分子診斷學試卷

1、分子診斷學試卷分子診斷學試卷A二、填空二、填空（每空0.5分，共15分。請將答案填寫在答題紙上）1.從高溫嗜熱細菌中發(fā)現(xiàn)高溫DNApolymerase后，使得PCR技術(shù)得以廣泛應(yīng)用，在高溫下有活性的DNApolymerase有?????????????、??????????????、?????????????、??????????????。其中具有3’5’外切活性的高溫DNApolymerase有?????????????和??????

2、????????。2.黏粒(cos)是質(zhì)粒－噬菌體雜合載體，它的復(fù)制子來自、cos位點序列來自，最大的克隆片段達到45kb。3.感受態(tài)細胞(Competentcells)是一種處于_________________________狀態(tài)的細胞。一般通過__________來誘導(dǎo)大腸桿菌感受態(tài)的形成。4.PCR反應(yīng)過程分為三個步驟，即，和。5.細菌的移動基因存在著三種類型的轉(zhuǎn)位因子包括、、。6.Klenow酶在情況下，呈現(xiàn)DNA聚合酶活性，

3、在情況下呈現(xiàn)外切酶活性。7.外源基因在原核細胞中表達，常用的啟動子有、、、和。8.在LacZ標記基因插入外源基因，經(jīng)IPTG誘導(dǎo)，在Xgal培養(yǎng)基中顯色，為性克隆，未插入基因的克隆顯色，為性克隆。9.基因序列經(jīng)堿基替代，缺失或插入后，可使遺傳信息產(chǎn)生三種不同的后果，分別為、、。10.由一個細胞或者組織的基因組所表達的全部相應(yīng)的蛋白質(zhì)，稱為。三、判斷題三、判斷題（錯的打“”，對的打“√”，每題1分，共10分。請將答案填在答題紙對應(yīng)的題號下

4、）1.MaxamGilbert化學降解法測序時，從測序膠上直接讀出的序列是用于測序的模板的互補序列。2.蛋白酶K可有效地降解內(nèi)源蛋白，能快速水解細胞裂解物中的DNA酶和RNA酶，以利于完整DNA和RNA的分離。3.電泳時EB加在瓊脂糖凝膠中一般會降低DNA在瓊脂糖凝膠電泳中的遷移率。4.提取DNA時，若用酚除蛋白質(zhì)，需要用TrisHCl對酚進行平衡pH達7.8。5.基因組研究可以歸納成為構(gòu)建4張相互關(guān)聯(lián)的基因組圖譜：遺傳圖、物理圖、序列

5、圖和功能圖。6.DNA連接酶是一種能催化二條DNA鏈之間形成磷酸二酯鍵的酶，因此該酶既可修復(fù)基因序列中的缺口，也可修復(fù)裂口。7.質(zhì)粒提取后，在瓊脂糖電泳出現(xiàn)一條帶時說明質(zhì)粒提取純度高，當為三條帶時為純度不高。8.COS位點，COS質(zhì)粒，COS細胞它們均含有用于自身環(huán)化的12個堿基的互補粘性末端。9.入噬菌體的插入型載體只有一個單一限制酶切點，替換型載體有2個成對的限制性酶切點。10.原核細胞和真核細胞轉(zhuǎn)錄的mRNA均具有與rRNA結(jié)合的

6、SD序列，以利于進行有效的轉(zhuǎn)錄。四、選擇題四、選擇題（每題1分，共15分。請將最佳答案填在答題紙對應(yīng)的題號下）1.用于核酸分子雜交的探針不能是放射性標記的()。ADNABRNAC抗體D寡核苷酸2.cDNA文庫包括該種生物的()。A某些蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因B所有蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因C所有結(jié)構(gòu)基因D內(nèi)含子和調(diào)控區(qū)3.關(guān)于堿解法分離質(zhì)粒DNA，下面哪一種說法不正確()A溶液I的作用是懸浮菌體B溶液Ⅱ的作用是使DNA變性C溶液Ⅲ的作用是使DNA復(fù)性D質(zhì)

7、粒DNA分子小，所以沒有變性，染色體變性后不能復(fù)性4.有關(guān)DNA序列自動化測定的不正確敘述是（）。A不再需要引物B激光掃描分析代替人工讀序C基本原理與手工測序相同D用熒光代替了同位素標記5.在重組DNA技術(shù)中，不常用到的酶是（）。A限制性核酸內(nèi)切酶BDNA聚合酶CDNA連接酶DDNA解鏈酶片（又稱DNA芯片、生物芯片）。8.蛋白質(zhì)組學：指應(yīng)用各種技術(shù)手段來研究蛋白質(zhì)組的一門新興學科，即研究細胞在不同生理或病理條件下蛋白質(zhì)表達的異同，對相

8、關(guān)蛋白質(zhì)進行分類和鑒定。更重要的是蛋白質(zhì)組學的研究要分析蛋白質(zhì)間相互作用和蛋白質(zhì)的功能.二、填空二、填空（每空0.5分，共15分。請將答案填寫在答題紙上）1.TaqDNA聚合酶TthDNA聚合酶VentDNA聚合酶PwoDNA聚合酶PfuDNA聚合酶PwoDNA聚合酶PfuDNA聚合酶2.質(zhì)粒噬菌體3.容易接受外源DNA片段CaCl2法4.變性退火延伸5.插入序列轉(zhuǎn)位子噬菌體Mu和D1086.有dNTP沒有dNTP7.乳糖啟動子Trp啟

9、動子Tac啟動子噬菌體的PL和PR啟動子脂蛋白啟動子8.白陽性藍陰9.同義突變錯義突變無義突變10.蛋白質(zhì)組三、判斷題三、判斷題（錯的打“”，對的打“√”，每題1分，共10分。請將答案填在答題紙對應(yīng)的題號下）題號12345678910答案√√√√√四、選擇題四、選擇題（每題1分，共15分。請將最佳答案填在答題紙對應(yīng)的題號下）題號123456789101112131415答案CADADACBBDDBCAC五、問答題五、問答題（共36分，請

10、將答案填寫在答題紙對應(yīng)的題號下）1.真核細胞基因組中的基因常有內(nèi)含子存在，能否在原核細胞中表達？為什么？（5分）答：不能，因為原核細胞缺乏對真核基因中內(nèi)含子的剪接功能和轉(zhuǎn)錄后加工系統(tǒng)。原核生物必須有相應(yīng)的原核RNA聚合酶可識別原核細胞的啟動子以催化RNA的合成?；虮磉_是以操縱子為單位，操縱子由數(shù)個相關(guān)的結(jié)構(gòu)基因和調(diào)控功能的部位組成的。因此在構(gòu)建原核表達載體時必須有1個強的原核啟動子及其兩側(cè)的調(diào)控序列。2.質(zhì)粒單酶切點的基因連接如何降低

11、本底和防止自我環(huán)化和提高連接效率？（6分）答：目的基因片斷與載體由相同的單一限制性核酸內(nèi)切酶（如EcI）消化酶切后兩者的兩端均具有相同的粘性末端稱為單酶切點的粘性末端又稱全同源性粘性末端⑴高背景載體經(jīng)單一限制性核酸內(nèi)切酶切割后載體分子易于自我環(huán)化既不利于目的基因的重組連接大大降低陽性克隆效率又可使非重組性載體造成高背景。為了防止載體的自我環(huán)化，通常用堿性磷酸酶去除載體粘性末端的5’P以抑制DNA的自我環(huán)化。在連接反應(yīng)中具有5’P，的目的