顯微復(fù)習(xí)題(最終答案全版)

1、顯微技術(shù)包括哪些部分內(nèi)容？顯微技術(shù)包括哪些部分內(nèi)容？顯微技術(shù)：利用光學(xué)系統(tǒng)或電子光學(xué)系統(tǒng)設(shè)備，觀察肉眼所不能分辨的微小物體形態(tài)結(jié)構(gòu)及其特性的技術(shù)。包括1各種顯微鏡的基本原理操作和應(yīng)用的技術(shù)2顯微鏡樣品的制備技術(shù)3觀察結(jié)果的記錄分析和處理的技術(shù)。固定時(shí)應(yīng)注意事項(xiàng)固定時(shí)應(yīng)注意事項(xiàng)1注意固定材料本身的結(jié)構(gòu)性質(zhì)，選用適合的固定液，固定時(shí)間根據(jù)材料特點(diǎn)增減2固定微小材料直接投入固定液中，對于較大材料先將其解剖成較小材料迅速投入固定液，完成殺生固定

2、作用3固定體積較大材料時(shí)，會(huì)出現(xiàn)外部固定過度，而內(nèi)部未固定好，考慮選用滲透快的固定液（乙酸乙醇或苦味酸乙醛混合液），加用超聲波發(fā)生器能達(dá)到迅速固定目的4對多毛的芽或根莖的固定時(shí)，先投入乙酸乙醇液浸泡數(shù)分鐘，然后再入納瓦申固定液或其他固定液完成固定。同時(shí)，要進(jìn)行抽氣，另可用超聲波發(fā)生器進(jìn)行固定抽氣5一般固定液多為酸性固定影像，鹽基性固定影像較少，除考慮影像外，還應(yīng)在脫水劑、滲入劑方面進(jìn)行觀察6固定劑的濃度不可忽視7固定材料的記錄：固定標(biāo)本

3、瓶上必須貼上標(biāo)簽，用筆書寫以下內(nèi)容：編號(hào)，采集時(shí)間、地點(diǎn)、處理者的姓名簡寫，固定液的名稱，保存液的名稱等常用的常用的染色劑類型染色劑類型根據(jù)來源：天然染料和人工染料根據(jù)化學(xué)性質(zhì)：堿性染料酸性染料中興染料根據(jù)染色性能：核染料細(xì)胞質(zhì)染料細(xì)胞壁染料組織化學(xué)染料熒光染料活體染料注意事項(xiàng)注意事項(xiàng)1應(yīng)根據(jù)觀察目的、樣品結(jié)構(gòu)、性質(zhì)選擇適當(dāng)?shù)娜旧椒?材料從某一溶液進(jìn)入染色液時(shí)，兩種溶液的濃度必須相同3酸性染料著色速度快于堿性染料，雙重染色時(shí)，先用堿性

4、染料染色，再用酸性4染色寧可深，因?yàn)樗春兔撍畷?huì)使顏色變淺5用分色劑時(shí)，要在低倍顯微鏡下隨時(shí)觀察，分色適度即徹底洗凈6染色的時(shí)間不是一成不變，要根據(jù)染色劑的性質(zhì)，配方，切片的厚薄，材料的結(jié)構(gòu)等在使用時(shí)靈活掌握常用的透明劑用的透明劑透明劑都是石蠟溶劑，不能與水混合例如：二甲苯氯仿冬青油浸蠟浸蠟1浸蠟瓶放在溫箱中過夜時(shí)，材料不能太多2浸蠟一般從低溫到高溫，從低濃度到高濃度，使石蠟慢慢滲入組織內(nèi)，將透明劑替代出來包埋包埋1注意安全防火防燙傷2

5、包埋速度不能太慢以免石蠟?zāi)?包埋石蠟溫度不能太高以免損傷材料4蠟中出現(xiàn)氣泡可將鑷子燒熱燙去5未冷卻前不能將蠟盒移入水中6應(yīng)注意包埋材料的位置、方向，要有利于切割切片及研究7熔蠟時(shí)人不能離開，如果石蠟出現(xiàn)冒煙情況時(shí)，不要揭開蠟杯蓋，要及時(shí)切斷電源徒手切片方法制片過程。徒手切片方法制片過程。取樣—固定—水洗—切片—染色—脫水—透明—封藏1取材：用FAA固定或不固定2徒手切片的步驟a取一套小培養(yǎng)皿，皿內(nèi)盛有清水b切片c挑選好的切片3染色與保

6、存a臨時(shí)裝片：加1d1%番紅水溶液，短期保存則加1d10%的甘油使切片更透明，避免失水變干變黑b永久存片：染色滑走切片法制片過程特殊滑走切片法制片過程特殊步驟步驟過程1固定切片2固定樣品3調(diào)整材料的高度4調(diào)節(jié)切片的厚度5切片6每次切片結(jié)束后，要用軟布將切片機(jī)擦拭干凈，滑槽內(nèi)切下的碎屑也需清除，將切片刀取下擦干凈并滴注機(jī)油后放入刀盒保存特殊步驟：材料若太堅(jiān)硬，需經(jīng)過軟化處理壓片法制片過程壓片法制片過程1取材和前處理：種子萌發(fā)后待初生根長到

7、1cm長左右，切取根尖前端5mm置于裝有前處理液（秋水仙素、對二氯苯、a溴代萘、8羥基喹啉）的指形瓶中，處理3~5h2固定：將材料固定于乙醇：乙酸（3:1）固定液0.5h以上3水洗：將材料用自來水浸泡、清洗20min以上，期間要換水4酶解：用纖維素酶和果膠酶各2.5%的混失2因熒光較弱，觀察應(yīng)在較暗的室內(nèi)進(jìn)行3使用遮光板防止紫外線損傷視網(wǎng)膜4制片過程中，盡量避免使用能產(chǎn)生熒光的試劑5切片不能太厚體視顯微鏡的特點(diǎn)體視顯微鏡的特點(diǎn)1最大倍數(shù)

8、僅為200倍左右2工作距離長，便于實(shí)際操作3成像為三維空間的立體視覺圖像視場直徑大焦深大暗場顯微鏡的特點(diǎn)暗場顯微鏡的特點(diǎn)原理根據(jù)光學(xué)上的丁達(dá)爾現(xiàn)象設(shè)計(jì)。特點(diǎn)利用暗視野進(jìn)行觀察，與明視野不同，照明光線通過暗視野聚光鏡后，光線不是直接進(jìn)入物鏡，而是由標(biāo)本表面的反射光線或衍射光線形成圖像，結(jié)果背景變暗，標(biāo)本發(fā)亮顯微鏡的常用附件顯微鏡的常用附件游標(biāo)尺目鏡測微尺與鏡臺(tái)測微尺怎樣的照片才算是好照片怎樣的照片才算是好照片1一幅好照片要有一個(gè)鮮明的主題

9、（有時(shí)也稱之為題材）?；蚴潜憩F(xiàn)一個(gè)人，或是表現(xiàn)一件事物，甚至可以表現(xiàn)該題材的一個(gè)故事情節(jié)。主題必須明確，毫不含糊，使任何觀賞者一眼就能看得出來2一幅好照片必須能把注意力引向被攝主體，換句話說，使觀賞者的目光一下子就投向被攝主體3一幅好照片必須畫面簡潔，只包括那些有利于把視線引向被攝主體的內(nèi)容，而排除或壓縮那些可能分散注意力的內(nèi)容。石蠟制片的過程。石蠟制片的過程。取樣（材料的選擇和分割）固定保存沖洗、染色（整染）脫水（各級(jí)乙醇，低濃度—高

10、濃度)透明（透明劑，低濃度—高濃度）浸蠟（低濃度—高濃度）包埋（石蠟包埋劑）切片（旋轉(zhuǎn)切片機(jī)）展片、粘片烘片脫蠟（脫包埋劑石蠟）復(fù)水（各級(jí)乙醇，低濃度—高濃度）染色（片染）分色（根據(jù)染色情況而定）脫水（各級(jí)乙醇，低濃度—高濃度）透明鏡檢、封藏烘片、觀察、攝影照相機(jī)的原理影響曝光因素照相機(jī)的原理影響曝光因素原理小孔成像因素1快門：控制進(jìn)光時(shí)間2光圈：調(diào)節(jié)光通量快門的作用快門的作用控制進(jìn)光時(shí)間影響成像清晰度不同快門速度的效果:較低的快門速度

11、獲得具有動(dòng)感的模糊照片高速快門可以獲得定格的動(dòng)作照片數(shù)字越大速度越快生物顯微技術(shù)生物顯微技術(shù):利用光學(xué)系統(tǒng)或電子光學(xué)系統(tǒng)設(shè)備，觀察肉眼所不能分辨的微小物態(tài)結(jié)構(gòu)及其特性的技術(shù)。單純固定液：僅含一種固定劑的固定液。混合固定液：有幾種單純固定液按一定比例混合而成。固定：也稱為殺生.指用物理或化學(xué)的方法，迅速殺死新鮮的植物細(xì)胞、組織，并且盡量保持其生活的自然狀態(tài)。復(fù)式顯微鏡：由兩組或兩組以上的透鏡系統(tǒng)組成。單式顯微鏡：只有一個(gè)透鏡的顯微鏡，即放