動(dòng)物實(shí)驗(yàn)基本技術(shù)和方法

1、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)基本技術(shù)和方法,廣東藥學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心,主要內(nèi)容,一、 實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備二、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物抓取與固定三、年齡的大致判斷四、性別、發(fā)情、與妊娠鑒定五、編號(hào)和標(biāo)記六、分組七、去毛八、給藥途徑與方法九、采血方法十、其他體液采集十一、麻醉方法十二、處死方法十三、動(dòng)物病理檢查,一、 實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備,理論準(zhǔn)備：了解動(dòng)物實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)知識(shí) 制定研究計(jì)劃和方案

2、 查閱關(guān)于實(shí)驗(yàn)方法的參考文獻(xiàn)條件準(zhǔn)備：儀器、器械、藥品 運(yùn)輸 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)和飼養(yǎng)場(chǎng)所,二、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物抓取和固定,（一）小鼠,小鼠固定器固定,（二）大鼠,大鼠固定盒固定,（三）豚鼠,（四）家兔,兔子固定器固定,狗鉗,狗的抓取固定,（五）犬,犬嘴固定方法,貓的抓取,犬固定,（六）猴抓取與保定,猴徒手固定,三、年齡的大致判斷,

3、（一）大、小鼠1、根據(jù)形態(tài)鑒定日齡（大、小鼠情況基本一樣）,2. 根據(jù)體重鑒定日齡⑴ 小鼠日齡與體重的對(duì)應(yīng),⑵ 大鼠日齡與體重的對(duì)應(yīng),（二）豚鼠一般老年豚鼠牙齒和趾爪長(zhǎng)，被毛稀疏無(wú)光澤，眼神呆滯，行動(dòng)遲緩。而年輕豚鼠牙齒短白，爪短軟，眼睛圓亮，行動(dòng)敏捷，被毛有光澤，且緊貼身體。同樣，也可根據(jù)體重來(lái)推斷大致年齡。同日齡豚鼠，雌性體重略高于雄性。與大鼠一樣，其體重受多種因素的制約。實(shí)驗(yàn)對(duì)年齡要求比較嚴(yán)格時(shí)，必須由卡片記錄提供準(zhǔn)確年

4、齡。,（三）家兔 家兔的門齒和爪隨年齡增長(zhǎng)而增長(zhǎng)，是年齡鑒別的重要標(biāo)志。青年兔門齒潔白，短小，排列整齊；老年兔門齒暗黃，厚而長(zhǎng)，排列不整齊，有時(shí)破損。白色家兔趾小基本呈紅色，尖端呈白色。1歲家兔紅色與白色長(zhǎng)度相等；1歲以下，紅多于白；1歲以上，白多于紅。還可根據(jù)趾爪的長(zhǎng)度與彎曲度來(lái)區(qū)別。青年兔趾爪較短，直平，隱在腳毛中，隨年齡的增長(zhǎng)，趾爪露出于腳毛之外，而且爪尖鉤曲。另外，家兔皮薄而緊，眼神明亮，行動(dòng)活潑的為青年兔；皮厚而松，眼神頹廢

5、，行動(dòng)遲緩的為老年兔。,（四）犬犬的年齡主要以牙齒的生長(zhǎng)情況、磨損程度、外形顏色等情況綜合判定。仔犬在出生后十幾天即開(kāi)始生出乳齒，2個(gè)月以后開(kāi)始由門齒→犬齒→臼齒順序逐漸更換為恒齒，8～l0個(gè)月齒換齊。但犬齒需要1歲半以后才能長(zhǎng)堅(jiān)實(shí)。飼養(yǎng)場(chǎng)飼養(yǎng)的品種犬，可以根據(jù)記錄，明確了解年齡，而收購(gòu)的雜種犬就無(wú)法知道確切年齡。實(shí)際中，可根據(jù)犬齒更換和磨損情況，估計(jì)犬的年齡。,四、性別、發(fā)情、與妊娠鑒定,（一）大、小鼠的性別鑒定,初生兔仔如陰部孔

6、洞扁圓而略大于肛門，且與肛門相向、距離較近的是母兔；孔洞呈圓形而略小于肛門，孔洞向前而距肛門較遠(yuǎn)的是公兔。 三月齡以上的兔子，只要看有無(wú)陰囊即可區(qū)別公母。,（二）兔的性別鑒定,Female,Male,（三）大、小鼠發(fā)情鑒定,小鼠性周期陰道分泌物涂片變化,（四）妊娠鑒定,1、陰道栓法（大、小鼠、豚鼠）2、外部檢查法3、摸胎法4、陰道檢查法5、直腸檢查法6、超聲波檢查法7、孕酮含量測(cè)定法,陰道栓,五、編號(hào)和標(biāo)記,1、染色

7、法：淺色動(dòng)物 3.5-5％苦味酸溶液（黃色） 0.5%中性紅或堿性品紅溶液（紅色） 煤焦油酒精溶液（黑色） 龍膽紫溶液（紫色）,2、打耳孔法：小型動(dòng)物,3、剪趾法：小型動(dòng)物,4、剪尾法：大、小鼠，僅限與兩組間區(qū)分5、烙印法：刺號(hào)鉗，中、大型動(dòng)物6、針刺法：中、大型動(dòng)物7、號(hào)牌法：耳標(biāo)簽、項(xiàng)圈、腿圈，中、大型動(dòng)物8、剪毛法：大動(dòng)物9、籠子標(biāo)號(hào),六、分組,隨機(jī)化分組：避免人為影響

8、例：將14只小鼠隨機(jī)分成兩組。①先將小鼠編為I～14號(hào)，②在隨機(jī)數(shù)字表上任點(diǎn)一數(shù)，按任意方向連續(xù)抄14個(gè)隨機(jī)數(shù)字。 編排如下：,動(dòng)物編號(hào) 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14隨機(jī)數(shù)字 16 22 77 94 39 49 54 43 54 82 17 37 93 23歸 組 B B A B

9、 A A B A B B A A A A③奇數(shù)代表A織，偶數(shù)代表B組④A組： 3 5 6 8 11 12 13 14 B組： 1 2 4 7 9 10⑤調(diào)整分組：接剛才隨機(jī)數(shù)字23繼續(xù)抄表得隨機(jī)數(shù)字78，用78除以8（因?yàn)樾枰袮組的8個(gè)數(shù)字調(diào)整掉一個(gè)），得余數(shù)6，所以把A組的第6個(gè)動(dòng)物，即12號(hào)

10、動(dòng)物調(diào)整到B組,⑥ 最終分組A組： 3 5 6 8 11 13 14B組： 1 2 4 7 9 10 12,例：12只大鼠隨機(jī)分為3組①大鼠編號(hào)1~12②在隨機(jī)數(shù)字表上任點(diǎn)一數(shù)，按任意方向連續(xù)抄12個(gè)隨機(jī)數(shù)字。③每個(gè)數(shù)分別用3除，記錄余數(shù)，④ 根據(jù)余數(shù)分組大鼠編號(hào)：1， 2， 3， 4， 5， 6， 7， 8， 9， 10， 11， 12隨機(jī)數(shù)字：08，27，01，

11、50，15，29，39，39，43，79， 69，10余數(shù)： 2， 0， 1， 2， 0， 2， 0， 0， 1， 1， 0， 1組別： B， C， A， B， C， B， C， C， A， A，C， A,⑤ A：3，9，10，12 B；1，4，6 C：2，5，7，8，11⑥調(diào)整分組：接剛才隨機(jī)數(shù)字10繼續(xù)抄表得隨機(jī)數(shù)字61，用61除以5（因?yàn)樾枰?/p>

12、把C組的5個(gè)數(shù)字調(diào)整掉一個(gè)），得余數(shù)1，所以把C組的第1個(gè)動(dòng)物，即2號(hào)動(dòng)物調(diào)整到B組。⑦最終分組 A：3，9，10，12 B；1， 2 ，4，6 C：5，7，8，11,七、去毛,1、剪毛：彎頭剪毛剪。2、拔毛：大小鼠尾靜脈、家兔耳緣靜脈注射。3、剃毛：將剃毛部位先用剪刀粗剪一遍，蘸溫肥皂水潤(rùn)濕，用剃刀順著被毛方向剃毛，用電動(dòng)剃毛推剪，則逆被毛向剃毛。,4、化學(xué)脫毛：常用脫毛劑①8%硫化鈉水溶液②硫化鈉

13、3份，洗衣粉1份、淀粉7份，加水調(diào)成糊狀③硫化鋇50克，氧化鋅25克，淀粉25克，加水100毫升調(diào)成糊狀④硫化鈉10克，生石灰15克，加水到100毫升，適合犬和其他大動(dòng)物。,八、給藥途徑與方法,（一）自動(dòng)口服：加入飼料或飲水（二）投喂藥片：掰開(kāi)口，放到舌根部,（三）灌胃（i.g),1、小鼠、大鼠、豚鼠 灌胃時(shí)將灌胃針按在注射器上，吸入藥液。左手抓住鼠背部及頸部皮膚將動(dòng)物固定，右手持注射器，將灌胃針插入動(dòng)物口中，沿咽后壁徐徐

14、插入食道。動(dòng)物應(yīng)固定成垂直體位，針插入時(shí)應(yīng)無(wú)阻力。若感到阻力或動(dòng)物掙扎時(shí)，應(yīng)立即停止進(jìn)針或?qū)⑨槹纬?，以兔損傷或穿破食道以及誤入氣管?！　∫话惝?dāng)灌胃針插入小鼠3～4cm，大鼠或豚鼠4～6cm后可將藥物注入。常用的灌胃量小鼠為0.2～ 1ml，大鼠1～4ml，豚鼠為1～5ml。,2、狗、兔、貓、猴  灌胃時(shí)，先將動(dòng)物固定，再將特制的擴(kuò)口器放入動(dòng)物口中，擴(kuò)口器之寬度可視動(dòng)物口腔大小而定，如狗的擴(kuò)口器可用木料制成長(zhǎng)方形，長(zhǎng)約

15、10～15cm，粗細(xì)應(yīng)適合狗嘴，約2～3cm，中間粘一小孔，孔的直途為5～10cm。灌胃時(shí)將擴(kuò)口器放于上述動(dòng)物上下門牙之后，并用繩將它固定于嘴部，將帶有彈性的橡皮導(dǎo)管（如導(dǎo)尿管），經(jīng)擴(kuò)口器上的小圓孔插入，沿咽后壁而進(jìn)入食道，此時(shí)應(yīng)檢查導(dǎo)管是否正確插入食道，可將導(dǎo)管外口置于一盛水的燒杯中，如不發(fā)生氣泡，即認(rèn)為此導(dǎo)管是在食道中，未誤入氣管，即可將藥液灌入。灌胃管插入長(zhǎng)度狗為20cm，兔子為12-15cm。,動(dòng)物最大灌胃量,（四）直腸給藥

16、（五）呼吸道給藥 （六）滴鼻 （七）點(diǎn)眼 （八）經(jīng)皮膚給藥：常用于檢測(cè)藥物、毒物、化妝品等的透皮吸收、局部作用、至敏作用等。家兔和豚鼠選擇脊柱兩側(cè)皮膚，大小鼠常采取浸尾方式。 （九）皮內(nèi)注射(i.d)：一般用于接種或過(guò)敏實(shí)驗(yàn)。將藥液注射在真皮和表皮之間。皮內(nèi)注射時(shí)需將注射的局部脫去被毛，消毒后，用左手拇指和食指按住皮膚并使之繃緊，在兩指之間，用注射器連4(1/2)號(hào)細(xì)針頭，緊貼皮膚表層刺入皮內(nèi)，然后再向上挑起并再稍刺入，即可注射

17、藥液，此時(shí)可見(jiàn)皮膚表面鼓起一白色小皮丘。,（十）皮下注射(s.c)：注射時(shí)以左手拇指和食指提起皮膚，將連有5（1/2）號(hào)針頭的注射器刺入皮下。皮下注射部位一般狗、貓多在大腿外側(cè)，豚鼠在后大腿的內(nèi)側(cè)或小腹部；大白鼠可在側(cè)下腹部。兔在背部或耳根部注射。蛙可在脊背部淋巴腔注射。（十一）肌肉注射(i.m)：股部肌肉,（十二）腹腔注射(i.p)：用大、小白鼠做實(shí)驗(yàn)時(shí)，以左手抓住動(dòng)物，使腹部向上，右手將注射針頭于左（或右）下腹部刺入皮

18、下，使針頭向前推 0.5～1.0cm，再以45度角穿過(guò)腹肌，固定針頭，緩緩注入藥液，為避免傷及內(nèi)臟，可使動(dòng)物處于頭低位，使內(nèi)臟移向上腹。若實(shí)驗(yàn)動(dòng)物為家兔，進(jìn)針部位為下腹部的腹白線離開(kāi)1cm處。,（十三）靜脈注射(i.v)：,1、小鼠：尾靜脈2、大鼠：尾靜脈、 陰莖靜脈、 舌下靜脈、 淺背側(cè)跖靜脈,大小鼠有上、左、右3根尾靜脈，成

19、品字型,小鼠尾靜脈注射,,大鼠陰莖靜脈注射,大鼠舌下靜脈注射,大鼠淺背側(cè)跖靜脈注射,3、豚鼠：淺背側(cè)跖靜脈、耳靜脈注射4、家兔：耳靜脈注射5、豬：耳緣靜脈6、猴：前肢橈靜脈、后肢隱靜脈注射,豬耳緣靜脈注射,7、貓、狗：前肢內(nèi)側(cè)頭靜脈、后肢外側(cè)小隱靜脈注射,狗前肢內(nèi)側(cè)頭靜脈,狗后肢外側(cè)小隱靜脈,猴的后肢皮下靜脈注射,（十四）腦腔注射：1、小鼠 小指夾鼠尾，拇指和是指置小鼠頭兩側(cè)固定，中指和無(wú)名指壓住鼠身，在注射

20、處消毒后，右手持注射器，以食指固定針芯，垂直刺入針頭深度約5～7mm。2、兔 將兔用固定器固定好，剃去頭頂?shù)谋幻?，左手將頭皮繃緊，消毒后，右手持錐子，自頭頂正中稍偏一側(cè)部位，錐穿頭骨，即換以左手固定錐子，右手持注射器，使針頭沿錐尖刺入，慢慢拔出錐子，即刻將針頭刺入約10～20mm，即可推液。,（十五）關(guān)節(jié)腔注射：（十六）椎管內(nèi)注射：注射入蛛網(wǎng)膜下腔（十七）淋巴囊內(nèi)注射：蛙和蟾蜍,（十八）小腦延髓池注射：,幾種動(dòng)物

21、不同給藥途徑的常用注射量（毫升）,九、采血方法,（一）大、小鼠：1、眶靜脈叢（竇）： 少量多次采大小鼠血。 小鼠0.2～0.3ml， 大鼠0.4～0.6ml2、摘眼球：用于一次大量采小鼠血，可得到4～5％體重的血量3、尾靜脈：用于少量多次采大小鼠血,尾靜脈采血,4、剪頭：用于一次性大量采小鼠血，可得到0.5～1.0ml的血量5、大血管：包括頸動(dòng)脈（靜脈），股動(dòng)脈（靜脈），腋下動(dòng)脈（靜脈），腹主動(dòng)脈，此方法

22、不常用于小鼠采血，而多用于大鼠一次性大量采血。可得5ml左右血量。6、心臟采血：小鼠少用，可用于大鼠一次性（開(kāi)胸）或多次采血（不開(kāi)胸）。,心臟采血,（二）家兔 ：1、耳緣靜脈：中等血量的采集，可反復(fù)采血，每次5～10ml。2、耳中央動(dòng)脈：可反復(fù)采血，每次10～15ml。,3、心臟采血：可用于 一次性（開(kāi)胸）或 多次采血（不開(kāi)胸）。 一次性開(kāi)胸采血可 得到80～100ml血量4、頸動(dòng)靜脈采血：用于一次

23、性采血，需要手術(shù)，可得血量80～10ml。,（三）豚鼠：1、心臟采血：可用于一次性（開(kāi)胸）或多次采血（不開(kāi)胸）。一次性開(kāi)胸采血可得到5～10ml血量。2、背跖靜脈采血：用于少量反復(fù)采血。3、耳緣剪口采血,（四）犬貓：和靜脈注射部位相同，前肢內(nèi)側(cè)頭靜脈、后肢外側(cè)小隱靜脈。也可頸靜脈（動(dòng)脈）或心臟采血。,（五）豬：前腔靜脈或耳大靜脈采血（六）羊：頸靜脈采血（七）猴：前肢頭靜脈、后肢皮下靜脈或耳緣靜脈等。（八）禽類：翼下靜脈,仔豬

24、前腔靜脈采血,采血注意事項(xiàng),（一）采血場(chǎng)所有充足的光線；室溫夏季最好保持在25～28℃，冬季，15～20℃為宜；（二）采血用具有采用部位一般需要進(jìn)行消毒；（三）采血用的注射器和試管必須保持清潔干燥；（四）若需抗凝全血，在注射器或試管內(nèi)需預(yù)先加入抗凝劑。（五）注意不同動(dòng)物的采血量采血。,１、取少量血,,２、取中量血,３、取大量血,4、最大安全采血量與最小致死采血量,常用抗凝劑：1、肝素：抑制凝血酶活力，阻止血小板凝集。純品肝素1

25、mg＝125U，10U~20U抗1ml血凝集，但通常應(yīng)用2~3倍劑量。 用法：可配成1%肝素溶液，用時(shí)取0.1ml于試管內(nèi)，100℃烘干，每管可抗凝5~10ml血?；蛴?%肝素溶液濕潤(rùn)采血注射器。 肝素可改變蛋白質(zhì)等電點(diǎn)，當(dāng)用鹽析法分離蛋白作分類測(cè)定時(shí)，不可用肝素抗凝。,2、枸櫞酸鈉：使凝血必需的鈣離子失活。常用3~5%水溶液，堿性較強(qiáng)。3、草酸鹽合劑：草酸銨1.2g，草酸鉀0.8g，福爾馬林1.0ml，加蒸餾水至100

26、ml。使凝血必需的鈣離子失活。每毫升血加草酸鹽合劑0.1ml。4、氟化鈉：每毫升血加6mg。,十、其他體液采集,1、胸水、腹水采集：穿刺2、消化液采集：唾液，胃液，胰液，膽汁3、精液采集：中、大動(dòng)物用假陰道，小動(dòng)物穿刺附睪來(lái)采集精液。4、腦脊液采集：手術(shù)或小腦延髓池抽取5、骨髓采集：大動(dòng)物活體穿刺，小動(dòng)物處死后取股骨或胸骨骨髓。,6、尿液采集：代謝籠收集導(dǎo)尿管采集膀胱穿刺壓迫排尿,十一、麻醉方法,（一）麻醉方法：1、

27、全麻 吸入麻醉，靜脈注射、腹腔注射。2、局麻 浸潤(rùn)麻醉。根據(jù)手術(shù)，按皮下、筋膜、肌肉、腹膜、骨膜等順序逐步深入注射到術(shù)野周圍。,（二）麻醉前準(zhǔn)備：1、禁食8~12h，防止嘔吐，可飲水。2、根據(jù)實(shí)驗(yàn)部位和種類，給動(dòng)物脫毛。3、犬、豬、猴等大動(dòng)物可在麻醉前給予一些藥物以減少動(dòng)物緊張，減少支氣管分泌。,（1）阿托品：減少支氣管和唾液腺分泌，防止氣管阻塞。副作用：加快心率。用量：肌肉或皮下注射0.04mg/kg（2）安定：

28、產(chǎn)生鎮(zhèn)靜作用，加強(qiáng)麻醉效果，使骨骼肌松弛。用量：2.5~5mg/kg（3）嗎啡：產(chǎn)生鎮(zhèn)靜作用。副作用：抑制呼吸中樞。用量：皮下注射1~2mg/kg，肌肉注射10~20mg/kg。,（三）麻醉藥物：1、全麻藥物（1）乙醚：強(qiáng)揮發(fā)性、易燃。乙醚是最常用的吸入麻醉劑，各種動(dòng)物適用。 機(jī)制：抑制中樞神經(jīng)系統(tǒng)。 特點(diǎn)：安全范圍大，肌肉完全松弛，對(duì)肝腎毒性小，麻醉誘導(dǎo)期和蘇醒期較長(zhǎng)。副作用：局部刺激大，引起上呼吸道黏膜分泌增加，導(dǎo)

29、致呼吸道阻塞，可用阿托品對(duì)抗解救。,（2）巴比妥類：種類很多，有巴比妥鈉，戊巴比妥鈉，硫噴妥那，苯巴比妥鈉等。適用于各種動(dòng)物。如實(shí)驗(yàn)中大小鼠常用3％戊巴比妥鈉溶液腹腔注射進(jìn)行麻醉。 特點(diǎn)：安全范圍廣，毒性小，麻醉潛伏期短，麻醉維持時(shí)間長(zhǎng)?？筛骨换蜢o脈給藥。機(jī)理：阻斷神經(jīng)沖動(dòng)傳遞到大腦。 副作用：過(guò)量使用可導(dǎo)致呼吸肌麻痹而死亡，同時(shí)抑制末梢循環(huán)，導(dǎo)致血壓降低，并影響基礎(chǔ)代謝，導(dǎo)致體溫降低。,（3）氯胺酮：常用其鹽酸鹽

30、。 特點(diǎn)：麻醉潛伏期短，麻醉維持期僅10~20min，麻醉淺，安全性高，可重復(fù)給藥。 機(jī)制：阻斷大腦聯(lián)絡(luò)途徑。 副作用：興奮心血管系統(tǒng)，使血壓升高，心率加快，偶爾引起嘔吐。（4）水合氯醛：作用特點(diǎn)和巴比妥類相似。但安全范圍小，麻醉劑量和中毒劑量接近，對(duì)皮膚和黏膜有較強(qiáng)刺激。,2、局麻藥物（1）普魯卡因：是無(wú)刺激性的局麻藥物。 特點(diǎn)：麻醉速度快，注射后1~3分鐘就可產(chǎn)生麻醉?？梢跃S持30~45分鐘。對(duì)皮膚和黏膜

31、穿透力很弱，需要注射給藥才能產(chǎn)生局麻效果。它可以使血管舒張，易被吸收入血液而失去效果。在其溶液中加入腎上腺素（每100ml加入0.1%腎上腺素0.2~0.5ml）可以使麻醉時(shí)間延長(zhǎng)1~2小時(shí)。,（2）利多卡因：效力和穿透力比普魯卡因強(qiáng)。（3）的卡因：化學(xué)結(jié)構(gòu)和普魯卡因類似，效力和穿透力比普魯卡因強(qiáng)。,（四）實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的急救,動(dòng)物實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，可因麻醉藥過(guò)量、出血過(guò)多、分泌物或血塊堵塞氣管造成窒息以及某種藥物原因引起動(dòng)物血壓、呼吸不規(guī)則等現(xiàn)

32、象，此時(shí)應(yīng)立即進(jìn)行急救處理措施。 急救處理措施首先要迅速排查原因，并中斷誘因（如止血、停藥、排除分泌物等），然后對(duì)癥實(shí)施急救措施。,1、呼吸、心跳（血壓）的改變 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，需密切觀察實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的呼吸、心跳及血壓的變化，一者它們是實(shí)驗(yàn)反應(yīng)的數(shù)據(jù)指標(biāo)，二者是實(shí)驗(yàn)動(dòng)物狀態(tài)的主要指征。尤其對(duì)呼吸的觀察，因?yàn)閯?dòng)物的死亡首先是呼吸的停止。（1）誘發(fā)原因 ①麻醉給藥速度過(guò)快或過(guò)量：實(shí)施靜脈給藥麻醉，可因給藥速度過(guò)快或

33、過(guò)量導(dǎo)致呼吸停止。因此，為防止麻醉劑過(guò)量，注射速度一定不要過(guò)快，嚴(yán)密觀察動(dòng)物狀況，若需追加麻醉劑，一次不宜超過(guò)總量的1/5。,②氣道不暢或堵塞：常見(jiàn)于麻醉后，因?yàn)闅夤芊置谖镌龆嗷驓夤芮锌诘某鲅龎K堵塞氣管，動(dòng)物呼吸不規(guī)則、呼吸困難甚至引起的窒息。 ③大失血：如因大動(dòng)脈插管的松脫所造成的大失血。 ④實(shí)驗(yàn)藥物的作用：如靜脈注射乙酰膽堿過(guò)量或動(dòng)物對(duì)其反應(yīng)過(guò)強(qiáng)，引起心搏減弱減慢，繼而出現(xiàn)呼吸、心跳的停止。,2、急救措施

34、 （1）迅速排查、中斷、排除誘因。如應(yīng)用棉簽清除干凈氣管、氣管插管內(nèi)的分泌物及血凝塊。必要時(shí)拔出氣管插管沖洗后再行氣管插管術(shù)。 （2）根據(jù)下列不同情況采取相應(yīng)的急救措施：①呼吸極慢、不規(guī)則，但心跳正常時(shí)：給予人工呼吸-壓胸法，適當(dāng)給予蘇醒劑。②呼吸停止仍有心跳時(shí)：實(shí)施人工呼吸，必要時(shí)可使用人工呼吸機(jī)或吸氧（吸入氣中O2占95%，CO2占5％）；注射50％葡萄糖液5～10ml；給腎上腺素及蘇醒劑。③呼吸、心跳

35、均停止時(shí)：用l：10000腎上腺素溶液心內(nèi)注射，其余同②。,3、大失血 （1）誘發(fā)原因 多因動(dòng)脈插管結(jié)扎不牢、動(dòng)物掙扎，導(dǎo)致大動(dòng)脈插管的松脫，或在進(jìn)行動(dòng)脈插管術(shù)時(shí)，因未放置動(dòng)脈夾或動(dòng)脈夾夾閉不全而剪切動(dòng)脈引起。 （2）急救措施 ①立即止血：應(yīng)迅速手指壓迫或捏住出血處（盡量不要用止血鉗，以防損傷動(dòng)脈和神經(jīng)），然后仔細(xì)檢查分離出血點(diǎn)，于近心端放置動(dòng)脈夾，再行動(dòng)脈插管術(shù)。 ②補(bǔ)充血容量：若失血太多，適當(dāng)加快輸液(生

36、理鹽水)速度，增加血容量。 ③注射強(qiáng)心劑：靜脈注射1︰10000腎上腺素0.5ml。,十二、處死方法,1、頸椎脫臼法：小鼠、大鼠2、空氣栓塞法：兔、貓、犬等大動(dòng)物3、放血法：心臟放血或大血管放血4、斷頭法：小鼠、大鼠5、吸入二氧化碳6、麻醉法：如注射巴比妥類藥物,十三、動(dòng)物病理檢查,（一）一般病理檢查,1、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物不明原因死亡或?qū)嶒?yàn)需要時(shí)必須進(jìn)行尸檢以查明死亡原因。2、對(duì)動(dòng)物進(jìn)行尸檢應(yīng)該在動(dòng)物死亡后立即進(jìn)行，不能立即進(jìn)行的

37、需在冷凍的條件下保存動(dòng)物尸體，以盡量保持病變與死亡前狀態(tài)一致。3、外觀檢查：檢查動(dòng)物的發(fā)育狀況、營(yíng)養(yǎng)狀況、精神狀態(tài)、感覺(jué)器官、呼吸系統(tǒng)、消化系統(tǒng)、皮膚及被毛等指標(biāo)。4、病理剖檢：主要觀察組織器官的大小、色澤、質(zhì)地、切面和粘膜等指標(biāo)。,（二）組織病理學(xué)檢查,1、取材：按要求切取相應(yīng)的組織器官，并用固定液進(jìn)行固定。2、制片：按程序?qū)⑶腥〉慕M織器官制作成組織切片。3、讀片：在顯微鏡下觀察動(dòng)物的心、肝、脾、肺、腎、腦等重點(diǎn)器官。尸體需