4.1蛋白在胃癌組織中的表達(dá)和缺失細(xì)胞系的篩選

1、鄭州大學(xué)碩士學(xué)位論文4.1蛋白在胃癌組織中的表達(dá)和缺失細(xì)胞系的篩選姓名：許晶晶申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：病理學(xué)與病理生理學(xué)指導(dǎo)教師：祁元明;王柏生20070501鄭州人學(xué)2 0 0 7 屆彤iJ ：學(xué)位論文 中文摘要免疫組織化學(xué)技術(shù)是一種在組織或細(xì)胞原位研究基因產(chǎn)物的常用技術(shù)，在形態(tài)學(xué)領(lǐng)域已得到了廣泛應(yīng)用，隨著免疫組化技術(shù)的發(fā)展，涌現(xiàn)出一批新的免疫組化方法如S P ，A B C ，S A B C 和E n v i s i o n + 法等

2、，有研究發(fā)現(xiàn)，E n v i s i o n * 法較其他幾種的敏感性高，而且可以減少組織染色中的過顯及非特異性染色。E n v i s i o n +法是在多聚物上連接二抗和酶，在人體組織中不含有這種多聚物，從而避免了人體組織中生物素的干擾，得到較為理想的染色效果，所以，本實(shí)驗(yàn)采用了E n v i s i o n +法來檢測(cè)4 ．1 蛋白家族成員在胃癌組織中的表達(dá)情況。實(shí)驗(yàn)?zāi)康? ．應(yīng)用E n v i s i o n + 免疫組織化學(xué)

3、的方法檢測(cè)1 0 4 例胃癌及6 8 例癌旁正常組織中4 ．1 蛋白家族成員( 4 ．1 B 、4 ．1 R 、4 ．1 G 和4 ．1 N ) 的表達(dá)情況，分析其表達(dá)情況與臨床病理之間的相關(guān)關(guān)系并探討4 ．1 蛋白家族成員的表達(dá)與胃癌發(fā)生、發(fā)展的關(guān)系，以期為胃癌診斷、治療和判斷預(yù)后提供依據(jù)。2 ．篩選4 ．1 蛋白表達(dá)缺失的細(xì)胞系，為研究4 ．1 蛋白的抑癌功能提供材料。實(shí)驗(yàn)方法1 胃癌組織的免疫組織化學(xué)1 ．1 實(shí)驗(yàn)標(biāo)本的獲取、分類

4、、切片收集2 0 0 5 年1 月- 2 0 0 6 年6 月間鄭州大學(xué)第二附屬醫(yī)院病理科胃癌手術(shù)標(biāo)本蠟塊共1 0 4 例，其中男7 7 例、女2 7 例，中位年齡6 1 ．7 ( 3 5 _ 8 8 ) 歲。每例均有詳細(xì)的臨床資料和手術(shù)記錄。所有病例術(shù)前均未進(jìn)行任何放療、化療和免疫治療。伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者共5 l 例。參照1 9 8 1 年W H O 推薦的分化分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)：高分化腺癌3 0 例，中分化腺癌2 8 例，低分化腺癌4 6 例。

5、同時(shí)取1 0 4 例病例中的6 8 例符合對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)的癌遠(yuǎn)切端胃粘膜組織作為對(duì)照組。標(biāo)本均經(jīng)4 ％緩沖甲醛溶液固定，梯度酒精脫水、透明、浸蠟、石蠟包埋。實(shí)驗(yàn)前將蠟塊切片至3 - 4 u I I l ／片。1 ．2 常規(guī)H E ( 蘇木素一伊紅) 染色采用常規(guī)H E 染色( 蘇木素一伊紅染色) 方法，在擁有原醫(yī)院病理資料的前提下，進(jìn)一步明確實(shí)驗(yàn)標(biāo)本的病理學(xué)特征。1 ．3 實(shí)驗(yàn)標(biāo)本的E n v i s i o n + 免疫組織化學(xué)染色同時(shí)檢測(cè)