【實(shí)驗(yàn)報(bào)告】血液凝固及其影響因素

1、動物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)報(bào)告Page1實(shí)驗(yàn)五：血液凝固及其影響因素實(shí)驗(yàn)五：血液凝固及其影響因素實(shí)驗(yàn)人：同組人：【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹?學(xué)習(xí)血液凝固的基本過程2了解加速或延緩血液凝固的一些因素【實(shí)驗(yàn)原理】血液凝固是一個(gè)酶的有限水解激活過程，在此過程中有多種凝血因子參與。根據(jù)凝血過程起動時(shí)激活因子來源不同，可將血液凝固分為內(nèi)源性激活途徑和外源性激活途徑。內(nèi)源性激活途徑是指參與血液凝固的所有凝血因子在血漿中，外源性激活途徑是指受損的組織中的組織因子進(jìn)入血管后，與

2、血管內(nèi)的凝血因子共同作用而啟動的激活過程?！緦?shí)驗(yàn)材料和用具】家兔清潔小試管7個(gè)、小燒杯2個(gè)、竹簽、秒表、試管架、哺乳動物手術(shù)器械一套、兔手術(shù)臺、動脈夾、塑料動脈插管、線、棉花、水浴槽、冰盒液狀石蠟、肝素、草酸鉀1~2mg、腦勻漿液0.1ml、生理鹽水【實(shí)驗(yàn)過程】1、動物麻醉及頸部手術(shù)（此部由助教老師操作）取一只動物，稱重。按1gkg體重的劑量將烏拉坦（氨基甲酸乙酯）由耳緣靜脈緩慢注入，觀察動物肌張力、呼吸與角膜反射的變化。動物麻醉后背位

3、固定于兔手術(shù)臺上。剪去頸部手術(shù)野的毛，沿頸正中線在喉頭上一指至鎖骨上一指的地方作一5～7cm的皮膚切口。分離皮下組織及肌肉。2、頸總動脈插管（此部由助教老師操作）在氣管兩側(cè)辨別并分離頸總動脈，頸總動脈下方穿兩條線備用。在左側(cè)頸總動脈的近心端夾一動脈夾，在動脈夾遠(yuǎn)心端距動脈夾約3cm處結(jié)扎。用小剪刀在結(jié)扎線的近側(cè)（結(jié)扎線與動脈夾之間）沿向心方向剪一小斜口（約占管徑的一半），向心臟方向插入動脈插管，由備用的線結(jié)扎固定。取血時(shí)將動脈夾松開即可

4、。3、血液凝固的加速和延緩觀察1.打開兔頸總動脈夾，血液從動脈插管流出，棄去第一份1mL動脈血后，向每個(gè)試管中注入1mL兔動脈血，并搖勻。2.自血液流出動脈插管開始計(jì)時(shí)。除第1管外，其他各管每隔15秒鐘將試管傾斜一次，觀察液面是否傾斜即血液是否流動，直到試管內(nèi)血液不再流動為止，記錄凝血時(shí)間。3.當(dāng)?shù)?管已經(jīng)凝固時(shí)，再傾斜第1管看血液是否凝固，若尚未凝固則按上述方法每隔15秒鐘傾斜一次，直到血液凝固為止，記錄凝血時(shí)間，即為該兔血的凝固時(shí)間

5、。4.以第2管為對照，各管觀察其他各管中血液凝固時(shí)間。5.向第9管中滴加2％氯化鈣2滴，觀察血液是否凝固。6.取出第5管中的玻棒，用水洗凈，觀察附著在玻棒上的纖維蛋白。注意事項(xiàng)：動物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)報(bào)告Page3纖維蛋白糾纏在竹簽上相繼激活而生成凝血酶，最終使纖維蛋白原變?yōu)槔w維蛋白，而糾結(jié)在竹簽上，形成一層蛋白膜。機(jī)體凝血系統(tǒng)包括凝血和抗凝兩個(gè)方面，兩者間的動態(tài)平衡是正常機(jī)體維持體內(nèi)血液流動狀態(tài)和防止血液丟失的關(guān)鍵。機(jī)體的正常止凝血，主要依賴

6、于完整的血管壁結(jié)構(gòu)和功能，有效的血小板質(zhì)量和數(shù)量，正常的血漿凝血因子活性。其中，血小板和凝血因子是生理性止凝血的重要成分(見圖1)?？鼓到y(tǒng)不僅包括抗凝因子，還包括纖溶系統(tǒng)。BT出血時(shí)間CFT束臂試驗(yàn)CRT血塊收縮試驗(yàn)BPC血小板計(jì)數(shù)CT凝血時(shí)間RT復(fù)鈣時(shí)間APTT活化部分凝血活酶時(shí)間PT凝血酶原時(shí)間PF3血小板第3因子TF組織因子Fb纖維蛋白TXA2血栓素A25HT5－羥色胺PK激肽釋放酶原HMWK高分子量激肽原圖1正常止血機(jī)制及血栓

7、與止血常用篩選試驗(yàn)檢測環(huán)節(jié)正常止血機(jī)制及血栓與止血常用篩選試驗(yàn)檢測環(huán)節(jié)血小板的作用：在正常的血液循環(huán)中，血小板并不與內(nèi)皮細(xì)胞表面或其他細(xì)胞發(fā)生作用，而是沿著毛細(xì)血管內(nèi)壁排列，維持其完整性，血管局部受損傷時(shí)，血小板的止血兼有機(jī)械性的堵塞傷口和生物化學(xué)性粘附聚集作用。止血時(shí)，首先是受損的血管壁發(fā)生收縮，使局部血液流動變慢或減少。血液中的血小板在vWF因子存在下迅速粘附于暴露的膠原纖維，此時(shí)血小板被激活，血小板形態(tài)發(fā)生改變，由正常的圓盤狀態(tài)變

8、為圓球形，偽足突起，血小板發(fā)生聚集(血小板膜糖蛋白IIbIIIa由纖維蛋白原介導(dǎo)發(fā)生互相粘附、聚集)，此為血小板第一相聚集，激活的血小板便發(fā)生釋放反應(yīng)和花生四烯酸代謝，其中許多物質(zhì)，如血小板的ADP等，可加速血小板的聚集、變性成為不可逆的“第二相聚集”，形成白色血栓，構(gòu)成了初期止血的屏障。與此同時(shí)，由血小釋放和激活許多促凝物質(zhì)參與血液凝固反應(yīng)。血小板膜磷脂表面提供了凝血反應(yīng)的場所，血小板第3因子在凝血過程多個(gè)環(huán)節(jié)中發(fā)揮重要作用，血小板合