細(xì)胞色素p4502c19基因多態(tài)性檢測(cè)與氯吡格雷臨床應(yīng)用的問題和策略

1、細(xì)胞色素細(xì)胞色素P4502C19基因多態(tài)性檢測(cè)與氯吡格雷臨床應(yīng)用的基因多態(tài)性檢測(cè)與氯吡格雷臨床應(yīng)用的問題和策略問題和策略1資料與方法1.1臨床資料我院2011年2012年體檢健康人群，無藥物過敏史，檢測(cè)CYP2C19基因型，選擇CYP2C1911野生型10例，CYP2C19223突變型純合子10例，CYP2C19123突變型雜合子10例。其中男18名，年齡21歲～34歲（28歲4歲），女12名，年齡20歲～35歲（29歲5歲）。研究對(duì)象

2、受試前2周及受試期間禁煙、酒，并且不服用任何藥物。1.2基因分型利用ARMSPCR技術(shù)建立CYP2C19基因多態(tài)性檢測(cè)方法，設(shè)計(jì)特異性引物和探針序列，引物和探針委托生工生物工程（上海）有限公司合成及純化。樣本處理：抽取受試者靜脈血3mL，EDTA抗凝，利用基因組提取試劑盒純化核酸，基因組提取試劑盒購自北京天根生化公司，按照其說明書操作。Taq酶擴(kuò)增系統(tǒng)購自上海Promega公司。反應(yīng)條件：95℃預(yù)變性3min；95℃預(yù)變性15s，60℃

3、退火、延伸、信號(hào)采集40s，40個(gè)循環(huán)。反應(yīng)儀器：Mx3000熒光定量PCR儀，購自美國Agilent公司?；蚍中徒Y(jié)果由基因測(cè)序進(jìn)行驗(yàn)證。1.3ADP誘導(dǎo)的血小板聚集率分析受試者在第1天（300組服藥后聚集率明顯低于CYP2C19123突變型雜合子和CYP2C19223突變型純合子（P0.05），CYP2C19123突變型雜合子與CYP2C19223突變型純合子差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）。詳見表1。3討論氯吡格雷是一種常用的血小板

4、聚集抑制劑，臨床療效顯著，備受關(guān)注。氯吡格雷臨床效果存在明顯的個(gè)體差異，實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)ADP誘導(dǎo)的血小板聚集率降低不顯著，未能達(dá)到預(yù)期的抗血小板作用，被稱為氯吡格雷抵抗（clopidogrelresistance，CR）。國外研究約20%的用藥者療效不佳[6]。導(dǎo)致氯吡格雷臨床效果個(gè)體差異的主要因素是CYP2C19基因多態(tài)性，該基因編碼的酶作用于氯吡格雷前體的活性轉(zhuǎn)化。其中CYP2C1911基因型轉(zhuǎn)化效率最高（強(qiáng)度代謝，EM），CYP2C1