胚胎質(zhì)量評估

1、胚胎質(zhì)量評估,胚胎質(zhì)量是妊娠成功的關(guān)鍵因素之一，胚胎的發(fā)育潛能，即胚胎質(zhì)量的評估直接影響移植胚胎的篩選和妊娠結(jié)局。,,評估胚胎質(zhì)量的方法： 傳統(tǒng)的形態(tài)學(xué)評估 動態(tài)觀測技術(shù) 胚胎“組學(xué)”評估,,目前，胚胎質(zhì)量的評估以傳統(tǒng)形態(tài)學(xué)方法為主，即根據(jù)胚胎受精與分裂的規(guī)律，在幾個(gè)特定的時(shí)間點(diǎn)，觀察胚胎形態(tài)，以形態(tài)學(xué)為標(biāo)準(zhǔn)對胚胎質(zhì)量進(jìn)行評估和分級，選擇級別最高的胚胎進(jìn)行移植。,一、傳統(tǒng)的形態(tài)學(xué)評估,1、原核評分：一般IVF或I

2、CSI后16-18小時(shí)觀察原核，主要圍繞原核及核仁大小、數(shù)目和分布情況評估。Scott-Z的評價(jià)標(biāo)準(zhǔn)，將原核分成Z1、Z2、Z3和Z4四類。,,Z1：雌雄原核中核仁數(shù)量相等且同時(shí)都極化。Z2：雌雄原核中核仁數(shù)量相等但同時(shí)散在分布,,Z3：雌雄原核中有相同的核仁數(shù)量但一個(gè)原核中為極化分布而另一個(gè)中為散在分布或者兩原核中核仁數(shù)量和/或大小不等（數(shù)量不等＞1）或核仁過大或過小。Z4：雌雄原核沒有連接或大小不等或沒有位于合子的中

3、心。,,z1、z2級原核通常會發(fā)育為較優(yōu)質(zhì)的胚胎，可獲得較高的妊娠率；Z3、Z4級原核發(fā)育的胚胎通常發(fā)育潛力潛力低下，染色體異常幾率增加。 在原核的發(fā)育過程中，核仁的分布和排列并不是固定的，所以原核期合子形態(tài)的評估應(yīng)與胚胎形態(tài)評估聯(lián)合應(yīng)用。,,2、卵裂期胚胎形態(tài)的評估 包括卵裂速度、卵裂球的大小、形狀、一致性、胞漿碎片比例。,,,WIH評分：胚胎分?jǐn)?shù)=細(xì)胞數(shù)評分+碎片評分+對稱評分,,每一個(gè)胚胎按其細(xì)胞數(shù)、碎片程

4、度、對稱性記錄-C-F-S-，如8CF4S1代表其為8細(xì)胞胚胎，碎片評分4分，對稱性評分1分。D3胚胎中，8CF4S1為優(yōu)質(zhì)細(xì)胞胚胎，5CF0S0為一多碎片不對稱5細(xì)胞胚胎。,胚胎分級評分法Ⅰ級：胚胎卵裂球呈圓/卵圓形，大小均勻，形態(tài)規(guī)則，胞質(zhì)均勻清晰，透明帶完整，無碎片或碎片少于5%。Ⅱ級：卵裂球形態(tài)不規(guī)則，大小略不規(guī)則，胞質(zhì)可有顆?，F(xiàn)象，碎片10%～20%。Ⅲ級：卵裂球大小明顯不均，可有明顯的形態(tài)不規(guī)則，胞質(zhì)可有顆?，F(xiàn)象，碎片

5、21%～50%，透明帶完整。Ⅳ級：卵裂球大小嚴(yán)重不均，胞質(zhì)可有嚴(yán)重顆?，F(xiàn)象，碎片多于50%；或24小時(shí)無細(xì)胞分裂。注：I、II、III級胚胎在發(fā)育中如果出現(xiàn)以下情況，胚胎評級時(shí)在形態(tài)學(xué)基礎(chǔ)上降一級： a、授精后20小時(shí)內(nèi)未見到原核，48小時(shí)證實(shí)為延遲受精的胚胎。 b、取卵后48小時(shí)超過8細(xì)胞，或72小時(shí)未超過5細(xì)胞,,各實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)體系、操作方法等不同導(dǎo)致胚胎的發(fā)育速度不一致，應(yīng)參照ESHRE發(fā)布Istanbul共識（

6、2011）找出符合各自中心最佳觀測點(diǎn)。,,胚胎觀察時(shí)間點(diǎn)設(shè)置（引自 Istanbul共識）,胚胎的形態(tài)學(xué)評級（引自 Istanbul共識）,3、囊胚評估（ Gardner標(biāo)準(zhǔn)） 主要從囊胚的擴(kuò)張狀態(tài)、內(nèi)細(xì)胞團(tuán)和滋養(yǎng)細(xì)胞的發(fā)育進(jìn)行評估,,首先根據(jù)囊胚的擴(kuò)張和孵出狀態(tài)分為1-6級： 1級：早期囊胚，囊胚腔小于胚胎體積的一半 2級：囊胚，囊胚腔大于或等于胚胎體積的一半 3級：完全囊胚，囊胚腔充滿整個(gè)胚胎

7、 4級：擴(kuò)張囊胚，囊胚大于整個(gè)胚胎 5級：正孵出的囊胚，滋養(yǎng)細(xì)胞開始從透明帶突出 6級：已孵出的囊胚，囊胚完全從透明帶孵出,,然后對3-6級的囊胚進(jìn)一步評價(jià)內(nèi)細(xì)胞團(tuán)（ICM）和滋養(yǎng)細(xì)胞的發(fā)育： ICM評分：A：很多細(xì)胞，包裹緊密 B：少數(shù)細(xì)胞，疏松結(jié)合 C：很少細(xì)胞 滋養(yǎng)層評分：A：很多細(xì)胞形成連續(xù)

8、上皮 B：少數(shù)細(xì)胞形成疏松上皮 C：很少細(xì)胞 根據(jù)這個(gè)分級方法，第5天最好的囊胚評分應(yīng)該是4AA,,傳統(tǒng)的胚胎形態(tài)學(xué)評分方法，需要將胚胎從培養(yǎng)箱中取出進(jìn)行觀察，這樣會因?yàn)榕囵B(yǎng)環(huán)境改變而不利于胚胎發(fā)育。胚胎學(xué)動態(tài)觀察技術(shù)可在保證胚胎穩(wěn)定發(fā)育的生長環(huán)境下，對胚胎進(jìn)行全程觀測，可以為胚胎學(xué)家提供

9、更多胚胎發(fā)育過程形態(tài)學(xué)及動力學(xué)信息，減少胚胎評估的主觀性。,二、動態(tài)觀測技術(shù),獲取胚胎發(fā)育客觀數(shù)據(jù)，支持準(zhǔn)確優(yōu)選最佳胚胎,時(shí)差胚胎成像系統(tǒng)（time-lapse）,局限性：時(shí)差胚胎成像系統(tǒng)價(jià)格昂貴，單次觀察的標(biāo)本數(shù)量有限等缺點(diǎn)，限制該技術(shù)的推廣應(yīng)用。是否可以提高妊娠結(jié)局并常規(guī)應(yīng)用與臨床尚存爭議，需要大量前瞻性研究來證明其有效性,,基因組學(xué)蛋白質(zhì)組學(xué)轉(zhuǎn)錄組學(xué)代謝組學(xué),三、胚胎“組學(xué)”評估,1、代謝組學(xué) 通過檢測胚胎

10、代謝產(chǎn)物來評估胚胎發(fā)育潛能，因具有非侵人性、低風(fēng)險(xiǎn)等優(yōu)點(diǎn)而成為目前研究熱點(diǎn)。,,胚胎代謝組學(xué)評分方法的相關(guān)技術(shù)平臺尚未完全建立，僅有限的幾種代謝物可以進(jìn)行檢測并作為評估胚胎發(fā)育的指標(biāo)。只有當(dāng)多種代謝物可以同時(shí)進(jìn)行檢測并全面反應(yīng)胚胎代謝組學(xué)圖譜的時(shí)候，胚胎代謝組學(xué)評分方法的預(yù)測價(jià)值才能完全體現(xiàn)。,,2、基因組學(xué) 胚胎染色體的異常是影響胚胎發(fā)育潛能的重要因素。隨著分子生物學(xué)技術(shù)和PGD的發(fā)展，囊胚或極體活檢結(jié)合胚胎全染色體分析的

11、PGS（pre-implantation genetic screening）技術(shù)開始應(yīng)用于臨床，為診斷單基因疾病提供了有效檢測手段，可提高單基因病和染色體異?；颊叩呐R床妊娠率和降低自然流產(chǎn)率。,,隨著新一代高通量測序（next generation sequencing，NGS)）技術(shù)的出現(xiàn)及其檢測費(fèi)用降低，可實(shí)現(xiàn)胚胎的全基因組擴(kuò)增與測序。NGS技術(shù)可以更準(zhǔn)確、有效地檢測胚胎染色體異常。一旦渡過科研與臨床轉(zhuǎn)化階段，NGS技術(shù)將在PGD