復(fù)方枸櫞酸鉍鉀片藥效學(xué)研究

1、1復(fù)方枸櫞酸鉍鉀片藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)研究復(fù)方枸櫞酸鉍鉀片藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)研究李蔚李蔚1，馬嘉1，張妍1，朱捷，朱捷1，，陳志武志武2，周，周蘭蘭蘭蘭2（1.1.解放解放軍第105105醫(yī)院制醫(yī)院制劑室安徽合肥安徽合肥230031230031；2.2.安徽醫(yī)科大學(xué)安徽醫(yī)科大學(xué)藥理學(xué)教研室理學(xué)教研室安徽合肥安徽合肥230022230022）通訊作者：李蔚，Tel:13855138138，Email:liwei551@.摘要摘要目的目的觀察復(fù)方枸櫞酸鉍鉀片

2、對(duì)胃炎胃潰瘍的治療作用。方法方法采用大鼠足爪腫脹、肉芽腫實(shí)驗(yàn)和小鼠扭體、熱板法實(shí)驗(yàn)，觀察復(fù)方枸櫞酸鉍鉀片抗炎、鎮(zhèn)痛作用；建立大鼠急性胃炎、胃潰瘍和慢性胃炎模型，測(cè)定胃液量，胃酸度（pH值）及胃蛋白酶活性，潰瘍指數(shù)，并進(jìn)行病理學(xué)檢查，觀察復(fù)方枸櫞酸鉍鉀片對(duì)各類(lèi)胃炎及胃潰瘍的治療作用。結(jié)果與模型組比較，復(fù)方枸櫞酸鉍鉀片高、中、低劑量均能明顯減輕大鼠的足爪腫脹度，高、中劑量組可明顯減輕大鼠肉芽腫，減少小鼠的扭體次數(shù)，提高小鼠痛閾值；高、中劑量

3、組可明顯降低急性胃炎大鼠的潰瘍指數(shù)及胃潰瘍大鼠的潰瘍面積，對(duì)慢性胃炎和膽汁返流性胃炎大鼠胃酸度的降低也有明顯抑制作用；光學(xué)顯微鏡下示復(fù)方枸櫞酸鉍鉀片高、中、低劑量組可顯著地改善慢性胃炎和膽汁返流性胃炎大鼠胃組織的病理改變。結(jié)論結(jié)論復(fù)方枸櫞酸鉍鉀片對(duì)急性胃炎、胃潰瘍、慢性胃炎及膽汁返流性胃炎具有一定的治療作用。關(guān)鍵詞鍵詞復(fù)方枸櫞酸鉍鉀片藥效學(xué)胃炎胃潰瘍復(fù)方枸櫞酸鉍鉀片是我院經(jīng)多年臨床經(jīng)驗(yàn)研制的用于消化性潰瘍及慢性胃炎的復(fù)方制劑，具有解痙止

4、痛、收斂止血、保護(hù)胃黏膜作用?？捎糜贖P感染的三聯(lián)或四聯(lián)療法應(yīng)用。主要成分為枸櫞酸鉍鉀、延胡索、白及。本試驗(yàn)擬通過(guò)采用大鼠足腫脹、肉芽腫實(shí)驗(yàn)和小鼠扭體、熱板法實(shí)驗(yàn)，觀察復(fù)方枸櫞酸鉍鉀片抗炎鎮(zhèn)痛作用；通過(guò)建立大鼠急性胃炎、胃潰瘍和慢性胃炎模型，測(cè)定胃液量，胃酸度（pH值）及胃蛋白酶活性，潰瘍指數(shù)，于光學(xué)顯微鏡下進(jìn)行病理學(xué)檢查，驗(yàn)證復(fù)方枸櫞酸鉍鉀片對(duì)各類(lèi)胃炎及胃潰瘍的治療作用，為臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。1.材料與方法材料與方法1.11.1實(shí)驗(yàn)

5、材料實(shí)驗(yàn)材料1.1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：健康昆明種小鼠，雌雄兼有體重18～22g由揚(yáng)州大學(xué)提供，動(dòng)物合格證：SCXK(蘇)20070001；SD大鼠，雌13，雄23蘇州工業(yè)園區(qū)愛(ài)爾麥特科技有限公司提供，動(dòng)物合格證：SCXK（蘇）20090001。1.1.2藥品與試劑：復(fù)方枸櫞酸鉍鉀片（CompoundColloidalBismuthSubcitrate中國(guó)人民解放軍第一零五醫(yī)院制劑中心提供，批號(hào)：100403），灌胃時(shí)用蒸餾水配成所需的濃度；胃

6、蘇顆粒（Stomachperilgranule揚(yáng)子江藥業(yè)集團(tuán)江蘇制藥股份有限公司生產(chǎn)，批號(hào)：08051801）；阿斯匹林腸溶片（aspirin南京白敬宇制藥有限責(zé)任公司生產(chǎn)，批號(hào)：090625）；氫化可的松注射液（Hydroctisone商丘哈森藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，批號(hào)：20070223）；角叉菜膠(Sigma公司生產(chǎn))；乙酸(蚌埠化學(xué)試劑廠生產(chǎn)，批號(hào)：060425)；胃蛋白酶測(cè)試盒(由南京建成生物工程研究所提供，批號(hào)：20090813)

7、；去氧膽酸鈉(50g瓶，Biotopped公司提供)；牛磺膽酸鈉(50g瓶，Biotopped公司提供)；胰酶(25g瓶，由Amresco公司提供，批號(hào)：0458)；卵磷脂(5g瓶，由Roche公司提供，批號(hào)：10735078001)。1.1.3實(shí)驗(yàn)儀器：UV754紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)(山東高密彩虹分析儀器有限公司生產(chǎn))、電熱恒溫水浴鍋（上海醫(yī)療器械五廠生產(chǎn)）、RB200智能熱板儀（成都泰盟科技有限公司生產(chǎn)）、游標(biāo)卡尺（上海恒勝工具有限公

8、司生產(chǎn)）、MP2000A型電子天平（上海第二天平儀器廠生產(chǎn)）、注射器等。1.2方法1.2.1復(fù)方枸櫞酸鉍鉀片對(duì)大鼠足腫脹和肉芽腫程度的影響[1]1）取SD大鼠50只，體重180～220g，雄性，隨機(jī)分5組，模型組（等體積蒸餾水）、陽(yáng)性對(duì)照阿斯匹林組(0.027gkg）、復(fù)方枸櫞酸鉍鉀片高、中、低（0.44、0.22、0.11gkg）劑量組，每組10只。分3用水隨意飲用。第6090d，分別用40%乙醇溶液與10mmoll的去氧膽酸鈉溶液每

9、隔3d輪換作為飲用水隨意飲用。將造模后的50只大鼠隨機(jī)分為5組(每組10只)分別模型組、陽(yáng)性對(duì)照組（胃蘇顆粒）和復(fù)方枸櫞酸鉍鉀片高、中、低（劑量同3.1）劑量組。給予模型組、正常組等體積蒸餾水，其它各組分別以灌胃法給相應(yīng)藥物，1次d，連續(xù)7d。末次給藥后1h處死大鼠。檢測(cè)胃液酸度和胃蛋白酶活性，胃組織以10%甲醛固定作HE染色借助顯微鏡下測(cè)微器，在距幽門(mén)環(huán)、前胃與腺胃交界處200～1200um間，利用測(cè)微器測(cè)量2mm長(zhǎng)度下粘膜固有腺體數(shù)

10、，從而得到腺體密度（單位：個(gè)mm）。胃液總酸度測(cè)定：取上清胃液1ml，加酚紅指示劑1滴，用0.01mollNaOH滴定液滴定，記錄消耗NaOH滴定液的體積。總酸度（mmoll）=耗去的NaOH滴定液的體積1.2.7復(fù)方枸櫞酸鉍鉀片對(duì)大鼠膽汁返流性胃炎的影響[5，6]模型的制作:取健康SD大鼠60只，雌雄各半，體重180～220g，隨機(jī)分成6組，每組10只，分別為正常對(duì)照組、模型組、陽(yáng)性藥對(duì)照組(胃蘇顆粒1.35gkg)、復(fù)方枸櫞酸鉍鉀片

11、高、中、低劑量組。除正常組外，各組大鼠以?；悄懰徕c2.5g，胰酶1.5g，卵磷脂0.25g，溶于100ml蒸餾水中制成模擬膽汁返流溶液灌胃造模，給藥量為1.5ml100g，1次d，連續(xù)35d。造模后，各組分別以灌胃法給予蒸餾水或相應(yīng)藥物，1次d，連續(xù)7d。末次給藥后1h處死大鼠，檢測(cè)胃液量，胃酸度（PH值）及胃蛋白酶活性，胃組織以10%甲醛固定作HE染色觀察胃黏膜層炎癥侵潤(rùn)程度及不典型增生程度。（炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)程度分級(jí)[7]：輕度：炎癥細(xì)

12、胞較少并局限于粘膜淺層，不超過(guò)粘膜層的13；中度，炎癥細(xì)胞浸入粘膜全層的23，數(shù)量較多；重度，炎癥細(xì)胞密集，浸入粘膜全層或肌層。）1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法統(tǒng)計(jì)學(xué)方法數(shù)據(jù)均以?x?s表示，組間分析用t檢驗(yàn)，分級(jí)資料用成組設(shè)計(jì)兩樣本的秩和檢驗(yàn)。2結(jié)果結(jié)果2.1復(fù)方枸櫞酸鉍鉀片對(duì)大鼠足腫脹和肉芽腫程度的影響實(shí)驗(yàn)表明，與模型組比較，復(fù)方枸櫞酸鉍鉀片各劑量均能明顯減輕大鼠的足腫脹度，各劑量組的大鼠足腫脹度與模型組對(duì)照比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05），高

13、劑量組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.01）；復(fù)方枸櫞酸鉍鉀片高、中劑量組可明顯減輕大鼠肉芽腫，低劑量作用不明顯。結(jié)果見(jiàn)表1、2。表1復(fù)方枸櫞酸鉍鉀片對(duì)大鼠復(fù)方枸櫞酸鉍鉀片對(duì)大鼠角叉菜所致角叉菜所致腳腫脹的影響腳腫脹的影響(?XS，n=10)Tab1EffectsofCompoundColloidalBismuthSubcitrateonlegswellinginducedbycarrageeninratsDifferenttimeafterm

14、edication(ml)GroupDose(gkg)Befemedication(ml)1.0h2.0h3.0h4.0h5.0h6.0hMmodelDistilledwater1.1270.1380.1810.0760.3770.0850.4080.1040.3940.1040.3640.0920.3200.095Aspirin0.0271.1410.1250.1160.0510.2120.0800.2300.0730.2170.07

15、40.1920.0660.1720.056CompoundColloidalBismuthSubcitrate0.441.1250.1010.1310.0440.2350.0530.2610.0600.2540.0580.2280.0550.1870.0370.221.0890.0990.1300.0640.2480.0570.2760.0590.2670.0610.2420.0600.1840.0540.111.1050.1360.1