第七章生產(chǎn)菌種的擴(kuò)大培養(yǎng)與保藏

1、生產(chǎn)菌種的擴(kuò)大培養(yǎng)與保藏生產(chǎn)菌種的擴(kuò)大培養(yǎng)與保藏目前工業(yè)規(guī)模的發(fā)酵罐容積已達(dá)到幾十立方米或幾百立方米。如按百分之十左右的種子量計(jì)算，就要投入幾立方米或幾十立方米的種子。要從保藏在試管中的微生物菌種逐級(jí)擴(kuò)大為生產(chǎn)用種子是一個(gè)由實(shí)驗(yàn)室制備到車間生產(chǎn)的過(guò)程。其生產(chǎn)方法與條件隨不同的生產(chǎn)品種和菌種種類而異。如細(xì)菌、酵母菌、放線菌或霉菌生長(zhǎng)的快慢；產(chǎn)孢子能力的大??；及對(duì)營(yíng)養(yǎng)、溫度、需氧等條件的要求均有所不同。因此，種子擴(kuò)大培養(yǎng)應(yīng)根據(jù)菌種的生理特性

2、，選擇合適的培養(yǎng)條件來(lái)獲得代謝旺盛、數(shù)量足夠的種子。這種種子接入發(fā)酵罐后，將使發(fā)酵生產(chǎn)周期縮短，設(shè)備利用率提高。種子液質(zhì)量的優(yōu)劣對(duì)發(fā)酵生產(chǎn)起著關(guān)鍵性的作用。種子擴(kuò)大培養(yǎng)種子擴(kuò)大培養(yǎng)：是指將保存在砂土管、冷凍干燥管中處于休眠狀態(tài)的生產(chǎn)菌種接入試管斜面活化后，在經(jīng)過(guò)扁瓶或搖瓶及種子罐逐級(jí)放大培養(yǎng)而獲得一定數(shù)量和質(zhì)量的純種過(guò)程。這些純種培養(yǎng)物稱為種子。發(fā)酵工業(yè)生產(chǎn)過(guò)程中的種子的必須滿足以下條件：（1）菌種細(xì)胞的生長(zhǎng)活力強(qiáng)，移種至發(fā)酵罐后能迅速

3、生長(zhǎng)，遲緩期短；（2）生理形狀穩(wěn)定；（3）菌體總量及濃度能滿足大容量發(fā)酵罐的要求；（4）無(wú)雜菌污染；（5）保持穩(wěn)定的生產(chǎn)能力。第一節(jié)第一節(jié)種子的制備過(guò)程種子的制備過(guò)程在發(fā)酵生產(chǎn)過(guò)程中，種子制備的過(guò)程大致可分為兩個(gè)階段：（1）實(shí)驗(yàn)室種子制備階段（2）生產(chǎn)車間種子制備階段瓶到卡氏培養(yǎng)罐培養(yǎng)期間，均需定時(shí)搖動(dòng)或通氣，使酵母菌液與空氣接觸，以有利與酵母菌的增殖。二、生產(chǎn)車間種子制備二、生產(chǎn)車間種子制備實(shí)驗(yàn)室制備的孢子或液體種子移種至種子罐擴(kuò)大培

4、養(yǎng)，種子罐的培養(yǎng)基雖因不同菌種而異，但其原則為采用易被菌利用的成分如葡萄糖、玉米漿、磷酸鹽等，如果是需氧菌，同時(shí)還需供給足夠的無(wú)菌空氣，并不斷攪拌，使菌（絲）體在培養(yǎng)液中均勻分布，獲得相同的培養(yǎng)條件。1，種子罐的作用：主要是使孢子發(fā)芽，生長(zhǎng)繁殖成菌（絲）體，接入發(fā)酵罐能迅速生長(zhǎng)，達(dá)到一定的菌體量，以利于產(chǎn)物的合成。2，種子罐級(jí)數(shù)的確定種子罐級(jí)數(shù)種子罐級(jí)數(shù)：是指制備種子需逐級(jí)擴(kuò)大培養(yǎng)的次數(shù)，取決于：（1）菌種生長(zhǎng)特性、孢子發(fā)芽及菌體繁殖速

5、度；（2）所采用發(fā)酵罐的容積。比如：細(xì)菌細(xì)菌：生長(zhǎng)快，種子用量比例少，級(jí)數(shù)也較少，二級(jí)發(fā)酵。茄子瓶→種子罐→發(fā)酵罐霉菌霉菌：生長(zhǎng)較慢，如青霉菌，三級(jí)發(fā)酵孢子懸浮液→一級(jí)種子罐（27℃40小時(shí)孢子發(fā)芽，產(chǎn)生菌絲）→二級(jí)種子罐（27℃，10~24小時(shí)，菌體迅速繁殖，粗壯菌絲體）→發(fā)酵罐放線菌放線菌：生長(zhǎng)更慢，采用四級(jí)發(fā)酵酵母酵母：比細(xì)菌慢，比霉菌，放線菌快，通常用一級(jí)種子3，確定種子罐級(jí)數(shù)需注意的問(wèn)題（1）種子級(jí)數(shù)越少越好，可簡(jiǎn)化工藝和控制