血液系統(tǒng)疾病動(dòng)物模型制備

1、2017年1月8日Zeyun Zhu,血液系統(tǒng)疾病動(dòng)物模型制備及應(yīng)用,血栓形成的動(dòng)物模型,貧血的動(dòng)物模型,DIC的動(dòng)物模型,,,,,,,目錄,血液系統(tǒng)疾病動(dòng)物模型制備及應(yīng)用,一.血栓形成的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型,在活體心血管系統(tǒng)內(nèi)血液成分形成固體質(zhì)塊的過程稱為血栓形成 (thrombosis)。,血管的止血功能血液凝固反應(yīng)血小板的作用,3．機(jī)體的止、凝血功能,血小板,纖維蛋白,血管壁的損傷：內(nèi)皮損傷，內(nèi)皮下基質(zhì)( ECM) 裸露血流狀

2、態(tài)的改變：血流緩慢或渦流形成血液性質(zhì)的改變：高凝狀態(tài),血栓形成的機(jī)理：,血管內(nèi)皮損傷,損傷的因素：感染、免疫因素、機(jī)械性損傷、 化學(xué)物質(zhì)和代謝產(chǎn)物的作用,促血栓形成機(jī)制：,內(nèi)皮屏障缺失: 暴露內(nèi)皮下粘附分子，促血小板聚集內(nèi)皮下的膠原纖維暴露，從而激活Ⅻ因子，內(nèi)源性凝血系統(tǒng)被激活。內(nèi)皮促凝作用增強(qiáng)：表達(dá)組織因子,激活外凝系統(tǒng)抗凝作用減弱：TFPI、AT-III、TM減少纖溶作用減弱：t-PA和PAI

3、-1比例失調(diào)，t-PA減少血管收縮和痙攣：ET、PAF增多，PGI2和NO減少 血流變慢，有利于血栓形成,,圖9-1 凝血瀑布反應(yīng)過程：TF：組織因子；PL：磷脂；Fbg：纖維蛋白原；SFM：可溶性纖維蛋白單體；Fibrin：交聯(lián)的纖維蛋白；“a”的表示活化因子,凝血酶原激活物的形成,凝血酶的形成,纖維蛋白的形成,,,,4萬倍,凝 血 系 統(tǒng),,血小板的粘附與活化

4、,形成纖維蛋白,纖維蛋白原,聚合,血管性血友病因子,粘附,釋放,因子 I,纖維蛋白原、因子 II,凝血酶原、因子 III,組織因子,,,,抑制II, X活化,,促t-PA,u-PA釋放,,,抗 凝 血 系 統(tǒng),,體液抗凝系統(tǒng) (續(xù)),,,,,,纖溶酶原 纖溶酶 抑制物,外激活途經(jīng)： t-PA,u-PA, 內(nèi)激活途徑： IIa, Ⅻf, K,Fbg FDP Fbn

5、 (A,B,C,X,Y,D,E),,,,,,,,,,1、 纖溶酶原的激活,2、 纖維蛋白的降解,,,,纖 溶 系 統(tǒng),,,,,,1.兔體外血栓形成模型,造模原理：血流緩慢或有渦流, 血小板進(jìn)入邊流,增加黏附于管壁的可能性凝血因子易于在局部堆積和活化，啟動(dòng)凝血過程血液接觸異物能使凝血系統(tǒng)和血小板激活,造模方法：Rabbits anesthetized with intramuscular injections of 5

6、mg/kg xylazine (甲苯噻嗪) and 30 mg/kg ketamine hydrochloride, maintained diluted ketamine(2 mg/ml, IV) at a rate of 1.53 mg/kg/hrMechanical ventilation via a tracheotomy Body temperature monitored with a rectal probe an

7、d maintained at 37°C using a water-jacketed heating blanket. Extracorporeal circulation (ECC,4hrs) by cannulating the left carotid artery for ECC inflow and left femoral vein（or right external jugular vein） for E

8、CC outflow 通過肌內(nèi)注射5mg / kg賽拉嗪（甲苯噻嗪）和30mg / kg氯胺酮鹽酸鹽麻醉的兔子以1.53mg / kg / hr的速率維持稀釋的氯胺酮（2mg / ml，IV）通過機(jī)械通氣行氣管切開術(shù)用直腸探針監(jiān)測(cè)體溫，并使用水套加熱毯維持在37℃。體外循環(huán)（ECC，4小時(shí)），通過插管用于ECC流入的左頸動(dòng)脈和用于ECC流出的左股靜脈（或右外頸靜脈）,15cm，1/4 inch polyurethane c

9、atheter,15cm，1/4inch亞安酯 catheter,8cm，3/8inch聚亞安酯 catheter,頸總動(dòng)脈,股靜脈,造模方法,聚氨酯導(dǎo)管,Platelet aggregation using a Chrono-Log optical aggregometer. Obtain PRP and PPP by centrifugation, 100% light transmission set by PPP and

10、 0% by PRP,模型評(píng)估和應(yīng)用,Flowcytometry detection: Platelet activation P-selectin (CD62P) expression, Activated GP IIb/IIIa (fibrinogen receptor) Leukocyte activation Monocyte MAC-1 (CD11b/CD18) and

11、 CD14 expression Nutrophil MAC-1 and CD14 expression Platelet-leukocyte adhesion Platelet marker (CD61, CD42) and leukocyte marker (CD11b), double stained流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)：    血小板活化&

12、#160;      P-選擇素（CD62P）表達(dá)，       活化GP IIb / IIIa（纖維蛋白原受體）    白細(xì)胞活化       單核細(xì)胞MAC-1（CD11b / CD18）和CD14  

13、60;    表達(dá)Nutrophil MAC-1和CD14表達(dá)   血小板 - 白細(xì)胞粘附       血小板標(biāo)志物（CD61，CD42）和白細(xì)胞標(biāo)志物       （CD11b），雙染,模型評(píng)估和應(yīng)用,Thrombus quantitation: Circ

14、uits removed after 4 hrs on ECC Rinsed with normal saline Residual thrombus in the larger tubing of ECC photographed Image quantitated using Image J imaging software血栓定量：   在ECC上4小時(shí)后，移除電路

15、60;  用生理鹽水沖洗   拍攝在ECC的較大管中的殘余血栓   使用Image J成像軟件進(jìn)行圖像定量,模型評(píng)估和應(yīng)用,Biomaterials. 2010 Apr; 31(10): 2736.,模型評(píng)估和應(yīng)用,造模原理：血小板接觸粗糙面發(fā)生粘附激活血小板因粘附而激活，因激活而聚集，形成白色血栓,2.大鼠血栓形成模型,造模方法： 麻醉后行氣管插管 分離一側(cè)頸總動(dòng)脈

16、和另側(cè)頸外靜脈（股靜脈） 頸總動(dòng)脈和股靜脈之間接三段相連的聚乙烯管, 管中充滿肝素生理鹽水,中段內(nèi)放一段絲線 經(jīng)一定時(shí)間后取出沿絲線形成的血栓,中段絲線,頸總動(dòng)脈,股靜脈,,造模方法,模型評(píng)估和應(yīng)用： 剝離沿絲線形成的血栓，直接稱量血栓, 濕重和干重 方法簡(jiǎn)便可靠，應(yīng)用于檢測(cè)處理因素（如 藥物）對(duì)血小板粘附和聚集功能的影響,3.冠狀動(dòng)脈血栓形成模型,造模原理:直流電（ 1.5mA

17、）刺激頸動(dòng)脈壁可使血管損傷,血管內(nèi)膜變得粗糙不平,引起血小板黏附、聚集和釋放反應(yīng),促進(jìn)凝血活性；同時(shí)，受損內(nèi)膜暴露膠原纖維激活內(nèi)源性凝血系統(tǒng), 還可通過釋放組織因子激活外源性凝血系統(tǒng),導(dǎo)致動(dòng)脈管腔內(nèi)逐漸形成肉眼可見的混合血栓。,造模方法,犬經(jīng)麻醉、人工呼吸、開胸剪開心包膜, 左房插管備注射 藥物用。 分離冠狀動(dòng)脈左旋支, 用1.5mA直流電刺激左旋支6小時(shí)以 破壞血管壁,促進(jìn)血栓形成。 同時(shí)記錄冠

18、脈血流量、動(dòng)脈血壓、心外膜電圖。 6小時(shí)后處死動(dòng)物并從左心房插管注射20%活性藍(lán) (1ml/5kg)以測(cè)定左室心肌梗塞的大小。 觀察血栓形成的百分率，并稱量血栓重量,模型評(píng)估和應(yīng)用,該模型所形成的血栓組成和形態(tài)近似人冠狀動(dòng)脈，適用于冠狀動(dòng)脈急性血栓形成的機(jī)制、防治研究。,4.家兔耳緣靜脈血栓形成模型,血流速度變慢，促進(jìn)血液凝固 凝血酶使纖維蛋白原轉(zhuǎn)變成纖維蛋白單體 凝血酶使XIII激活，后者使纖維蛋

19、白單體轉(zhuǎn)變 成纖維蛋白多聚體，導(dǎo)致血液凝固 凝血酶激活蛋白C導(dǎo)致tPA釋放，后者使纖溶酶 原激活 凝血酶同時(shí)能直接激活纖溶酶，使纖維蛋白多 聚體降解導(dǎo)致血栓溶解,造模原理:,家兔耳緣靜脈分離出2cm長(zhǎng)的靜脈段,用絲線同時(shí)結(jié)扎遠(yuǎn)心端和近心端,并用血管夾夾住兩側(cè)分枝以阻止血流流入 用針頭抽去該段血液,注入凝血酶(20NIH凝血酶單位/毫升) 松開血管夾使血液流入,再夾住分枝使靜脈

20、段內(nèi)形成血塊 撤去血管夾,放開結(jié)扎線,用透射光觀察血栓消失及血流恢 復(fù)時(shí)間,造模方法：,模型評(píng)估和應(yīng)用,本模型形成的血栓為紅色血栓方法簡(jiǎn)便主要用于溶栓藥物溶栓作用的觀察。,二.DIC的動(dòng)物模型,彌散性血管內(nèi)凝血(DIC)是一種由不同原因引起的以全身性血管內(nèi)凝血系統(tǒng)激活為特征的獲得性綜合征，表現(xiàn)為先發(fā)生廣泛性微血栓形成，繼而因大量凝血因子和血小板被消耗（有時(shí)伴有纖溶亢進(jìn)），導(dǎo)致多部位出血、休克、器官功能障礙及微血管

21、病性溶血性貧血。,DIC 高凝期:血小板的激活 1) 血小板激活物：凝血酶, ADP, TXA2 , PAF, 膠 原, FN, vWF 等,,2) 血小板的作用： *為凝血因子提供表面反應(yīng)場(chǎng)所,*變形、粘附、聚集、收縮*釋放ADP, 5-HT, PAF,TXA2,,,DIC的發(fā)病機(jī)制示意圖,,DIC的發(fā)生發(fā)展機(jī)制,,,,,,,,,血小板,纖溶系統(tǒng)激活,,,高凝狀態(tài)

22、 微血栓 低凝狀態(tài),,,,DIC的發(fā)生發(fā)展機(jī)制,多發(fā)性出血,,實(shí)驗(yàn)對(duì)象：成年家兔，雌雄隨機(jī),1.家兔DIC模型的復(fù)制,造模原理正常體內(nèi)循環(huán)血液中不含組織因子，當(dāng)組織損傷或內(nèi)皮細(xì)胞和白細(xì)胞激活時(shí)，組織因子能釋放或暴露于循環(huán)血液?jiǎn)?dòng)外源性凝血過程。兔腦粉含有組織因子，靜脈注射兔腦粉后通過激活外源性凝血途徑引起DIC.,兔腦粉浸液的制備：健康成年家兔安樂處死后,即刻開顱摘取兔腦，除去血管、腦膜和其它結(jié)締組織，用PBS洗凈后，置

23、于研缽中伴丙酮研磨成粥狀懸液，靜置數(shù)分鐘后棄上清液，再加入丙酮研磨重復(fù)前述步驟多次，直至腦組織完全脫水成白色粉末，置4oC保存待用。,造模方法：,稱重后，用20%烏拉坦4ml/kg耳緣靜脈注射麻醉 動(dòng)物用生理鹽水配制4％兔腦粉溶液，按2ml／kg體重計(jì)算兔腦粉溶液，加生理鹽水稀釋至20m1后，由耳緣靜脈緩慢注入（10min）。分別于注入兔腦粉溶液前15min、注入后15min和45min，記錄家兔的血壓和呼吸，并取血置

24、于有肝素的注射器中，以測(cè)定3P試驗(yàn)、PT、纖維蛋白原、血小板計(jì)數(shù)。,造模方法,復(fù)制DIC模型：,凝血酶原時(shí)間(PT)測(cè)定①P試液配制：取兔腦粉0.2g，加入5ml NS充分混勻，置C37oC恒溫水浴箱內(nèi)孵育1hr，孵育期間用玻璃棒攪拌3至4次，孵育后混勻、離心(1000rpm x 5min）, 取上清液與等量氯化鈣（0.025mol／L）溶液混勻。取被檢血漿0.1ml，置于小試管內(nèi)放于37℃水浴中。②取待測(cè)血漿0.1ml加入P試液

25、0.2ml，輕輕地側(cè)動(dòng)，直至液體停止流動(dòng)或出現(xiàn)粗顆粒，即為凝血酶原時(shí)間.③重復(fù)3次，取平均值,家兔正常值為6～8sec。,造模方法,檢查急性DIC的幾種血液學(xué)常規(guī)方法：,血小板計(jì)數(shù)吸取20µl全血加入到0.38ml血小板稀釋液中混勻，用滴管將上述混懸液一小滴滴入血球計(jì)數(shù)板內(nèi)，靜置15min后，用高倍鏡計(jì)數(shù)。數(shù)5個(gè)方格內(nèi)之血小板數(shù)，乘以1000，即得每立方毫米血小板數(shù)。,造模方法,魚精蛋白副凝實(shí)驗(yàn)(3P實(shí)驗(yàn))

26、 ①取全血置于EP管中，離心（5000rpm x 3min）后，取上清液即血漿。 ②取血漿0.4ml置于試管中，加入0.1ml 1%硫酸魚精蛋白液混勻。③室溫下靜置30min后搖動(dòng)試管，出現(xiàn)白色纖維或凝塊者為陽性，均勻渾濁而沒有出現(xiàn)白色纖維者為陰性。,造模方法,,XⅢa,3P試驗(yàn): 血漿魚精蛋白副凝試驗(yàn)（plasma protamin paracoagulation test）,,血清纖維蛋白(原)含量測(cè)定(飽和

27、鹽水法) ①取血漿0.5m1置于12X100mm的試管中，加入飽和氯化鈉溶液4.5m1，充分混勻，置于37℃水浴中孵育3min，取血后再次混勻，用721型分光光度計(jì)比色，測(cè)定光密度.②以生理鹽水代替飽和氯化鈉溶液，進(jìn)行同樣操作作為對(duì)照。③對(duì)照管調(diào)零點(diǎn)，測(cè)出光密度(波長(zhǎng)520mm)后，按下式計(jì)算纖維蛋白原含量： 測(cè)定管光密度

28、×1000=mg% 0.5,,造模方法,動(dòng)物死后觀察各臟器 的 變 化,造模方法,尸檢,三.貧血的動(dòng)物模型,貧血是指人體外周血紅細(xì)胞容量減少，低于正常范圍下限的一種常見的臨床癥狀。,1、缺鐵性貧血?jiǎng)游锬Ｐ驮炷Ｔ恚喝辫F性貧血（iron deficiency anemia，IDA）是指各種原因引起的缺鐵導(dǎo)致紅細(xì)胞生成減少而導(dǎo)致的貧血。通過低鐵飼料喂養(yǎng)動(dòng)物使鐵攝入減少，外加多

29、次少量放血使鐵丟失，造成體內(nèi)鐵的缺乏。,造模方法實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：選用4周齡SD大鼠，雌雄不拘，體重65g左右，HGB≥130g/L。 建模方法：采用EDTA浸泡處理以去除飼料中的鐵（低鐵飼料）后喂養(yǎng)動(dòng)物。采用去離子水作為動(dòng)物飲水，以排除飲水中鐵離子的影響。在低鐵飼料飼喂2周后進(jìn)行，常用尾靜脈放血法，1～1.5ml/次，2次/周。,飼料中的含鐵量是誘導(dǎo)IDA模型的關(guān)鍵：（1）飼喂含鐵量60μmol/L。用于缺鐵性貧血藥物作用

30、和缺鐵性貧血機(jī)制的研究，但不適用于鐵吸收不良相關(guān)的防治研究。,模型評(píng)估和應(yīng)用,2、溶血性貧血?jiǎng)游锬Ｐ?溶血性貧血(hemolytic anemia,)是一種常見的貧血類型，是指由于某種原因使紅細(xì)胞存活期縮短(15-20天），破壞增加，超過了骨髓代償能力（6-8倍）所引起的一類貧血，是常見的造血系統(tǒng)疾病。,造模原理：動(dòng)物注射一定量的乙酰苯肼(acetylphenylhydrazine, APH)，APH是一種強(qiáng)氧化劑，能特異性地對(duì)

31、紅細(xì)胞起緩慢而進(jìn)行性地氧化損傷作用，尤其是干擾紅細(xì)胞內(nèi)的葡萄糖-6-磷酸脫氫酶，促進(jìn)血紅蛋白變性而形成海氏小體，也可直接破壞紅細(xì)胞的膜蛋白和脂類，使膜溶解破裂，紅細(xì)胞崩解，造成溶血性貧血。,造模方法： 小鼠第1、4、7 天皮下注射APH生 理 鹽水溶液 0.2g/kg、0.1g/kg、0.2g/kg，第9天造模成功，其 他給藥方法也可以造成此模型。 大鼠 第1、4 天 皮 下 注射 APH 生理鹽水溶液

32、 0.16g/kg、0.08g/kg，第8天造模成功；或兩次劑 量均為0.2g/kg，第10天造模成功。 家兔 以2％APH生理鹽水溶液給實(shí)驗(yàn)動(dòng)物皮下或 肌內(nèi)注 射 2～3次，劑量為 0.1g/kg，即可建立溶 血性貧血模型。,外周血血紅蛋白和紅細(xì)胞進(jìn)行性下降；網(wǎng)織紅細(xì)胞、海氏小體和白細(xì)胞總數(shù)則顯著增多。本方法建模周期短，操作簡(jiǎn)便，模型動(dòng)物癥狀和外周血象、血細(xì)胞的生化學(xué)變化與人類溶血性貧血基本相似，

33、為研究實(shí)驗(yàn)性溶血性貧血提供了一種簡(jiǎn)易模型。,模型評(píng)估和應(yīng)用,3.失血性貧血?jiǎng)游锬Ｐ驮炷Ｔ恚杭毙允а筘氀?posthemorrhagic anemia)是快速大量出血引起的貧血；慢性失血后貧血是由于長(zhǎng)期中度出血所致的小細(xì)胞性貧血。通過人為放血導(dǎo)致動(dòng)物血容量和血細(xì)胞的減少，從而導(dǎo)致動(dòng)物出現(xiàn)短期的貧血特征，以此制作失血性貧血模型。,造模方法： 小鼠: 眼眶后靜脈叢放血6～8滴(約0.5ml)，隔日 放

34、血1次，連續(xù)5次可形成慢性失血性貧血模型。 每天剪尾放血0.5ml，連續(xù)7天，也可造成貧血。 大鼠: 大鼠剪尾放血1.5～2ml，隔日1次，連續(xù)5 次，可形成慢性失血性貧血。 家兔或犬:  從動(dòng)物靜脈或者動(dòng)脈采集全血容量的 1/3，每天1次，反復(fù)幾次，即可造成失血性貧血 動(dòng)物模型。,模型評(píng)估和應(yīng)用：通過較短時(shí)間內(nèi)向體外大量放血，造成急性失血性貧血。也可通過

35、反復(fù)多次放血，造成慢性失血性貧血。該方法操作簡(jiǎn)單，指標(biāo)明確，但樣本間失血量較難控制完全一致。該模型用于一般失血性貧血的發(fā)病機(jī)制及其新藥藥效學(xué)篩選研究。,4、再生障礙性貧血?jiǎng)游锬Ｐ驮偕系K性貧血（aplastic anemia），簡(jiǎn)稱再障，系多種病因引起的造血系統(tǒng)退行性變，紅骨髓總?cè)萘坎粩鄿p少，黃骨髓不斷增加，造血衰竭，以全血細(xì)胞減少為主要表現(xiàn)的一組綜合征。建模方法包括化學(xué)建模、物理建模及免疫介導(dǎo)等。再障的發(fā)病機(jī)制尚未完全闡明。,

36、化學(xué)方法建模：造模原理：化學(xué)藥物的毒副作用抑制骨髓造血功能，誘導(dǎo)再生障礙性貧血。腺嘌呤可導(dǎo)致腎臟病變，使促紅細(xì)胞生成素（EPO）分泌不足，進(jìn)而導(dǎo)致紅系和巨核系造血障礙。白消安可選擇性抑制骨髓。苯類化學(xué)物質(zhì)進(jìn)入動(dòng)物體內(nèi)后，在骨髓富集（可達(dá)血清濃度的20倍），對(duì)骨髓有較強(qiáng)的抑制作用，可導(dǎo)致再障。,腺嘌呤致大鼠腎性貧血模型：實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：SD大鼠，雌雄不拘。利用飼喂含腺嘌呤0.75%，投飼量300mg/kg/d，連續(xù)喂

37、養(yǎng)6-7周，獲得腎衰竭貧血模型實(shí)驗(yàn)動(dòng)物紅細(xì)胞、血紅蛋白及紅細(xì)胞壓積等主要紅系指標(biāo)均、血小板均顯著下降。,白消安致骨髓抑制的再障模型：實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：小鼠、SD大鼠、家兔，雌雄不拘。建模方法：白消安（馬利蘭）（1）口服給藥，15mg/kg/周或30mg/kg/周，總給藥劑量達(dá)到120-150mg/kg時(shí)，可致家兔的再障，出現(xiàn)全血細(xì)胞減少、淋巴細(xì)胞比值增加、骨髓黃化和骨髓纖維化。（2）一次性給藥，20-35mg/kg腹腔注射，可致大鼠

38、再障。（3）小鼠每天腹腔注射15mg/kg，持續(xù)8-9天，停藥60天后，可使骨髓造血功能抑制。出現(xiàn)血細(xì)胞減少和骨髓有核細(xì)胞降低，建模穩(wěn)定、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物存活率高。,苯致骨髓抑制的再障模型：實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：CD1小鼠、家兔。建模方法：苯類化學(xué)物質(zhì)進(jìn)入動(dòng)物體內(nèi)后，在骨髓富集（可達(dá)血清濃度的20倍），對(duì)骨髓有較強(qiáng)的抑制作用，可導(dǎo)致再障。（1）皮下注射給藥，苯與玉米油1:1混合物，4.0ml/kg，3次/周，共給藥25次，可致CD1小鼠再

39、障，表現(xiàn)為全血細(xì)胞減少、骨髓黃化、脂肪細(xì)胞等非造血細(xì)胞數(shù)目增多，骨髓間質(zhì)血竇充血、出血伴水腫。（2）皮下注射給藥，純苯，0.5-1.0ml/kg/天，3次/周，連續(xù)給藥2-3周，可致全血細(xì)胞減少、造血細(xì)胞減少。,化學(xué)毒物誘導(dǎo)再障動(dòng)物模型與人類再生障礙性貧血有相似之處，該模型成功率高，結(jié)果穩(wěn)定，但造模時(shí)間過長(zhǎng)，易造成骨髓永久損害?？勺髟偕系K性貧血的發(fā)病機(jī)制研究、疾病進(jìn)展研究和治療藥物篩選的動(dòng)物模型。,模型評(píng)估和應(yīng)用,物理方法建模

40、造模原理：放射物質(zhì)產(chǎn)生的高能射線可穿透機(jī)體，起DNA 損傷，干擾DNA復(fù)制，阻斷有絲分裂，對(duì)造血干細(xì)胞等分裂增值活躍的細(xì)胞有強(qiáng)抑制作用，可使動(dòng)物造血干細(xì)胞和袓細(xì)胞減少，破壞骨髓造血細(xì)胞的增殖能力。,造模方法--外部照射建模法：實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：小鼠，雌雄不拘。建模方法：γ射線等高能射線可穿透機(jī)體，起DNA 損傷，絲分裂，對(duì)造血干細(xì)胞等分裂增值活躍的細(xì)胞有強(qiáng)抑制作用。使用鈷60等放射性同位素，照射劑量3-4Gy（戈瑞），可

41、使造血干細(xì)胞數(shù)量減少；亞致死劑量（6.0Gy）照射以后，可致小鼠全血再障，維持時(shí)間較長(zhǎng)，但輻照的劑量不好控制，稍大易致小鼠死亡，稍低則個(gè)別小鼠不易達(dá)到造血抑制效果。,造模方法--內(nèi)部照射建模法：實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：小鼠，雌雄不拘。建模方法：放射性同位素153Sm（釤）、89Sr（鍶）、32P（32磷）、186Re(186錸)、188Re(188錸)、105Rh（105銠）、177LU（177镥）和60Co（60鈷），能產(chǎn)生β射線及

42、親骨性特點(diǎn)，進(jìn)入人體后對(duì)造血組織進(jìn)行內(nèi)照射。將32磷給小鼠一次靜脈注射1.4mCi/kg體重可致再障；氯化鍶，按每克體重6或2 μCi（居里）腹腔注射給予11~12周齡的小鼠，6μCi組動(dòng)物于35d后全部死亡．2μCi組動(dòng)物全部存活。6μCi組的小鼠于21d后股骨骨髓顯示為脂肪髓。全血細(xì)胞減少，骨髓有核細(xì)胞數(shù)和CFU-S產(chǎn)率都減少。,本模型與人類再生障礙性貧血相似，該模型成功率高，結(jié)果穩(wěn)定，但需要特殊設(shè)備及防護(hù)，亦為防護(hù)照射損傷