氨氮降解菌的分離鑒定及其抑制雞糞氨氣揮發(fā)效果的研究.pdf

1、畜禽糞便氨氣排放是養(yǎng)殖業(yè)污染排放的重要組成部分。已有研究表明，環(huán)境中的氨氣直接危害到動(dòng)物和人類(lèi)的健康，例如誘發(fā)呼吸道疾病、促進(jìn)可吸入顆粒物(PM2.5)的形成，并且氨氣也可與大氣中與一些酸性物質(zhì)反應(yīng)，形成銨鹽氣溶膠，導(dǎo)致生態(tài)系統(tǒng)富營(yíng)養(yǎng)化和酸化。本研究以減少雞糞中的氨氮含量為切入點(diǎn)，篩選具有高效氨氮降解能力的硝化微生物，并對(duì)其抑制雞糞氨氣揮發(fā)的效果進(jìn)行研究，為進(jìn)一步研制生物除臭飼料添加劑提供研究基礎(chǔ)。
　　試驗(yàn)一以雞糞為分離材料，用

2、富含氨氮的液體培養(yǎng)液對(duì)微生物進(jìn)行富集培養(yǎng)，采用平板劃線(xiàn)法進(jìn)行分離純化，共得到15株能夠利用氨氮的菌株。通過(guò)對(duì)其氨氮降解效率的研究，進(jìn)一步篩選得到3株具有高效氨氮降解能力的酵母菌和一株絲狀真菌，分別命名為L(zhǎng)SA、NGH、YSA和HL，對(duì)其進(jìn)行形態(tài)學(xué)觀察、分子生物學(xué)鑒定和生物化學(xué)法鑒定，初步認(rèn)定四株菌為魯假絲酵母LSA(Candida kruse)，粉狀畢赤酵母NGH(Pichia farinos)，皺落假絲酵母YSA(Candida ru

3、gosa)和擬宛氏青霉菌HL（Paecilomyces variotii）。
　　試驗(yàn)二研究了溫度、pH、碳源、碳氮比和初始氨氮濃度對(duì)上述4個(gè)菌株氨氮降解能力的影響，其中溫度設(shè)定為20℃、25℃、30℃、35℃和40℃; pH設(shè)定為3、4、5、6、7、8和9;碳源分別為淀粉、甘露醇、檸檬酸鈉、葡萄糖、乙酸鈉和碳酸氫鈉;碳氮比設(shè)定為5、10、20、40;初始氨氮濃度為100、300、600和1200mg/L。結(jié)果表明，菌株對(duì)外界環(huán)境

4、有很強(qiáng)的耐受性。菌株LSA的最適降解條件為溫度35℃，pH3-7，葡萄糖為碳源，C/N20;YSA的最適降解條件為溫度35℃，pH3-7，乙酸鈉為碳源，C/N20; NGH的最適降解條件為溫度30-35℃，pH3-7，葡萄糖為碳源，C/N10;HL的最適降解條件為溫度35℃，pH4-7，葡萄糖為碳源，C/N40。四株菌都能利用濃度范圍為100-1200mg/L的氨氮進(jìn)行生長(zhǎng)代謝，氨氮的快速降解階段發(fā)生在菌株的生長(zhǎng)對(duì)數(shù)期。在初始氨氮濃度為

5、300mg/L時(shí)，菌株LSA，YSA，NGH和HL的氨氮降解率分別為71.83％，31.89％，43.01％，80.53％;初始氨氮濃度為1200mg/L時(shí)，氨氮降解率分別為57.44％，18.05％,35.46％,39.80％。
　　試驗(yàn)三將四株菌的菌懸液分別與肉雞糞便混合后在密閉的燒杯中發(fā)酵，收集發(fā)酵過(guò)程中產(chǎn)生的氨氣，測(cè)定其含量，并收集發(fā)酵后的糞便樣品，測(cè)定糞便樣品中的氨氮和總氮的含量，計(jì)算氨氮在總氮中的比重。同時(shí)測(cè)定三株酵母

6、菌混合菌液對(duì)糞便氨氣產(chǎn)生的影響。結(jié)果表明，除菌株YSA以外，其他三株菌對(duì)糞便氨氣散發(fā)量均有顯著的抑制作用，酵母菌株（LSA、NGH和混合酵母菌）的在接種后的24-48小時(shí)間對(duì)氨氣的抑制效果最為顯著，酵母菌混合菌液的抑制效果要好于單株酵母菌的作用效果。絲狀真菌HL在接種72-96小時(shí)間，對(duì)糞便氨氣的抑制效果最佳。與對(duì)照組相比，菌株LSA、NGH、HL以及酵母菌混合菌株能夠顯著減少雞糞中氨氮的含量。
　　可以得出以下結(jié)論，從雞糞中分離