實驗四 液相色譜法測定苯甲酸、山梨酸含量

1、1周次日期課時安排3課時課題實驗三液相色譜法測定苯甲酸、山梨酸含量重點難點教學目標1、了解高效液相色譜儀的結構和工作原理；2、理解苯甲酸和山梨酸的高效液相色譜方法。教學方法教學手段1要求學生實驗前認真預習實驗內容，實驗前教師檢查并批改預習報告，了解學生預習情況。2實驗前先進行重點的講解和示范基本操作、實驗步驟中的注意事項，實驗過程中巡回指導。教學過程實驗操作參考GBT5009.292003食品中山梨酸、苯甲酸的測定第二法高效液相色譜法一

2、、原理一、原理試樣加溫除去二氧化碳和乙醇，調pH至近中性，過濾后進高效液相色譜儀，經反相色譜分離后，根據(jù)保留時間和峰面積進行定性和定量。二、試劑二、試劑方法中所用試劑，除另有規(guī)則外，均為分析純試劑，水為蒸餾水或同等純度水，溶液為水溶液。甲醇：經濾膜（0.5μm）過濾。稀氨水（11）：氨水加水等體積混合。乙酸銨溶液（0.02molL）：稱取1.54g乙酸銨，加水至1000mL，溶解，經0.45μm濾膜過濾。碳酸氫鈉溶液（20gL）：稱取2

3、g碳酸氫鈉（優(yōu)級純），加水至100mL，振搖溶解。苯甲酸標準儲備溶液：準確稱取0.1000g苯甲酸，加碳酸氫鈉溶液（20gL）5mL，加熱溶解，移入100mL容量瓶中，加水定容至100mL，苯甲酸含量為1mgmL，作為儲備溶液。3推一針濃度峰面積提取10ml雪碧（只含苯甲酸）稀釋至50ml稀釋五倍六個芒果（只含山梨酸）45組雪碧樣品min246810mAU20020406080100120140160VWD1AWavelength=23

4、0nm(C:CHEM321DATA20140623名名名名名20141019104510.D)1.7811.9972.2012.3452.6817.70245組芒果樣品min24681012mAU050100150200250300VWD1AWavelength=230nm(C:CHEM321DATA20140623名名名名名20141019105701.D)1.4051.9222.1642.3572.4952.6262.8312.97