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1、蛋白質(zhì)化學(xué)四、問(wèn)答題1什么是蛋白質(zhì)的一級(jí)結(jié)構(gòu)?為什么說(shuō)蛋白質(zhì)的一級(jí)結(jié)構(gòu)決定其空間結(jié)構(gòu)?2什么是蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)?蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)與其生物功能有何關(guān)系?3舉例說(shuō)明蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)與其功能之間的關(guān)系。4蛋白質(zhì)的α—螺旋結(jié)構(gòu)有何特點(diǎn)?5蛋白質(zhì)的β—折疊結(jié)構(gòu)有何特點(diǎn)?6簡(jiǎn)述蛋白質(zhì)變性作用的機(jī)制。7什么是蛋白質(zhì)的變性作用?蛋白質(zhì)變性后哪些性質(zhì)會(huì)發(fā)生改變?8蛋白質(zhì)有哪些重要功能。9下列試劑和酶常用于蛋白質(zhì)化學(xué)的研究中:CNBr、異硫氰酸苯酯、丹黃酰氯、
2、脲、6molLHCl、β巰基乙醇、水合茚三酮、過(guò)甲酸、胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶。其中哪一個(gè)最適合完成以下各項(xiàng)任務(wù)?(1)測(cè)定小肽的氨基酸序列。(2)鑒定肽的氨基末端殘基。(3)不含二硫鍵的蛋白質(zhì)的可逆變性;如有二硫鍵存在時(shí)還需加什么試劑?(4)在芳香族氨基酸殘基羧基側(cè)水解肽鍵。(4)在蛋氨酸殘基羧基側(cè)水解肽鍵。(5)在賴(lài)氨酸和精氨酸殘基羧基側(cè)水解肽鍵。10分別指出下列酶能否水解與其對(duì)應(yīng)排列的肽,如能,則指出其水解部位。肽酶(1)PheAr
3、gPro胰蛋白酶(2)PheMetLeu羧肽酶B(3)AlaGlyPhe胰凝乳蛋白酶(4)ProArgMet胰蛋白酶11用下列哪種試劑最適合完成以下工作:溴化氰、尿素、β巰基乙醇、胰蛋白酶、過(guò)酸、丹磺酰氯(DNSCl)、6molL鹽酸、茚三酮、苯異硫氰酸(異硫氰酸苯酯)、胰凝乳蛋白酶。(1)測(cè)定一段小肽的氨基酸排列順序(2)鑒定小于107克肽的N端氨基酸(3)使沒(méi)有二硫鍵的蛋白質(zhì)可逆變性。如有二硫鍵,應(yīng)加何種試劑?(4)水解由芳香族氨基
4、酸羧基形成的肽鍵(5)水解由甲硫氨酸羧基形成的肽鍵(6)水解由堿性氨基酸羧基形成的肽鍵12扼要解釋為什么大多數(shù)球狀蛋白質(zhì)在溶液中具有下列性質(zhì)。(1)在低pH時(shí)沉淀。(2)當(dāng)離子強(qiáng)度從零逐漸增加時(shí),其溶解度開(kāi)始增加,然后下降,最后出現(xiàn)沉淀。(3)在一定的離子強(qiáng)度下,達(dá)到等電點(diǎn)pH值時(shí),表現(xiàn)出最小的溶解度。用該緩沖液洗脫此柱,問(wèn)這四種氨基酸將按何種順序洗脫?22何謂蛋白質(zhì)的變性?哪些因素會(huì)導(dǎo)致蛋白質(zhì)的變性?蛋白質(zhì)變性的機(jī)理是什么?變性蛋白質(zhì)
5、有何特征?舉例說(shuō)明蛋白質(zhì)變性的應(yīng)用。23從Anfinsen的核糖核酸酶進(jìn)行的變性與復(fù)性實(shí)驗(yàn)可得到哪些結(jié)論?參考答案四、問(wèn)答題參考答案1答:蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)指蛋白質(zhì)多肽鏈中氨基酸殘基的排列順序。因?yàn)榈鞍踪|(zhì)分子肽鏈的排列順序包含了自動(dòng)形成復(fù)雜的三維結(jié)構(gòu)(即正確的空間構(gòu)象)所需要的全部信息,所以一級(jí)結(jié)構(gòu)決定其高級(jí)結(jié)構(gòu)。2答:蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)是指蛋白質(zhì)分子中原子和基團(tuán)在三維空間上的排列、分布及肽鏈走向。蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)決定蛋白質(zhì)的功能??臻g結(jié)構(gòu)與
6、蛋白質(zhì)各自的功能是相適應(yīng)的。3答:蛋白質(zhì)的生物學(xué)功能從根本上來(lái)說(shuō)取決于它的一級(jí)結(jié)構(gòu)。蛋白質(zhì)的生物學(xué)功能是蛋白質(zhì)分子的天然構(gòu)象所具有的屬性或所表現(xiàn)的性質(zhì)。一級(jí)結(jié)構(gòu)相同的蛋白質(zhì),其功能也相同,二者之間有統(tǒng)一性和相適應(yīng)性。4答:(1)多肽鏈主鏈繞中心軸旋轉(zhuǎn),形成棒狀螺旋結(jié)構(gòu),每個(gè)螺旋含有3.6個(gè)氨基酸殘基,螺距為0.54nm,氨基酸之間的軸心距為0.15nm。(2)α螺旋結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定主要靠鏈內(nèi)氫鍵,每個(gè)氨基酸的N—H與前面第四個(gè)氨基酸的C=O形
7、成氫鍵。(3)天然蛋白質(zhì)的α螺旋結(jié)構(gòu)大都為右手螺旋。5答:β折疊結(jié)構(gòu)又稱(chēng)為β片層結(jié)構(gòu),它是肽鏈主鏈或某一肽段的一種相當(dāng)伸展的結(jié)構(gòu),多肽鏈呈扇面狀折疊。(1)兩條或多條幾乎完全伸展的多肽鏈(或肽段)側(cè)向聚集在一起,通過(guò)相鄰肽鏈主鏈上的氨基和羰基之間形成的氫鍵連接成片層結(jié)構(gòu)并維持結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定。(2)β折疊結(jié)構(gòu)有平行排列和反平行排列兩種。(3)氨基酸之間的軸心距為0.35nm(反平行式)和0.325nm(平行式)。6答:維持蛋白質(zhì)空間構(gòu)象穩(wěn)定的
8、作用力是次級(jí)鍵,此外,二硫鍵也起一定的作用。當(dāng)某些因素破壞了這些作用力時(shí),蛋白質(zhì)的空間構(gòu)象即遭到破壞,引起變性,但共價(jià)鍵不破壞,即二硫健與肽鍵保持完好。7答:蛋白質(zhì)變性作用是指在某些因素的影響下,蛋白質(zhì)分子的空間構(gòu)象被破壞,并導(dǎo)致其性質(zhì)和生物活性改變的現(xiàn)象。蛋白質(zhì)變性后會(huì)發(fā)生以下幾方面的變化:(1)生物活性喪失;(2)理化性質(zhì)的改變,包括:溶解度降低,因?yàn)槭杷畟?cè)鏈基團(tuán)暴露;結(jié)晶能力喪失;分子形狀改變,由球狀分子變成松散結(jié)構(gòu),分子不對(duì)稱(chēng)性
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