ny 438-2001 飼料中鹽酸克侖特羅的測(cè)定

1、NY438一2001前言鹽酸克侖特羅，其化學(xué)名稱為a仁(叔丁氨基)甲基工4氨基一35=_氯苯甲醇鹽酸鹽，俗稱克喘索，是一種9e腎上腺素受體激動(dòng)藥，屬國(guó)家禁止在飼料中使用的藥物。本標(biāo)準(zhǔn)是在參閱歐盟有關(guān)的推薦方法和國(guó)內(nèi)外文獻(xiàn)的基礎(chǔ)上，經(jīng)大量實(shí)驗(yàn)研究制定的本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了以高效液相色譜(HPLC)法和氣相色譜一質(zhì)譜(GCMS)法測(cè)定飼料中鹽酸克侖特羅的方法，規(guī)定GCMS法為仲裁法本標(biāo)準(zhǔn)由全國(guó)飼料標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)提出并歸口。本標(biāo)準(zhǔn)由國(guó)家飼料產(chǎn)品質(zhì)量

2、監(jiān)督檢驗(yàn)中心(北京)負(fù)責(zé)起草，北京師范大學(xué)分析側(cè)試中心參加起草太標(biāo)準(zhǔn)牛要韶草人，常碧影、范理、閻惠文、宋榮、李新新、李蘭。NY4382001328.2SPE淋洗液3.28.2.1淋洗液一1:含2%氨水的5%甲醇水溶液。3.2.8.22淋洗液一2:含20oA水的30%甲醇水溶液3.2.9HPLC專用試劑3.2.9.1HPLC流動(dòng)相:1mLl:1磷酸(優(yōu)級(jí)純)用實(shí)驗(yàn)室二級(jí)水稀釋至1L，并按100:12的比例和乙臘(3.2.2)混合，用前超聲

3、脫氣5min3.2.92鹽酸克侖特羅標(biāo)準(zhǔn)溶液3.2.9.2.1儲(chǔ)備液:200pgmL:10.00mg鹽酸克侖特羅(含C2H8Cl2N20“HCl不少于98.5X)溶于0.02molL鹽酸溶液并定容至50mL，儲(chǔ)于冰箱中。有效期1個(gè)月。32.9.2.2工作液，2.00pgmL:用微量移液器移取儲(chǔ)備液500wL，以0.02molL鹽酸溶液稀至50m工一，儲(chǔ)于冰箱中。32.9.2.3標(biāo)準(zhǔn)系列:用微量移液器移取工作液(3.2.9.2.2)255

4、010050010001A，以0.02molml鹽酸溶液稀釋至2mL，該標(biāo)準(zhǔn)系列中鹽酸克侖特羅的相應(yīng)濃度分別為:002500500.1000.5001.00pgmL，儲(chǔ)于冰箱中。3.3儀器、設(shè)備3.3門實(shí)驗(yàn)室常用儀器、設(shè)備。I12分析天平:感量0.0001g感量0.00001goI13超聲水浴。3.3.4離心機(jī):能達(dá)4000rmin3.3.5分液漏斗:150mLe3.3.6電熱塊或沙浴:可控制溫度在(5。士5)Co3.3.7烘箱:溫度可

5、控制在(70士5)“Co3.3.8高效液相色譜儀:具有Cis柱4pm(如150mmX3.9mmID)或類似的分析柱和UV檢測(cè)器或二極管陣列檢測(cè)器。I4樣品的制備取具代表性的飼料樣品，用四分法縮減分取200g左右，粉碎過。.45mm孔徑的篩:充分混勻，裝人磨[Cl瓶中備用。15分析步驟3.5.1提取:稱取適量試樣(配合飼料5g，預(yù)混料和濃縮料2g)精確至。.0001g置于100mL三角瓶中，準(zhǔn)確加人提取液(3.2.3)50mL，振搖使全部

6、潤(rùn)濕，放在超聲水浴中超聲提取15min，每5min取出用手振搖一次。超聲結(jié)束后，手搖至少10s，并取上層液于離心機(jī)上4000rmin下離心10min3.5.2凈化:準(zhǔn)確吸取上清液10.00mL置150mL分液漏斗中滴加氫氧化鈉溶液(3.24)，充分振搖。調(diào)pH至1112，該過程反應(yīng)較慢，放置35min后，檢查pH，如pH降低，需再加堿調(diào)節(jié)。溶液用3025mL乙醚萃取兩次，令醚層通過無水硫酸鈉干燥，用少許乙醚淋洗分液漏斗和無水硫酸鈉，并用

7、乙醚定容至50mL。準(zhǔn)確吸取25.00ml于50mL燒杯中，置通風(fēng)櫥內(nèi)、低于50℃加熱塊或沙浴(3.3.6)上蒸干，殘?jiān)苡?.00mL鹽酸溶液(3.2.7)，取1.00ml置于預(yù)先已分別用1mL甲醇和1mL去離子水處理過的SPE小柱_t，用注射器稍稍加壓，使其過柱速度不超過1mlmin，再先后分別用1mlSPE淋洗液一1(3.2.8.2.1)和淋洗液一2(3.2.8.2.2)淋洗，最后用甲醇洗脫洗脫液置(70士5)C加熱塊或沙浴上，用