產(chǎn)表面活性劑的石油降解菌的篩選及其特性的研究.pdf

1、隨著石油開采及石油工業(yè)的發(fā)展,石油污染日趨嚴(yán)重。石油及其產(chǎn)業(yè)在給人們帶來巨大利益的同時(shí),也對(duì)人類社會(huì)和生態(tài)環(huán)境造成了巨大威脅。石油密度小,粘度強(qiáng),乳化能力低,容易與土粒粘連,降低土壤質(zhì)量;其污染物成分滲透到地下水,河流,海洋中又會(huì)影響環(huán)境中的水質(zhì)量;它其中的多環(huán)芳烴成分具有致癌、致畸變等作用,危及人類健康;而沒有取代基的環(huán)烷烴,其分子難以受到微生物攻擊而被降解,能長(zhǎng)期存在被污染的環(huán)境中,對(duì)環(huán)境造成持久嚴(yán)重的污染。為了消除石油污染,國(guó)內(nèi)外

2、很多科學(xué)工作者進(jìn)行了廣泛的研究,以尋求安全、經(jīng)濟(jì)、可靠的治理方法或途徑。
　　 本文首先從石油的組成、石油的污染及危害、石油不同烴類的不同降解機(jī)理、石油污染的微生物修復(fù)、生物表面活性劑在石油污染修復(fù)中的研究等方面進(jìn)行了較全面的綜述。從大量的相關(guān)文獻(xiàn)中得出,表明該研究領(lǐng)域所存在的主要問題是產(chǎn)表面活性劑的石油降解優(yōu)勢(shì)菌的獲得及其產(chǎn)表面活性劑條件的確定。因此,將產(chǎn)生物表面活性劑的石油降解菌的篩選分離和降解特性的研究作為本論文的主要研究

3、內(nèi)容。
　　 從山東勝利油田井場(chǎng)周圍長(zhǎng)期被石油污染的土壤中,通過富集培養(yǎng)、分離及對(duì)產(chǎn)表面活性劑的測(cè)定,最終篩選出一株高產(chǎn)表面活性劑的石油降解菌株X-1,經(jīng)形態(tài)觀察、生理生化試驗(yàn)、16S rDNA序列分析等將其鑒定為芽孢桿菌屬(Bacillus sp.)。
　　 菌株X-1具有一定的石油降解能力,培養(yǎng)6d后,其原油的降解率在扣除自然降解部分后達(dá)到30.04％。用氣相色譜一質(zhì)譜聯(lián)用儀GC-MS對(duì)石油烴組分的降解效果進(jìn)行詳細(xì)的

4、定性定量分析,通過色譜-質(zhì)譜聯(lián)用分析了原油組分降解前后的變化規(guī)律,發(fā)現(xiàn)菌株X-1能利用原油中C10～20鏈烴,混合菌X-1和A-1能將C10～C20的鏈烴徹底降解。菌株X-1所產(chǎn)表面活性劑單獨(dú)存在時(shí)對(duì)石油降解不起作用,對(duì)菌株X-1降解石油起促進(jìn)作用,而對(duì)菌株A-1降解石油無影響。
　　 采用萃取、薄層層析、紅外(FTIR)光譜分析等實(shí)驗(yàn)對(duì)菌株X-1產(chǎn)出的生物表面活性劑進(jìn)行提純稱量及考察研究。研究結(jié)果為:菌株X-1產(chǎn)生的生物表面活

5、性劑為淺黃色粉末狀物質(zhì)。并通過硅膠板薄層層析和紅外光譜分析,判定表面活性劑為脂肽、脂蛋白類物質(zhì)。菌株X-1產(chǎn)生表面活性劑的最佳條件為:溫度32℃,pH7.0,鹽度2 g·L-1Nacl,最佳碳源為淀粉,最佳氮源為蛋白胨。20 mg·L-1 Fe2+、Mn2+和Ca2+能夠顯著促進(jìn)X-1的生長(zhǎng)和產(chǎn)生表面活性劑,而20 mg·L-1 Cu2+和Zn2+能夠顯著抑制X-1的生長(zhǎng)和產(chǎn)劑。
　　 菌株X-1在石油污染的方面擁有巨大的生物修