大鼠丙二醛mda試劑盒使用建議

1、大鼠丙二醛（大鼠丙二醛（MDA）試劑盒使用建議試劑盒使用建議檢測(cè)范圍：檢測(cè)范圍：48T0.25nmolL8nmolL使用目的：使用目的：本試劑盒用于測(cè)定大鼠血清、血漿及相關(guān)液體樣本中丙二醛（MDA）含量。實(shí)驗(yàn)原理實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗原夾心法測(cè)定標(biāo)本中大鼠丙二醛（MDA）水平。用純化的大鼠丙二醛（MDA）抗原包被微孔板，制成固相抗原，往包被單抗的微孔中依次加入丙二醛（MDA），再與HRP標(biāo)記的丙二醛（MDA）抗原結(jié)合，形成抗原抗體酶標(biāo)

2、抗原復(fù)合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的丙二醛（MDA）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中大鼠丙二醛（MDA）濃度。試劑盒組成試劑盒組成120倍濃縮洗滌液20ml1瓶7終止液3ml1瓶2酶標(biāo)試劑3ml1瓶8標(biāo)準(zhǔn)品（16nmolL）0.5ml1瓶3酶標(biāo)包被板12孔4條9標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml1瓶4樣品稀

3、釋液3ml1瓶10說(shuō)明書1份5顯色劑A液3ml1瓶11封板膜2張6顯色劑B液3ml1瓶12密封袋1個(gè)標(biāo)本要求標(biāo)本要求1標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融2不能檢測(cè)含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。操作步驟操作步驟1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。8nmolL5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品

4、150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液4nmolL4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液2nmolL3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1nmolL2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液0.5nmolL1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液2.加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上

5、標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl，待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl（樣品最終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液：將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。6.加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。7.溫育：操作同3。8.洗滌：