學 研 究 生：謝小琴 導 師：羅昭遜 副教授 摘 要 目的： 目的：復制幽門螺旋桿菌(Helicobact

3、er pylori，H. pylori)感染胃粘膜上皮細胞（Human gastric epithelial cells，GES-1）細胞模型，觀察頭花蓼對其周期、凋亡的影響，為頭花蓼進一步開發(fā)利用提供實驗依據(jù)。 方法： 方法：培養(yǎng)人胃粘膜上皮細胞（GES-1） ，采用 MTT 法觀察細胞的增殖情況并繪制生長曲線。 取對數(shù)期細胞與不同濃度頭花蓼 （8 μg/mL、 16 μg/mL、 32 μg/mL、64 μg/mL、128

4、 μg/mL、256 μg/mL、512μg/mL、1024μg/mL）共同培養(yǎng) 48h，計算細胞生長抑制率。將細胞細菌不同比例（1：20；1:50；1:100；1:200）共培養(yǎng)數(shù)小時， 以確定構建 H.pylori 相關性胃炎細胞(Helicobacter pylori-associated gastritis cell,HAG)模型的合適比例及時間。對上清液進行 H.pylori 快速尿素酶、微需氧培養(yǎng)及 IL-8 的檢測，鑒定

5、感染細胞模型是否構建成功。模型構建成功后， 將實驗分為 3 組： 空白對照組： 不加 H.pylori 不加頭花蓼的 GES-1 細胞組；模型對照組： 加 H.pylori 的 GES-1 細胞組； 藥物組： 加 H.pylori 加頭花蓼的 GES-1細胞組，分別于加藥后 24h、48h、72h 收集各組細胞制成細胞懸液。采用流式細胞儀觀察細胞周期分布、 凋亡情況； 采用 RT-PCR 法檢測 p38MAPK、 JAK2、 STAT3

6、、NF-κBp65、Bax、Bcl-2 表達水平，以觀察頭花蓼對人胃粘膜上皮細胞凋亡相關基因表達的影響。 結果： 結果： 1.GES-1 細胞生長曲線顯示： 細胞于培養(yǎng)的 48h 進入對數(shù)生長期， 120h進入平臺期。2.頭花蓼濃度高于 64µ g/mL 時，細胞數(shù)量明顯減少，細胞增殖受到抑制； 低于 64µ g/mL 時， 細胞數(shù)量沒有明顯變化， 細胞增殖無影響。 3. H.pylori SS2000 與 GES-