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1、醋酸纖維素薄膜作用電泳的支持物有何醋酸纖維素薄膜作用電泳的支持物有何優(yōu)缺點(diǎn)?優(yōu)缺點(diǎn)?[標(biāo)簽:標(biāo)簽:基礎(chǔ)知識(shí)基礎(chǔ)知識(shí)]提問者:游客瀏覽次數(shù):246提問時(shí)間:2008090701:38姓名:筆名:等級(jí):回答數(shù):0次通過率:0主營行業(yè):公司:醋酸纖維素薄膜電泳染色后區(qū)帶可剪下,溶于一定的溶劑中進(jìn)行光密度測定。也可以浸于折射率為1.474的油中或其他透明液中使之透明,然后直接用光密度計(jì)測定。它的缺點(diǎn)是厚度小,樣品用量很小,不適于制備。原理:醋酸
2、纖維素薄膜電泳(celluloseacetatemembranceelectrophesis)以醋酸纖維薄膜為支持物。它是纖維素的醋酸酯,由纖維素的羥基經(jīng)乙?;瞥伞K苡诒扔袡C(jī)溶液中,即可涂布成均一細(xì)密的微孔薄膜,厚度以0.1mm0.15mm為宜。太厚吸水性差,分離效果不好;太薄則膜片缺少應(yīng)有的機(jī)械強(qiáng)度則易碎。醋酸纖維素薄膜與濾紙相比較,有以下優(yōu)點(diǎn)(1)醋酸纖維素薄膜對蛋白質(zhì)樣品吸附極少,無“拖尾“現(xiàn)象,染色后背景能完全脫色,各
3、種蛋白質(zhì)染色帶分離清晰,因而提高了測定的精確性。(2)快速省時(shí)。由于醋酸纖維素薄膜親水性較濾紙小,薄膜中所容納的緩沖液也較少,電滲作用小,電泳時(shí)大部分電流是由樣品傳導(dǎo)的,所以分離速度快,電泳時(shí)間短,一般電泳4560min即可,加上染色,脫色,整個(gè)電泳完成僅需90min左右。(3)靈敏度高,樣品用量少。血清蛋白僅需2μl血清,甚至加樣體積少至0.1μl,僅含5μg蛋白樣品也可得到清晰的分離帶。臨床醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)利用這一點(diǎn),檢測在病理情況下微量異
4、常蛋白的改變。(4)應(yīng)用面廣。某些蛋白在紙上電泳不易分離,如胎兒甲種球蛋白,溶菌酶,胰島素,組蛋白等用醋酸纖維薄膜電泳能較好地分離。(5)醋酸纖維素薄膜電泳染色后,經(jīng)冰乙酸,乙醇混合液或其它溶液浸泡后可制成透明的干板,有利于掃描定量及長期保存。2、醋酸纖維素薄膜電泳與聚丙烯酰胺凝膠電泳相比,操作簡單,但分離效果不太好。如血清蛋白在醋酸纖維素薄膜電泳中,只能分離出56條區(qū)帶,而聚丙烯酰胺凝膠電泳可分離出數(shù)10條區(qū)帶。[應(yīng)用意義]由于醋酸纖
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