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1、光電比濁計(jì)數(shù)法光電比濁計(jì)數(shù)法一、目的要求1了解光電比濁計(jì)數(shù)法的原理。2學(xué)習(xí)、掌握光電比濁計(jì)數(shù)法的操作方法。二、基本原理當(dāng)光線通過微生物菌懸液時(shí),由于菌體的散射及吸收作用使光線的透過量降低。在一定的范圍內(nèi),微生物細(xì)胞濃度與透光度成反比,與光密度成正比,而光密度或透光度可以由光電池精確測出(圖154)。因此,可用一系列已知菌數(shù)的菌懸液測定光密度,作出光密度—菌數(shù)標(biāo)準(zhǔn)曲線。然后,以樣品液所測得的光密度,從標(biāo)準(zhǔn)曲線中查出對(duì)應(yīng)的菌數(shù)。制作標(biāo)準(zhǔn)曲線
2、時(shí),菌體計(jì)數(shù)可采用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),平板菌落計(jì)數(shù)或細(xì)胞干重測定等方法。本實(shí)驗(yàn)采用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。光電比濁計(jì)數(shù)法的優(yōu)點(diǎn)是簡便、迅速,可以連續(xù)測定,適合于自動(dòng)控制。但是,由于光密度或透光度除了受菌體濃度影響之外,還受細(xì)胞大小、形態(tài)、培養(yǎng)液成分以及所采用的光波長等因素的影響。因此,對(duì)于不同微生物的菌懸液進(jìn)行光電比濁計(jì)數(shù)應(yīng)采用相同的菌株和培養(yǎng)條件制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。光波的選擇通常在400~700nm之間,具體到某種微生物采用多少還需要經(jīng)過最大吸收波
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