《中國藥典》2017年版儀器分析方法應(yīng)對

1、2024/2/9,1,《中國藥典》2010年版新儀器分析方法應(yīng)對,李志偉,2024/2/9,2,現(xiàn)代分析技術(shù)的應(yīng)用進(jìn)一步擴(kuò)大,2024/2/9,3,《中國藥典》2010年版一部新修訂項目,,2024/2/9,4,2010年版二部與2005年版藥典主要項目收載情況比對表,2024/2/9,5,柱色譜紙色譜薄層色譜氣相色譜,色譜法在2010年版藥典的應(yīng)用,高效液相色譜 離子色譜凝膠色譜毛細(xì)管電泳,正相色譜 反相色譜離子對

2、色譜,,2024/2/9,6,色譜法的應(yīng)用：紙色譜,紙色譜的基本原理-分配色譜固定相-吸附在濾紙上的水移動相-展開劑樣品在水和展開劑中的溶解度不同，故分配不同而達(dá)到分離。例：鹽酸苯乙雙胍,2024/2/9,7,色譜法的應(yīng)用：薄層色譜,2010版藥典（二部）采用TLC的品種數(shù)量，共435個,2024/2/9,8,色譜法的應(yīng)用：氣相色譜,,2024/2/9,9,色譜法的應(yīng)用：高效液相色譜,20世紀(jì)70年代中期，HPLC儀開始出現(xiàn)，主要

3、填料：10 µm 的無定型硅膠顆粒。70年代后期，發(fā)展了反相液相色譜。80年代，HPLC 被廣泛應(yīng)用于化合物的分離，主要填料：粒徑為5 ～ 10 µm 球形硅膠。90年代早期，粒徑為 5 µm 的高純硅膠，即所謂的 B 型硅膠被發(fā)展，并成為這個行業(yè)填料的標(biāo)準(zhǔn)，這種 B 型硅膠含有微量的金屬。90年代后期，為了滿足快速分離的需求，發(fā)展了 3 µm 或 3.5 µm 的球形硅膠，其作

4、用和性能逐漸的獲得了人們的認(rèn)同和接受。手性色譜柱的開發(fā)。21世紀(jì)早期，為適應(yīng)超快速的分離要求，粒徑小于 2 µm 的填料被開發(fā)出來，發(fā)展出了整體柱、無機(jī)和有機(jī)雜化硅膠。目前，市場上流行的分析用的 HPLC 硅膠基質(zhì)填料主要為 B 型硅膠。,填料發(fā)展史,2024/2/9,10,色譜法的應(yīng)用：高效液相色譜,填料發(fā)展史,2024/2/9,11,色譜法的應(yīng)用：高效液相色譜,2010版藥典二部中色譜柱的使用情況,2024/2/9,1

5、2,色譜法的應(yīng)用：高效液相色譜,2024/2/9,13,色譜法的應(yīng)用：高效液相色譜,2010版藥典主要修訂項目1、色譜柱 （1）常用色譜柱填料粒徑3～10μm （2）微徑柱填料粒徑 約2μm（UPLC或UFLC） 硬件須匹配 色譜條件可適當(dāng)調(diào)整 以品種正文規(guī)定條件的測定結(jié)果為準(zhǔn) 2、柱溫

6、 （1）通常為室溫 （2）以硅膠為載體的普通色譜柱，最高使用溫度不得超過60℃，（HTLC）,2024/2/9,14,基本原理離子色譜中發(fā)生的基本過程就是離子交換，因此，離子色譜本質(zhì)上就是離子交換色譜。在離子色譜的基本組成中，重要的和與其他高效液相色譜不同的就是抑制器和電導(dǎo)檢測器，離子色譜用的泵是PEEK材料襯里的不銹鋼泵。,色譜法的應(yīng)用：離子色譜,離子交換色譜法主要用于分析有機(jī)酸、氨基酸、多肽及核酸等離子型化合物的

7、分離。,2024/2/9,15,色譜法的應(yīng)用：離子色譜,陽離子交換柱山梨醇及制劑甘油果糖氯化鈉注射液甘露醇及制劑利巴韋林及制劑鹽酸二甲雙胍及制劑蘋果酸及制劑富馬酸及制劑,陰離子交換柱肝素鈉及制劑帕米磷酸二鈉及制劑氯膦酸二鈉及制劑硫酸軟骨素鈉及制劑,2024/2/9,16,例：離子色譜（氯膦酸二鈉）,照離子色譜法（附錄Ⅴ J）試驗用陰離子交換色譜柱或效能相當(dāng)），柱溫30℃，以水為流動相A，以0.1mol/L氫氧化

8、鉀溶液為流動相B，梯度洗脫，流速為1.2 ml/min。檢測器為電導(dǎo)檢測器，檢測方式為抑制電導(dǎo)檢測。,用于氯膦酸二鈉原料藥的有關(guān)物質(zhì)與制劑的含量測定,2024/2/9,17,固定相是有一定孔徑的多孔性填料，流動相是可以溶解樣品的溶劑。小分子量的化合物可以進(jìn)入孔中，滯留時間長；大分子量的化合物不能進(jìn)入孔中，直接隨流動相流出。它利用分子篩對分子量大小不同的各組分排阻能力的差異而完成分離。常用于分離高分子化合物，如多糖、多肽、蛋白質(zhì)、核

9、酸等。,色譜法的應(yīng)用：凝膠色譜法,2024/2/9,18,2010版藥典二部采用常壓凝膠色譜的品種,2024/2/9,19,2010版藥典二部采用高效凝膠色譜的品種,2024/2/9,20,2010版藥典二部采用高效凝膠色譜的品種,2024/2/9,21,,2010版藥典二部采用電泳法的品種,色譜法的應(yīng)用：電泳及毛細(xì)管電泳法,2010版藥典二部采用CE的品種,2024/2/9,22,例：毛細(xì)管電泳（抑肽酶）,sigma抑肽酶對照品毛細(xì)管

10、電泳譜圖,2024/2/9,23,例：毛細(xì)管電泳（抑肽酶）,供試品毛細(xì)管電泳譜圖（杭州澳亞生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)，批號：071015）,2024/2/9,24,例：毛細(xì)管電泳（抑肽酶）,2024/2/9,25,色譜法的應(yīng)用：毛細(xì)管電泳,分離模式毛細(xì)管區(qū)帶電泳CZE膠束電動毛細(xì)管色譜MEKC毛細(xì)管等電聚焦CIEF毛細(xì)管凝膠電泳CGE毛細(xì)管電色譜CEC,高分子化合物的分析手性化合物的分析,,,,2024/2/9,26,色譜法的應(yīng)用

11、：液相色譜常用檢測器,光學(xué)檢測器：紫外、熒光、示差折光、蒸發(fā)光散射（通用型檢測器）電化學(xué)檢測器：極譜、庫侖、安培電學(xué)檢測器：電導(dǎo)、介電常數(shù)質(zhì)譜檢測器選擇性檢測器：靈敏度較高,2024/2/9,27,2010版藥典二部采用檢測器情況,色譜法的應(yīng)用：液相色譜常用檢測器,2024/2/9,28,色譜法的應(yīng)用：蒸發(fā)光散射檢測器,優(yōu)點：適用于沒有特征紫外吸收或紫外吸收很弱的待測物，使用UV時靈敏度更低；無需衍生化而直接測定，避免了衍生帶

12、來的誤差。可以應(yīng)用有強(qiáng)紫外吸收的試劑，如氯仿、丙酮等。適用于組分復(fù)雜樣品的分析，可以進(jìn)行梯度洗脫，基線平穩(wěn)。通用型檢測器，只要待測物揮發(fā)性低于溶劑，即可適用。對不同物質(zhì)，ELSD相應(yīng)因子的變化比其它檢測器要小得多。對環(huán)境影響不靈敏，室溫下即可操作。沒有溶劑前緣峰，適用于保留時間短的物質(zhì)的檢測。與LC-MS的色譜條件一致，可直接進(jìn)行方法轉(zhuǎn)換。,2024/2/9,29,色譜法的應(yīng)用：蒸發(fā)光散射檢測器,影響ELSD響應(yīng)的因素載氣

13、流速、霧化器設(shè)計與溫度、流動相的組成和流速等影響霧化過程。被分析物的濃度和體積質(zhì)量決定了進(jìn)入光散射池的氣溶膠中的顆粒的直徑。被分析物的折射指數(shù)、光源發(fā)出的光的強(qiáng)度和波長、光電倍增管的位置等影響散射光強(qiáng)度。光電倍增管的靈敏度和入射光的強(qiáng)度決定了檢測的效率，反映為實驗者所觀測的峰面積。,2024/2/9,30,色譜法的應(yīng)用：蒸發(fā)光散射檢測器,2024/2/9,31,色譜法的應(yīng)用：蒸發(fā)光散射檢測器,圖 硫酸核糖霉素有關(guān)物質(zhì)色譜圖（蒸發(fā)

14、管溫度：65℃，分流模式）,2024/2/9,32,色譜法的應(yīng)用：蒸發(fā)光散射檢測器,圖 硫酸核糖霉素有關(guān)物質(zhì)色譜圖（蒸發(fā)管溫度：110℃，不分流模式）,2024/2/9,33,色譜法的應(yīng)用：蒸發(fā)光散射檢測器,謹(jǐn)慎使用，充分優(yōu)化實驗條件。企業(yè)質(zhì)控人員和藥檢所人員均需要。漂移管溫度的優(yōu)化：溫度對響應(yīng)值的影響無明顯的規(guī)律性。最優(yōu)溫度為在流動相基本揮發(fā)的基礎(chǔ)上，產(chǎn)生可接受噪音的最低溫度。霧化氣流速的優(yōu)化：流速越大，響應(yīng)值越低。最優(yōu)氣體流速

15、應(yīng)是在可接受噪音的基礎(chǔ)上，產(chǎn)生最大檢測響應(yīng)值的最低氣體流速。,2024/2/9,34,,色譜法的應(yīng)用：示差折光檢測器,原理：連續(xù)測定流通池中溶液折射率來測定試樣中各組分濃度。優(yōu)點：通用型檢測器缺點： 1）對溫度變化敏感 2）對溶劑組成變化敏感，不能用于梯度檢測 3）屬于中等靈敏度的檢測器,2024/2/9,35,色譜法的應(yīng)用：示差折光檢測器,山梨醇山梨醇注射液

16、甘露醇甘露醇注射液乳果糖口服溶液,葡甲胺麥芽糖乳糖β-環(huán)糊精羥丙基-β-環(huán)糊精,2024/2/9,36,色譜法的應(yīng)用：電導(dǎo)檢測器,原理：根據(jù)物質(zhì)在某些介質(zhì)中電離后所產(chǎn)生的電導(dǎo)變化來測定電離物質(zhì)含量。優(yōu)點：對流動相流速和壓力的改變不敏感，可用于梯度洗脫。缺點：對溫度變化敏感（每升高1度，電導(dǎo)率增加2%-2.5%)。廣泛應(yīng)用于離子色譜。主要用于檢測水溶性無機(jī)和有機(jī)離子。,2024/2/9,37,色譜法的應(yīng)用：電導(dǎo)檢測器,

17、,帕米膦酸二鈉注射液注射用帕米膦酸二鈉鹽酸頭孢吡肟注射用鹽酸頭孢吡肟,氯膦酸二鈉氯膦酸二鈉注射液氯膦酸二鈉膠囊,2024/2/9,38,色譜法的應(yīng)用：質(zhì)譜檢測器,2024/2/9,39,色譜法的應(yīng)用：質(zhì)譜檢測器,離子化方式：電噴霧大氣壓化學(xué)電離MALDI,質(zhì)量分析器：四級桿離子肼飛行時間磁分析器傅立葉變換離子回旋共振,方法學(xué)驗證的重要工具,,2024/2/9,40,簡介,色譜質(zhì)譜的在線聯(lián)用將色

18、譜的分離能力與質(zhì)譜的定性功能結(jié)合起來，實現(xiàn)對復(fù)雜混合物更準(zhǔn)確的定量和定性分析。而且也簡化了樣品的前處理過程，使樣品分析更簡便。色譜質(zhì)譜聯(lián)用包括氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用(GC-MS)和液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用(LC-MS)，液質(zhì)聯(lián)用與氣質(zhì)聯(lián)用互為補(bǔ)充，分析不同性質(zhì)的化合物。,2024/2/9,41,液質(zhì)聯(lián)用與氣質(zhì)聯(lián)用的區(qū)別:,氣質(zhì)聯(lián)用儀(GC-MS)是最早商品化的聯(lián)用儀器，適宜分析小分子、易揮發(fā)、熱穩(wěn)定、能氣化的化合物；用電子轟擊方式（EI）得到的譜圖

19、，可與標(biāo)準(zhǔn)譜庫對比。 液質(zhì)聯(lián)用(LC-MS)主要可解決如下幾方面的問題：不揮發(fā)性化合物分析測定；極性化合物的分析測定；熱不穩(wěn)定化合物的分析測定；大分子量化合物（包括蛋白、多肽、多聚物等）的分析測定；沒有商品化的譜庫可對比查詢，只能自己建庫或自己解析譜圖。,2024/2/9,42,2024/2/9,43,,2024/2/9,44,常見術(shù)語:,質(zhì)荷比: 離子質(zhì)量與它所帶電荷(以電子電量為單位計)的比值,寫作m/Z.峰: 質(zhì)譜圖中的離子信

20、號通常稱為離子峰或簡稱峰.離子豐度: 檢測器檢測到的離子信號強(qiáng)度.基峰: 在質(zhì)譜圖中，指定質(zhì)荷比范圍內(nèi)強(qiáng)度最大的離子峰稱作基峰.總離子流圖；質(zhì)量色譜圖；準(zhǔn)分子離子；碎片離子；多電荷離子；同位素離子,2024/2/9,45,總離子流圖:,在選定的質(zhì)量范圍內(nèi)，所有離子強(qiáng)度的總和對時間或掃描次數(shù)所作的圖,也稱TIC圖.,2024/2/9,46,質(zhì)量色譜圖,總離子流圖,2024/2/9,47,準(zhǔn)分子離子:,指與分子存在簡單關(guān)系的離子，通過

21、它可以確定分子量.液質(zhì)中最常見的準(zhǔn)分子離子峰是[M+H]+ 或[M-H]- .在ESI中, 往往生成質(zhì)量大于分子量的離子如M+1,M+23,M+39,M+18......稱準(zhǔn)分子離子,表示為:[M+H]+,[M+Na]+等,2024/2/9,48,碎片離子：,準(zhǔn)分子離子經(jīng)過一級或多級裂解生成的產(chǎn)物離子.碎片峰的數(shù)目及其豐度則與分子結(jié)構(gòu)有關(guān),數(shù)目多表示該分子較容易斷裂,豐度高的碎片峰表示該離子較穩(wěn)定,也表示分子比較容易斷裂生成該離子。

22、,2024/2/9,49,Ephedrine, MW = 165,2024/2/9,50,如何看質(zhì)譜圖：,(1)確定分子離子,即確定分子量氮規(guī)則：含偶數(shù)個氮原子的分子，其質(zhì)量數(shù)是偶數(shù)，含奇數(shù)個氮原子的分子，其質(zhì)量數(shù)是奇數(shù)。與高質(zhì)量碎片離子有合理的質(zhì)量差，凡質(zhì)量差在3~8和10~13，21~25之間均不可能，則說明是碎片或雜質(zhì)。,2024/2/9,51,(2)確定元素組成，即確定分子式或碎片化學(xué)式,高分辨質(zhì)譜可以由分子量直接計算出化合物

23、的元素組成從而推出分子式低分辨質(zhì)譜利用元素的同位素豐度，例:,2024/2/9,52,有機(jī)質(zhì)譜的特點,優(yōu)點:(1)定分子量準(zhǔn)確，其它技術(shù)無法比。(2)靈敏度高，常規(guī)10-7—10-8g,單離子檢測可達(dá)10-12g。(3)快速，幾分甚至幾秒。(4)便于混合物分析，LC/MS，MS/MS對于難分離的混合物特別有效, 其它技術(shù)無法勝任。(5)多功能，廣泛適用于各類化合物。,2024/2/9,53,EI:電子轟擊電離—硬電離。 C

24、I:化學(xué)電離—核心是質(zhì)子轉(zhuǎn)移。 FD:場解吸—目前基本被FAB取代。FAB:快原子轟擊 (LSIMS,液體二次離子質(zhì)譜 ) 。 ESI:電噴霧電離—屬最軟的電離方式。適宜極性分子的分析，能分析小分子及大分子(如蛋白質(zhì)分子多肽等) APCI:大氣壓化學(xué)電離—同上，更適宜做弱極性小分子。APPI:大氣壓光噴霧電離—同上，更適宜做非極性分子。 MALDI:基體輔助激光解吸電離。通常用于飛行時間質(zhì)譜和FT-MS，特別適合蛋白質(zhì)，多肽

25、等大分子．,2024/2/9,54,2024/2/9,55,電噴霧（ESI）的特點,通常小分子得到[M+H]+ ]+,[M+Na]+ 或[M-H]-單電荷離子，生物大分子產(chǎn)生多電荷離子，由于質(zhì)譜儀測定質(zhì)/荷比，因此質(zhì)量范圍只有幾千質(zhì)量數(shù)的質(zhì)譜儀可測定質(zhì)量數(shù)十幾萬的生物大分子。電噴霧電離是最軟的電離技術(shù)，通常只產(chǎn)生分子離子峰，因此可直接測定混合物，并可測定熱不穩(wěn)定的極性化合物；其易形成多電荷離子的特性可分析蛋白質(zhì)和DNA等生物大分子；通

26、過調(diào)節(jié)離子源電壓控制離子的碎裂（源內(nèi)CID）測定化合物結(jié)構(gòu)。,2024/2/9,56,大氣壓化學(xué)電離（APCI）特點,大氣壓化學(xué)電離也是軟電離技術(shù)，只產(chǎn)生單電荷峰，適合測定質(zhì)量數(shù)小于2000Da的弱極性的小分子化合物；適應(yīng)高流量的梯度洗脫/高低水溶液變化的流動相；通過調(diào)節(jié)離子源電壓控制離子的碎裂。,2024/2/9,57,2024/2/9,58,3.流動相的選擇,常用的流動相為甲醇、乙腈、水和它們不同比例的混合物以及一些易揮發(fā)鹽的緩沖液

27、，如甲酸銨、乙酸銨等，還可以加入易揮發(fā)酸堿如甲酸、乙酸和氨水等調(diào)節(jié)pH值。LC／MS接口避免進(jìn)入不揮發(fā)的緩沖液，避免含磷和氯的緩沖液，含鈉和鉀的成分必須＜lmmol/l。（鹽分太高會抑制離子源的信號和堵塞噴霧針及污染儀器）含甲酸（或乙酸）＜2％。含三氟乙酸≤0.5％。含三乙胺＜l％。含醋酸銨＜10一5 mmol/l。送樣前一定要摸好LC條件，能夠基本分離，緩沖體系符合MS要求。,2024/2/9,59,4.流量和色譜柱的選擇,不加熱

28、ESI的最佳流速是1—50ul／min，應(yīng)用4.6 mm內(nèi)徑LC柱時要求柱后分流，目前大多采用 l—2.1 mm內(nèi)徑的微柱，TIS源最高允許lml／min，建議使用200—400ul／minAPCI的最佳流速～lml／min，常規(guī)的直徑4.6mm柱最合適。為了提高分析效率，常采用＜ 100 mm的短柱（此時UV圖上并不能獲得完全分離，由于質(zhì)譜定量分析時使用MRM的功能，所以不要求各組分沒有完全分離）。這對于大批量定量分析可以節(jié)省大量

29、的時間。,2024/2/9,60,目標(biāo)化合物分析,（1）選擇離子監(jiān)測（SIM） SIM用于檢測已知或目標(biāo)化合物，比全掃描方式能得到更高的靈敏度。這種數(shù)據(jù)采集的方式一般用在定量目標(biāo)化合物之前，而且往往需要已知化合物的性質(zhì)。 若幾種目標(biāo)化合物用同樣的數(shù)據(jù)采集方式監(jiān)測，那么可以同時測定幾種離子.,2024/2/9,61,目標(biāo)化合物分析,（1）選擇離子監(jiān)測（SIM） SIM用于檢測已知或目標(biāo)化合物，比全掃描方

30、式能得到更高的靈敏度。這種數(shù)據(jù)采集的方式一般用在定量目標(biāo)化合物之前，而且往往需要已知化合物的性質(zhì)。 若幾種目標(biāo)化合物用同樣的數(shù)據(jù)采集方式監(jiān)測，那么可以同時測定幾種離子.,2024/2/9,62,Example of Product Ion Spectrum,Ephedrine, MW = 165,2024/2/9,63,MS/MS,2024/2/9,64,MS/MS/MS（397）,2024/2/9,65,MS/MS/MS（

31、365）,2024/2/9,66,MS/MS/MS（195）,2024/2/9,67,應(yīng)用示例,,2024/2/9,68,高效液相色譜――電噴霧串聯(lián)質(zhì)譜法測定清開靈復(fù)方中膽酸,采用HPLC/MS/MS技術(shù)，從清開靈注射液中，通過分子量、二級質(zhì)譜碎片信息定性測定了清開靈復(fù)方中的膽酸。 直接進(jìn)樣實驗。清開靈注射液經(jīng)過初步化學(xué)處理后采用電噴霧（ESI）離子源，在負(fù)離子掃描方式下，得到一極質(zhì)譜圖、即分子離子峰[M-H]-，再用二級質(zhì)譜（MS/

32、MS）掃描目標(biāo)分子離子的碎片峰。再以相同的實驗條件對標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行測定，做出其一級、二級質(zhì)譜圖。,2024/2/9,69,通過對樣品進(jìn)行分子離子峰的掃描發(fā)現(xiàn)[M-H]-的峰中有一個很強(qiáng)的407，根據(jù)樣品處理過程以及對復(fù)方各單味藥材的研究，其應(yīng)該為一有機(jī)酸的負(fù)離子峰，并初步推斷其為膽酸。（膽酸的分子量為408）。如圖所示：通過對照樣品(右)和標(biāo)準(zhǔn)品（左）的二級質(zhì)譜圖，發(fā)現(xiàn)其主要碎片峰均吻合較好。,2024/2/9,70,2024/2/9,71

33、,,2024/2/9,72,,2024/2/9,73,,2024/2/9,74,,2024/2/9,75,,2024/2/9,76,,2024/2/9,77,2024/2/9,78,,2024/2/9,79,,2024/2/9,80,用 LC-MS/MS檢測硝基呋喃類代謝物,,2024/2/9,81,2024/2/9,82,2024/2/9,83,1、對有毒藥材和成藥千里光，采用LC-MS檢測其主要 有毒成分阿多尼弗林堿，限定

34、含量不得超過0.004%2、采用LC-MS檢測川楝子、苦楝皮中的川楝素,2024/2/9,84,農(nóng)藥殘留量測定法,中藥中農(nóng)藥殘留量 中藥材及飲片22個品種,共165批樣品1、方法學(xué) 由單一GC法擴(kuò)大為GC、HPLC、GC/MS和LC/MS2、農(nóng)藥品種 由24種（其中有機(jī)氯9、擬除蟲菊酯3和有機(jī)磷12）擴(kuò)充為色譜法124種（其中有機(jī)氯和擬除蟲菊57、有機(jī)磷54和氨基甲酸酯13），按色-質(zhì)聯(lián)用法統(tǒng)計則為128種。3、測定方法分

35、兩個層次： 一為色譜法（GC、HPLC） 方法包括樣品前處理（提取、凈化）、色譜測定、色譜驗證和質(zhì)譜確證 二為色-質(zhì)聯(lián)機(jī)法（GC/MS、LC/MS） 方法包括樣品前處理（提取、凈化）、色-質(zhì)聯(lián)機(jī)測定,2024/2/9,85,農(nóng)藥分析質(zhì)譜圖及色譜圖,53種農(nóng)藥混合標(biāo)準(zhǔn)品GC/MS總離子流圖,2024/2/9,86,74種農(nóng)藥混合標(biāo)準(zhǔn)品LC/MS/MS總離子流圖

36、,2024/2/9,87,15種有機(jī)氯類農(nóng)藥對照品溶液色譜圖-ECD,2024/2/9,88,19種有機(jī)磷類農(nóng)藥對照品溶液色譜圖－FPD,2024/2/9,89,中藥指紋圖譜,色譜指紋圖譜確實能夠反映中藥內(nèi)在質(zhì)量的整體變化情況和質(zhì)量的均一程度本質(zhì)上是藥典色譜技術(shù)在應(yīng)用上的延伸控制產(chǎn)品批與批間的穩(wěn)定切實可行。2005版收載高效液相色譜特征圖譜1項2010版收載高效液相色譜特征圖譜11項，指紋圖譜11項使整體性控制中藥質(zhì)量的方法

37、學(xué)和實際應(yīng)用方面有了大幅度的提高，確保中藥質(zhì)量的均一穩(wěn)定,2024/2/9,90,中藥指紋圖譜,中成藥收載指紋圖譜6項，特征圖譜2項。 采用指紋圖譜檢測的品種 桂枝茯苓膠囊 天舒膠囊 復(fù)方丹參滴丸 注射用雙黃連 腰痛寧膠囊 諾迪康膠囊 采用特征圖譜檢測的品種 烏靈膠囊 百令膠囊,2024/2/9,91,注射用雙黃連

38、指紋圖譜,2024/2/9,92,注射用雙黃連藥材、提取物、成品的相關(guān)性,,2024/2/9,93,HPLC 指紋圖譜HPLC 指紋圖譜上的10 個峰均得到了明確的指認(rèn)，指認(rèn)的峰面積之和已占總峰面積的89%。,腫節(jié)風(fēng),2024/2/9,94,烏靈膠囊樣品色譜圖,2024/2/9,95,,本版藥典用于計算兩個圖譜相似程度的計算機(jī)軟件為國家藥典委員會發(fā)行的《中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統(tǒng)》,2024/2/9,96,例：中藥中問題的解決,1

39、 手性流動相添加劑解決了積雪草總苷等的同分異構(gòu)體色譜分離難題2 指紋圖譜的控制保證了茵陳從基原、生產(chǎn)工藝,提取物及制劑的 質(zhì)量3 有關(guān)物質(zhì)的控制完善了薄荷腦的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),2024/2/9,97,1 手性流動相添加劑解決了積雪草總苷等的同分異構(gòu)體色譜分離難題,積雪草苷羥基積雪草苷多對烏蘇烷型和齊墩果烷型結(jié)構(gòu)異構(gòu)的同分異構(gòu)體,主要成分,原標(biāo)準(zhǔn)存在問題,含量測定方法為紫外分光光度法，專屬性較差HPLC采用常規(guī)流動相，羥基積雪草苷難以與

40、其同分異構(gòu)體分離,解決方案,加入手性流動相添加劑β-環(huán)糊精，實現(xiàn)積雪草苷、羥基積雪草苷多成分同系統(tǒng)定量,困擾已久的難題,,2024/2/9,98,積雪草總苷標(biāo)準(zhǔn)特征圖譜,羥基積雪草苷,積雪草苷,,,羥基積雪草苷（medecassoside）C48H78O20,積雪草苷B（asiaticoside B）C48H78O20,2024/2/9,99,2 指紋圖譜的控制保證了茵陳從基原、生產(chǎn)工藝到提取物及制劑的質(zhì)量,“綿茵陳”及“茵陳蒿”性狀完

41、全不同有效成分差異較大,藥材基原劃分,藥材質(zhì)量控制,以具利膽作用的綠原酸和對羥基苯乙酮為指標(biāo)建立綿茵陳的多成分含量測定藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)大幅提高,提取物質(zhì)量控制,對茵陳提取物進(jìn)行深入透徹的研究比較不同提取方法的指紋圖譜，提出最優(yōu)的提取工藝從根本保證了該提取物質(zhì)量的穩(wěn)定可控,2024/2/9,100,,綠原酸,,指紋圖譜及多成分含量測定等項目的建立，全面控制茵陳提取物質(zhì)量,茵陳提取物的對照指紋圖譜,茵梔黃注射液指紋圖譜的11個共有峰的

42、來源,2024/2/9,101,有關(guān)物質(zhì)的控制完善了薄荷腦的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),采用GC-MS對其中三個主要的雜質(zhì)峰進(jìn)行歸屬闡明其化學(xué)結(jié)構(gòu),薄荷腦中雜質(zhì)歸屬,全面的方法學(xué)考察,對三個雜質(zhì)峰進(jìn)行全面的考察專屬性試驗穩(wěn)定性試驗,全面反映提取物質(zhì)量,有關(guān)物質(zhì)的檢查含量測定重金屬及有害元素的檢查溶解性、熔點、比旋度,薄荷腦有關(guān)物質(zhì)測定的氣相色譜圖,薄荷腦溶液的總離子流圖,,Isopulegol,,Cyclohexanol,,Cyclohexa

43、nol,2024/2/9,102,ICP 技術(shù)用于微量和痕量金屬測定,ICP質(zhì)譜法：以等離子體為離子源的質(zhì)譜型元素分析方法。用于痕量到微量的元素分析，尤其適用于痕量重金屬測定。ICP光譜法：以等離子體為激發(fā)光源的原子發(fā)射光譜元素分析方法，用于痕量到常量的元素分析，尤其適用于礦物類中藥、營養(yǎng)補(bǔ)充劑的元素定性定量測定。,2024/2/9,103,對于重金屬檢測提出了ICP-MS方法,2024/2/9,104,ICP-AES的特長,高靈敏度

44、（亞ppb～）高精度（CV < 1%）化學(xué)干擾少線形范圍寬（５～６個數(shù)量級）可同時進(jìn)行多元素的定性定量分析,2024/2/9,105,采用PCR方法進(jìn)行DNA分子鑒定,適合某些動植物藥烏梢蛇飲片：烏梢蛇；烏梢蛇肉；酒烏梢蛇川貝母等有研究，但未或收載以后有可能：阿膠、龜甲膠等,2024/2/9,106,紅外光譜,紅外光譜集，將出第四卷，譜號是唯一性的，如第四卷重新收錄了上卷已收錄品種的圖譜，則上卷圖譜作廢。紅外光譜廣

45、泛應(yīng)用于原料藥的鑒別中，2010年版藥典增加了紅外光譜在制劑鑒別中的應(yīng)用。如樣品制備方法能夠較好地排除輔料的干擾，則采用全譜比較法；如不能，則采用了特征波數(shù)法。對于具有同質(zhì)異晶現(xiàn)象的藥品，應(yīng)選用有效晶型的圖譜，或分別與同晶型對照品/光譜比較；晶型不一致，需要轉(zhuǎn)晶的，應(yīng)規(guī)定轉(zhuǎn)晶條件，給出處理方法和重結(jié)晶所用溶劑。,2024/2/9,107,紅外光譜主要修訂項目,1、原料藥鑒別 遇多晶干擾 （1）按規(guī)定對樣品進(jìn)行預(yù)處

46、理（重結(jié)晶與干燥） （2）采用對照品平行操作 （3）采用溶液法 2、制劑鑒別 （1）提?。ㄈ軇┑倪x擇） 輔料無干擾，晶型不變 直接與標(biāo)準(zhǔn)光譜比對 輔料無干擾，晶型有變 與對照品同法處理后比對 輔料有干擾，晶型不變 在指紋區(qū)選擇3～5個特征譜帶

47、 波數(shù)允差為0.5% 輔料有干擾，晶型有變 不宜采用紅外鑒別3、多組份原料藥的鑒別 可借鑒制劑鑒別的方法4、混晶中無效或低效晶型的限度控制 采用基線密度計算指定譜帶的吸光度后，再計算各晶型的相對含量（甲苯咪唑和棕櫚氯霉素）,2024/2/9,108,TOC分析法用于注射用水及清潔生產(chǎn),2024/2/9,109,,,,清洗驗證 良好的清潔結(jié)果的重要性,