2012年云南微生物專業(yè)第二次室間質(zhì)評(píng)小結(jié)

1、12012年云南省微生物專業(yè)（第二次）室間質(zhì)評(píng)小結(jié)年云南省微生物專業(yè)（第二次）室間質(zhì)評(píng)小結(jié)20120201號(hào)標(biāo)本：惡臭假單胞菌。嚴(yán)格需氧，有鞭毛，無芽胞、無莢膜的革蘭陰性桿菌，有些菌株為卵圓形，單端叢毛菌，運(yùn)動(dòng)活潑，最適生長(zhǎng)溫度25℃~30℃，42℃不生長(zhǎng)，4℃生長(zhǎng)不定，菌落與銅綠假單胞菌相似。氧化酶陽性，OF試驗(yàn)為氧化型，借此可與腸桿菌科細(xì)菌相鑒別。鑒定中注意與其他假單胞菌相區(qū)別，惡臭假單胞菌只產(chǎn)生熒光素（即青膿素），而不產(chǎn)生綠膿素，

2、且42℃不生長(zhǎng)，借此可與銅綠假單胞菌區(qū)別；惡臭假單胞菌不液化明膠、不產(chǎn)生卵磷酯酶、陳舊培養(yǎng)物上有腥臭味，借此可與熒光假單胞菌相區(qū)別。惡臭假單胞菌為魚的一種致病菌，常從腐敗的魚中檢出，可作為人類咽部的正常菌群，是人類少見的條件致病菌，偶從人類尿道感染、皮膚感染和骨髓炎標(biāo)本中分離出，分泌物有腥臭味；也可引起化膿性關(guān)節(jié)炎和菌血癥等。20120202號(hào)標(biāo)本：熱帶假絲酵母菌。屬于假絲酵母菌屬。熱帶假絲酵母菌在玉米粉吐溫80培養(yǎng)基上培養(yǎng)3天后涂片，

3、可見大量菌絲，菌絲上端有芽生孢子，可分枝或呈短鏈狀，在隔膜處和隔膜之前形成芽；在SDA培養(yǎng)基上培養(yǎng)12天后形成乳白色到奶油色無光澤或稍有光澤的菌落；在顯色培養(yǎng)基上菌落成藍(lán)色。目前省內(nèi)大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室采用了顯色培養(yǎng)基來初次分離和鑒別假絲酵母菌屬。該顯色培養(yǎng)基可對(duì)臨床常見的幾種假絲酵母菌進(jìn)行鑒別，如白假絲酵母菌、熱帶假絲酵母菌、克柔假絲酵母菌、光滑假絲酵母菌（不同產(chǎn)家的顏色判定標(biāo)準(zhǔn)不同），但對(duì)于白色的假絲酵母菌，如近平滑，則需要與隱球酵母屬和其

4、他酵母菌屬進(jìn)行鑒別，通常的方法可以用墨汁染色和脲酶試驗(yàn)將近平滑假絲酵母與隱球菌屬區(qū)分開，前者都為陰性，與其他酶母菌屬的鑒別就要借此很多生化試驗(yàn)和形態(tài)學(xué)來區(qū)分。熱帶假絲酵母菌應(yīng)注意與偽熱帶假絲酵母菌的鑒別，前者不同化乳糖和蜜三糖，同化海藻糖，芽管試驗(yàn)形成類似白假絲酵母菌樣的芽管（但萌發(fā)出的是帶縊痕的芽，不是真正的芽管）。值得一提的是，微觀檢測(cè)對(duì)酵母菌屬的鑒別有至關(guān)重要的作用，可觀察有助于識(shí)別的結(jié)構(gòu)：1、生物體的大小和形狀；2、生芽位置；3

5、、莢膜的有無；4、胞壁的厚度；5、假菌絲的存在；6、分生節(jié)孢子的存在，但由于真菌種類繁多，鏡下形態(tài)觀察需有豐富的臨床經(jīng)驗(yàn)才可做出正確判斷，因此借此一些商品化的鑒定手段是可行的，如采用API真菌鑒定板條、細(xì)菌鑒定儀等。本次標(biāo)本在顯色培養(yǎng)基中（科碼嘉）呈現(xiàn)為藍(lán)色菌落，不難鑒別，因此幾乎所有實(shí)驗(yàn)室回報(bào)的結(jié)果都正確。20120203號(hào)標(biāo)本：溶血隱秘桿菌。屬于棒桿菌科中的隱秘桿菌屬。隱秘桿菌屬有5個(gè)種，其中與醫(yī)學(xué)相關(guān)的有溶血隱秘桿菌、化膿隱秘桿菌

6、（最近從放線菌中重新劃分出來的）和伯爾德隱秘桿菌。該菌為革蘭陽性，呈多形性、棒狀，有時(shí)呈顆粒狀和念珠狀，類似小鏈球菌，無鞭毛，無抗酸性。該菌在CO2環(huán)境中生長(zhǎng)良好，在血瓊脂平板上形成直徑0.10.4nm的白色小菌落，有兩種菌落形態(tài)，即粗糙型（主要從呼吸道分離出來）和光滑型（主要從傷口分離），48小時(shí)后形成狹窄的?溶血環(huán)（但溶血環(huán)不如化膿隱秘桿菌深和寬）。生化特征為：觸酶陰性，硝酸鹽陰性，無動(dòng)力，不分解木糖。值得注意的是該菌屬曾經(jīng)歸放在放

7、線菌屬和棒狀桿菌屬，因脂肪酸分析顯示更接近前兩者。本次標(biāo)本鏡下形態(tài)與放線菌屬、諾卡菌屬形態(tài)很相似，因此有些實(shí)驗(yàn)室報(bào)告為星形諾卡菌和放線菌（均不得分），三者可以用觸酶、脲酶、弱抗酸染色試驗(yàn)進(jìn)行鑒別（見表1）。還有部分實(shí)驗(yàn)室報(bào)告為紅斑丹毒絲菌而未得分，那么如何區(qū)分兩者呢？最簡(jiǎn)便的方法是通過血培養(yǎng)上的溶血情況和H2S產(chǎn)生與否進(jìn)行區(qū)分，紅斑丹毒絲菌在血培養(yǎng)板上呈現(xiàn)為?溶血或不溶血，產(chǎn)H2S，而溶血隱秘桿菌為?溶血、不產(chǎn)H2S。溶血穩(wěn)秘桿菌還需與

8、其他隱秘桿菌相區(qū)別，見表2，也可通3查找原因并改進(jìn)。20120205號(hào)標(biāo)本：遲鈍愛德華菌。屬于腸桿菌科愛德華菌屬，該菌屬含3個(gè)種，其中遲鈍愛德華菌是唯一與人類感染相關(guān)的種。該菌為革蘭陰性桿菌，有周鞭毛，有動(dòng)力，無芽胞，無莢膜；在血瓊脂平板上35℃培養(yǎng)1824小時(shí)后形成圓形、濕潤(rùn)、光滑、灰白色的菌落。由于該菌不分解乳糖，在麥康凱瓊脂平板上形成無色半透明、濕潤(rùn)、光滑的菌落，故需與非發(fā)酵菌相鑒別，關(guān)鍵性鑒別試驗(yàn)為OF試驗(yàn)：遲鈍愛德華菌為發(fā)酵型

9、，而非發(fā)酵菌為氧化型或產(chǎn)堿型。該菌的很多生化反應(yīng)和菌落形態(tài)都與不分解乳糖的大腸埃希氏菌相似，兩者的關(guān)鍵性鑒別試驗(yàn)為H2S產(chǎn)生情況：遲鈍愛德華菌可產(chǎn)H2S，而后者多數(shù)不產(chǎn)。但由于有極少數(shù)的大腸埃希菌也可產(chǎn)少量H2S，故還需要借助其他試驗(yàn)進(jìn)行鑒別，如木糖、山梨醇和黏液酸發(fā)酵試驗(yàn)：遲鈍愛德華菌可發(fā)酵這三種物質(zhì)，而大腸埃希菌則相反。遲鈍愛德華菌與沙門菌屬、志賀菌屬的鑒別主要根據(jù)吲哚試驗(yàn)和血清凝集試驗(yàn)：前者吲哚試驗(yàn)陽性、不與沙門菌或志賀菌抗血清發(fā)

10、生凝集，而后二者吲哚試驗(yàn)陽性、可與相應(yīng)菌屬的抗血清發(fā)生凝集。遲鈍愛德華菌與其他愛德華菌的鑒別見表3。遲鈍愛德華菌存在于自然界中，是一種條件致病菌，其最顯著的臨床特征是類沙門氏菌腸炎，在所有的年齡組中都能發(fā)病，但小孩和老人更易感染，且感染多與水和其他環(huán)境事故導(dǎo)致的外傷后感染有關(guān)。該菌對(duì)多黏菌素具有抗性。如果需要對(duì)該菌感染進(jìn)行抗生素治療，氨芐青霉素、增效聯(lián)磺片和環(huán)丙沙星都是有效的。因此，結(jié)合2010年CLSI中腸桿菌科的藥敏標(biāo)準(zhǔn)，本次選擇性

11、考核了以下幾個(gè)藥物的敏感性：氨芐西林（10分）、慶大霉素（10分）、左氧氟沙星復(fù)方新諾明（任一藥物正確得10分）、頭孢他啶氨曲南（任一藥物正確得10分）、頭孢呋辛亞胺培南（任一藥物正確得10分）。本標(biāo)本為一個(gè)全敏菌株，以上藥物均為敏感。絕大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室鑒定和藥敏都正確。表3愛德華菌屬鑒別的關(guān)鍵性試驗(yàn)（陽性%）菌名H2S動(dòng)力（36℃）吲哚甲基紅丙二酸鹽甘露醇水楊苷阿拉伯糖海藻糖遲鈍愛德華菌100989910000090生物型I群010010